Dózisfüggő gátlását gyomor sérülés által hidrogén lúgos elektrolizált ivás water

dózis-függő gátlását gyomor sérülés által hidrogén lúgos elektrolizált ivóvíz
Abstract
alapon
Hidrogén leírták, hogy enyhíti a kár számos betegség modell és egy potenciális additív ivóvízben, hogy védő hatást a betegek számos klinikai tanulmány kimutatta. Azonban, hiányában a dózis-válasz összefüggést az alkalmazás hidrogén rejtélyes. Megkíséreltük, hogy azonosítsa a dózis-válasz összefüggés hidrogén lúgos elektrolizált ivóvíz keresztül aszpirin által kiváltott gyomor sérülés modellben.
Módszerek
Ebben a vizsgálatban, hidrogénben gazdag lúgos vizet kapunk hozzáadásával H 2 elektrolizált víz egy atmoszféra nyomáson. 2 hét után az ivóvíz, kimutattuk a gyomornyálkahártya-károsodás együtt MPO, MDA és 8-OHdG patkány aszpirin által kiváltott gyomor sérülés modellben. Katalógusa Eredmények katalógusa Hidrogén-dózisfüggő gátlását figyelték meg a gyomor nyálkahártya. Under pH = 8,5, 0,07, 0,22 és 0,84 ppm-hidrogén mutatott magas korrelációt gátló hatást mutatta, az erózió területen, MPO aktivitást és az MDA-tartalom a gyomorban. Gyomor szövettan is bizonyította a gátlás által okozott károk hidrogénben gazdag lúgos víz. Azonban a 8-OHdG szint a szérumban nem volt jelentős hidrogén-dózisfüggő hatást. pH 9,5 magasabb volt, de nem szignifikáns gátló válaszreakciót összehasonlítva pH 8,5.
Következtetések
hidrogén hatékonyan enyhítette a gyomor sérülés által indukált aszpirin-HCl, és a gátló hatás dózisfüggő. Ennek oka az lehet, hogy a hidrogénben gazdag víz közvetlenül kölcsönhatásba a célszövetet, míg a hidrogén koncentrációja a vérben a pufferelt máj glikogén, felidézve egy elnyomott dózis-válasz hatást. Drinking hidrogénben gazdag víz védelmet nyújthat egészséges egyéneket gyomor által okozott oxidatív stressz.
Kulcsszavak
alkáli elektrolízises víz A dózis-válasz Gyomor sérülés Hidrogén Oxidatív stressz alapon
endogén hidrogén által termelt vastagbél erjedés a gyomor-bél traktus rágcsálók [1], emberekben [2], és még a rovarok a [3, 4]. Hidrogén gyorsan behatol a szövetek és a véredények által szabad diffúzió, majd szállítják minden szerveket. Az átlagos H 2 koncentráció a nyálka réteg az egér gyomor 43 uM [5]. Míg a májban, a lépben és a vékonybél, a koncentrációk 53, 48 és 168 jiM illetőleg [6].
A fiziológiai szerepe H 2 még nem világos. Ohsawa et al. [7] megállapította, hogy a hidrogén antioxidáns és anti-apoptotikus szerepet, amely védi az agy ellen ischaemia-reperfúziós sérülés és a stroke által szelektíven semlegesítő hidroxil gyökök és peroxinitrit. Ezek az eredmények tehát arra utalnak, hogy a H 2 lehet alkalmazni terápiás, mint egy orvosi gáz. Sőt, klinikai alkalmazása H 2 megmutatta számos további előnyt. Először, a H 2 nem reagál a szuperoxid anion gyökök és a hidrogén-peroxid, amely fontos fiziológiai szerepet [7]. Másodszor, könnyen szállítani keresztül gáz, ivóvíz, és intravénás infúzió; és annak kedvező eloszlása ​​funkciók lehetővé teszik, hogy elérje sok szervet, hogy más gyógyszerek nem éri el, hogy hozzáférést biztosít a mitokondriumok, sejtmag, és a vér-agy gáton. És végül, H 2 kiváltja kevés mellékhatással. Alkalmazása a Hydreliox, egy egzotikus légzés keverékét 49% -os hidrogén-, 50% héliumot és 1% oxigén, használt mély búvár, bemutatja annak biztonságát az emberi felhasználásra szánt [8, 9]. Hasonlóképpen, hat klinikai vizsgálatok, amelyek közül a leghosszabb kezelés 6 hónap volt, az is kiderült, nincs kimutatható káros hatása a hidrogén az ivóvízben, hemodialízis vagy intravénás infúzió [10-16].
Az elmúlt öt évben a nyilvánvaló védő hatása H 2 dokumentálták 63 betegség modellek és az emberi betegségek [17], beleértve a cerebrális infarktus, a máj és a szívizom-károsodás, Parkinson-betegség, metabolikus szindróma, gyulladás és allergia, szervátültetés, és így tovább [18-20] . Azonban lehetséges hatásait hidrogén gyomor sérülések még meg kell tanulmányozni, és továbbá, a hiánya egy dózis-válasz hatást a hidrogén, mint terápiás molekula korábbi vizsgálatokban meglepő több okból is. Először is, a hidrogén mennyiségét által felvett ivóvíz sokkal kisebb, mint belélegzése által 1-4% -os hidrogén-gáz, azonban a hidrogén-gazdag víz mutatta, hasonló vagy még jobb, kedvező hatásokat, mint hidrogéngáz [10, 21]. Másodszor, az összeg a endogén hidrogén által generált bélbaktériumok (körülbelül 1 liter /nap) sokkal több, mint az összeget ivóvíz hidrogénben gazdag víz (általában kevesebb, mint 50 milliliter /nap) [18, 21]. Harmadszor, ivás hidrogénben gazdag víz különböző koncentrációkban, az intravénás különböző mennyiségű hidrogén sóoldatban, vagy belélegzése különböző mennyiségű hidrogéngáz nem mutatott észrevehető különbséget a hatások [22-24].
Ebben a vizsgálatban, alkáli-hidrogén-gazdag víz keletkezett keresztül elektrolízis. Vegyes hidrogén és nitrogén-gáz (2: 8 és 7: 3) arra használták, hogy állítsa be a hidrogén koncentrációja a vízben, hogy három különböző hidrogén-koncentrációk (0,07 ppm, 0,22 ppm, 0,84 ppm). Nem végeztünk semlegesítés a vizsgálatok többnyire a múltban tették [25-28], mivel a magas pH és hidrogén enyhíti aszpirin sérülés a gyomorban. Elektrolizált lúgos víz önmagában is gátolja az aszpirin által kiváltott gyomor sérülés [29], és ezen felül, a lúgos terhelés vízben megakadályozhatja fokozott vizelettel történő kiválasztását ásványi anyagok, mint a kalcium és a magnézium, okozta a szervezet savasságát [30]. Dózisfüggő gátló hatását hidrogén figyeltek meg a gyomor, de nem voltak nyilvánvalóak a szérumban. Az eredmények arra utalnak, hogy dózis-válasz hatás áll fenn, amikor a hidrogén közvetlen kölcsönhatásba lép a szövet, de egy nagy adag hidrogén nem növelheti jótékony hatását a célszervekben keresztül vér szállítására.
Módszerek
Etikai Nyilatkozat
Állat karbantartás és kísérleti eljárásokat hajtottak végre szigorú összhangban az Institutional Animál Care and Use Committee (IACUC) Tsinghua Egyetem, amely egy ága pekingi Animal Care and Use Committee. Minden kísérletet felül és hagyja jóvá IACUC (engedély száma 12-LY-02), és minden erőfeszítést tettek arra, hogy minimálisra csökkentsék a szenvedést. Katalógusa reagensek Tanuld az összes oldatokat készítettünk a használat előtt. Elektrolizált lúgos vizet kapunk lúgos ion vízelektrolizálót (TK7505, Panasonic, Japán), a kereskedelmi elektrolizáló Japánból. A 8-OHdG és HEL ELISA kit vásároltak a Japán Intézet Control of Aging (JalCA). Tiobarbitursav kapunk J &K Scientific Ltd; Hexadecil trimetil-ammónium-bromid szerezte a pekingi River Dawn Biotechnology Co., Ltd; és 3,3 ', 5,5', - tetrametil-benzidin kaptunk Amresco, USA.
és állatok gyomor sérülés modell
hím Sprague-Dawley-patkányokat súlyozásával 150-170 g cégtől vásároltuk Peking Vital River Laboratories, és elhelyezett a Center of Biomedical Analysis, Tsinghua Egyetemen. A kísérlet kezdődött, amikor a patkányok elérte 200-220 g súlyú. A lúgos víz hidrogén készítettünk minden este lehetőség csapvíz (pH = 6,8, vezetőképesség 40 mikrosec /cm) és kitöltött alumínium zsákok. Két pH-értékek, 8,5 és 9,5, választottak ebben a vizsgálatban. pH 8,5 és 9,5 a maximum határait ivóvíz szabvány Kínában, és a standard elektrolizáló Japánban (lásd Japán Ipari Szabvány, JIS T 2004: 2005)., ill. Lúgos víz pH 8,5 és 9,5 tartalmazott 0,07 ppm és 0,22 ppm hidrogén illetve az elektrolízis során (A elektrolizáló Panasonic TK7505 Japán). Továbbá, több hidrogén vízben oldjuk, vegyes hidrogén és nitrogén-gáz (2: 8 és 7: 3), amely töltjük az alumínium zsákokat egy légköri nyomáson, annak érdekében, hogy így 0,22 ppm-nél és 0,84 ppm-hidrogén-víz. Használata nitrogén gáz keverékek volt szempont a biztonság. Továbbá, a légkör tartalmaz 78% -a nitrogén, amely valószínűtlenné teszi, egy funkcionális gáz a vizsgálatba. A hidrogén koncentrációját a vízben mértük hordozható oldott hidrogén méter DH-35A (DKK-TOA Corporation, Japán). A hidrogén-koncentrációt fenn 24 órán nélkül kimutatható változás.
Minden állatot tartottuk egy külön ketrecben, és szabadon hozzáférnek az víz éjjel 6:00-09:00. A vízfelvétel és a testsúlyt naponta feljegyeztük minden egyes patkánynak. Minden patkányokat véletlenszerűen osztottuk 7 csoportok 6-8 patkányok minden egyes, és mivel a különböző ivóvíz (1. táblázat). A csoport: pH 9,5, 0,84 ppm H 2, B: pH 9,5, 0,22 ppm H 2, C: pH = 8,5, 0,84 ppm H 2, D: pH 8,5, 0,22 ppm H 2, E: pH = 8,5, 0,07 ppm H 2, F: pH = 6,8, 0 ppm H 2 (facility csapvíz), G: pH = 6,8, 0 ppm H 2 (lehetőség csapvíz ). A végső hidrogén dózisát minden egyes csoport az 1. táblázatban felsorolt ​​után két héttel a kezelés után az állatokat éheztettük 18 órán át hidrogén-gazdag víz továbbra is elérhető. Az ivóvíz eltávolítjuk előtt egy órával a patkányok alatt adagolt 200 mg /kg aszpirin és 0,15 N HCI-ot (8 ml /kg) együtt 1% -os karboxi-metil-cellulóz-nátrium által intubálás. G csoport volt éheztetett, de nem kezelt aszpirin-HCl táblázatban feltüntetett 1. Három óra múlva az állatokat elaltattuk uretánnal (1 mg /kg), és vért vettünk a hasi aorta, amelyet követően azokat leöltük kivéreztetés. 1. táblázat a kezelt csoportok átlagos testsúlygyarapodás, napi vízfogyasztása és jelenléte a gyomor sérülés katalógusa csoportok
pH
H
2 | ( ppm)
H katalógusa 2 | dózis (mg /d /kg) hotelben † átlag ± SE
Súlygyarapodás (g)
‡ átlag ± SE
vízbevitelnek (ml /d) átlag ± SE
Sérülés
Egy fiatal 9.5
0,84 katalógusa 80,6 ± 1,9 85,5 ± 6,0 katalógusa katalógusa 25,6 ± 0,8 katalógusa Igen katalógusa B katalógusa 9.5 katalógusa 0,22 katalógusa 21,1 ± 1,6 81,9 ± 6,4 katalógusa
26,6 ± 2,5 katalógusa Igen katalógusa C katalógusa 8.5 katalógusa 0,84 katalógusa 80,6 ± 2,4 87,3 ± 5,0 katalógusa katalógusa 25,9 ± 1,2 katalógusa Igen katalógusa D katalógusa 8.5
0,22 katalógusa 20,1 ± 0,8 78,5 ± 5,6 katalógusa katalógusa 25,2 ± 1,4 katalógusa Igen katalógusa E
8,5 katalógusa 0,07 katalógusa 6,8 ± 0,4 katalógusa 92,5 ± 3,0
26,9 ± 1,8 katalógusa Igen katalógusa F
6,8 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 89,9 ± 3,5 27,2 ± 1,1 katalógusa katalógusa Igen katalógusa G katalógusa 6.8
0
0 katalógusa 81,5 ± 7,0 26,3 ± 0,8 katalógusa katalógusa No katalógusa Mindegyik csoport tagjai 6-8 patkányok. † A H2 dózis minden patkány került kiszámításra (hidrogén koncentráció x átlagos napi vízfogyasztás) /átlagos testtömege. ‡ Súlygyarapodás úgy számoltuk, hogy a testtömeg, a kezelés első napján a testtömeg előtt gyomor sérülést. Nincs szignifikáns különbség a különböző csoportok között.
Értékelése gyomornyálkahártya léziók
után az állatokat leöltük, az egyes gyomrot kivettük, nyitni, és PBS-sel mostuk. Az erodált terület felszínén a hátsó gyomor (gyomor pontszám) mértük boncoló mikroszkóp alatt egy személy nem tapasztalható az adagolást. A szövettani értékelés, egy darab szerv fal alján régió a gyomrot felvágjuk, paraffinba ágyazott, perjódsavat-Schiff (PAS) festettük, hematoxilin ellen-festettük, és megvizsgáltuk fénymikroszkóppal. Gyomornyálkahártya lekapartuk a többi gyomor egy üveg tárgylemezre, és -80 ° C-on.
Myeloperoxidáz (MPO) aktivitás
Mindegyik gyomor mintát őrölt által Teflon Potter-Elvehjem homogenizáló 500 ul 10 mM kálium-foszfát puffer (pH = 7,8), amely 30 mM kálium-klorid, 1% fenil-metánszulfonil-fluorid és 5 mM EDTA-t, hogy egy homogenizátumot. A homogenizátumot ezután centrifugáljuk, és a felülúszót kimutatására használják a fehérje koncentrációt. A pelletet újra homogenizáltuk 500 ul 0,05 M kálium-foszfát-puffer (pH = 5,4), amely 0,5% hexadecil-trimetil-ammónium-bromidot, majd centrifugáljuk. A 100 ul felülúszót ezután összekeverjük azonos térfogatú 0,05 M kálium-foszfát-puffer (pH = 5,4) tartalmazó 15 mM 3,3 ', 5,5', - tetrametil-benzidin és 2% H 2 O 2. Az MPO aktivitást detektáltuk mikrolemez leolvasóval 630 nm-en 15 másodpercenként 5 percen, és fejeztük egység per mg fehérje. Az MPO egységet olyan megváltozását az abszorbancia (1,0 /perc) a 630 nm-nél, szobahőmérsékleten. A teljes protein koncentráció a szövetben homogenizátumok mértük Coomassie Brilliant kék festési eljárással.
Malondialdehid (MDA) relatív koncentrációja
Az MDA keletkezik a gyomor nyálkahártya, mint a termék a lipidperoxidáció, detektáltuk tiobarbitursav reakció. Gyomornyálkahártya homogenizáltuk teflon Potter-Elvehjem homogenizátor és ultrahanggal 500 ul 0,15 M KCl-0 ° C hőmérsékleten, hogy egy homogenizátumot. A homogenizátumot szét két csövet. Az egyik mérésére protein koncentrációt, míg a másik 150 ul volt kimutatására használt MDA. Protein denaturáltuk hozzáadásával 150 ul SDS-t, 150 | il ecetsavat és 150 ul frissen készített 0,82% tiobarbitursav oldatot. Az elegyet helyezzük forrásban lévő vízfürdőbe 45 percig, majd lehűtjük és centrifugáljuk. A felülúszót használták, hogy meghatározzák a relatív MDA koncentráció mikrolemez leolvasóval 532 nm-en.
Mérése szérum 8-hidroxi-2'-dezoxi-guanozin (8-OHdG) katalógusa 8-OHdG koncentráció a biomarker a DNS-károsodás és detektáltuk ELISA kit (Kat. IM-KOGHS 040914E) a Japán Intézet Control of Aging. A tesztet azért végeztük, követve a gyártó utasításait.
Hexanoil-lizin (HEL) addukt koncentráció
HEL is egy biomarker oxidatív stressz. A HEL koncentrációját szérumban ELISA-kit (Kat. KHL-700 /E) a Japán Intézet Control of Aging. A vizsgálatot végeztük a gyártó utasításai szerint.
Statisztikai analízis
Eredmények mutatták, mint az átlag ± standard hiba (SE), és az adatokat hasonlítottuk össze variancia analízissel (ANOVA) egyirányú teszt által PASW Statisztika 18. a különbségeket akkor tekintettük szignifikánsnak, ha a P-érték kisebb volt, mint 0,05 Tukey-tesztet.
eredménye
Ivóvíz-fogyasztás és a gyomor károsodást
mint várható volt, az átlagos mennyisége vízfogyasztás és az átlagos súlygyarapodás per patkány hasonlóak voltak az egyes kezelési csoportokban, amint azt az 1. táblázat Ezek az eredmények arra utalnak, hogy mind a pH-érték (8,5 és 9,5) és a hidrogén koncentráció a ivóvíz (0,84 ppm, 0,22 ppm és 0,07 ppm) nem befolyásolta az állatok vágy, hogy fogyasztani a víz, és ezért a patkányok nőtt ugyanolyan ütemben. Így a gyomor sérülés nem kellett volna által érintett potenciális különbségeket ivás viselkedést.
Anatómiai eredmények azt mutatták, hogy a csoportok a magas pH-érték 9,5, a magas hidrogén-koncentráció 0,84 ppm, vagy mindkettő (A, B és C), volt szignifikáns gátlás a gyomor károsodás összehasonlítva a csoport ivóvíz létesítmény csapvízzel (F csoport) (1. ábra). És ugyanakkor pH, jelentős hidrogén-dózisfüggő gátlását volt látható a csoportokon belül a C, D és E. Ha a gátló hatást, és a hidrogén-koncentrációkat összehasonlítva, a magas pozitív korrelációt találtunk (2. táblázat). Ugyanakkor hidrogén koncentráció, magas pH-érték is, feltéve, több gátlás (például A és C vagy B és D), bár ezek a hatások nem voltak statisztikailag szignifikánsak. 1. ábra mérése gyomor pontszám (a terület gyomor eróziók) 7 csoportban. Az értékek az átlag ± SE 6-8 állatokat. **: P < 0,01, míg az F csoportban (semleges víz-szabályozás). #: P < 0,05, míg az E csoportban (alacsony hidrogén és alacsony pH-csoport). Katalógusa 2. táblázat korrelációja gátlás hatása és a hidrogén koncentrációja 8,5 pH elektrolizált víz katalógusa Csoport
Erózió katalógusa † Matton MPO katalógusa † Matton MDA katalógusa † Matton 8-OHdG katalógusa ‡ Matton C: H2 (6.8 ng /d /kg) hotelben 2,1% 1,6% katalógusa katalógusa 32,6% -2,3% katalógusa katalógusa d: H2 (20,1 ng /d /kg) hotelben 13,6% 36,8% katalógusa katalógusa 36,8% 41,9% katalógusa katalógusa E: H2 (80,6 ng /d /kg) hotelben 38,6% 77,3% katalógusa katalógusa 61,9% 41,4% katalógusa katalógusa Pearson együttható katalógusa 0.990
0.952
0,999 katalógusa 0,633 katalógusa † Nyálkahártya védő hatása az egyes hidrogén koncentrációja számítottuk ki (kár szintje F csoport - kár szintű csoport C vagy D vagy E) /(kár szintjét F csoport - sérülés szintje G csoport).
‡ a szérum, mivel a gyomor károsodást nem befolyásolja a szérum 8-OHdG szint, a védőhatást úgy számítottuk ki (kár szint F csoport - kár szintű csoport C vagy D vagy E ) /kár szintjét csoport F. katalógusa gátlását is bizonyít keresztül szövettani vizsgálat. Különböző régióiban a gyomor különböző volt kár szintjét, amelyek nem voltak összhangban az egy adagot kapó csoportban. Azt találtuk, hogy az alsó régióban a gyomor általában egyenletesen által károsított aszpirin-HCI, és nem a vérzés erózió Grove volt megfigyelhető ebben a régióban. Ezért szövettani szövetek azon részét választottuk összehasonlítás mint azt mutatta, ábra a 2a. Ahogy az várható volt, erős erózió nem volt megfigyelhető az összes mintát (2b ábra). A mintákat a G csoport volt ép nyálkahártya réteg. F csoport kimutatta, hogy a nyálkahártya felszínén elválik sejt törmelékeket, valamint hibás nyálka termelés számos régióban, amelyek rámutattak a 2b. A mintákat az A és a C viszonylag érintetlen nyálkaréteg, és a legtöbb nyálkakiválasztás sejteket még működőképes képest F csoport, amely illusztrált gátló hatását hidrogénben gazdag elektrolizált vizet. B csoport, D és E is festett, és ellenőrizni mikroszkóp alatt, és volt középső szintje a sérülés (Plusz fájl 1: S2 kép). De a fenotípus nem lehet számszerűsíteni. 2. ábra A helyzet a szövettani minta (A) és PAS-festéssel a mirigyes gyomorban csoportok A, C, F és G (B). Kék nyíl jelzi a nyálka réteg (piros) a felszínen a belső fal, és a piros nyíl rámutat a haldoklók és a levált sejtek. Fekete nyilak mutatják nyákot termelő sejtek (piros). Nagyítás: 100. Minden a képek mutatják a reprezentatív fenotípusát azok megfelelő mintákban.
Hidrogénben gazdag elektrolizált víz enyhíthető neutrofil-mediált gyulladás és az oxidatív stressz gyomornyálkahártya
myeloperoxidáz (MPO) aktivitás a nyálkahártya detektáltuk tiobarbitursav savas reakció és normalizált protein koncentráció minden mintára. A tevékenységek gátolható pH = 9,5 és 8,5 elektrolizált vizet egy hidrogén dózisfüggő módon összehasonlítva csoport F (3. ábra). A gátlási szintet jól korrelált a hidrogén adag (2. táblázat). 3. ábra A hatás a hidrogén MPO aktivitást gyomornyálkahártya után megsérült aszpirin-HCI. Az értékek az átlag ± SE 6-8 állatokat. *: P < 0,05, míg a csoportok E (alacsony hidrogén és alacsony pH-csoport) vagy F (semleges víz kontroll).
Malondialdehid (MDA) keletkezik reaktív oxigénfajták (ROS), és mint ilyen, akkor vizsgáljuk in vivo, mint egy biomarker az oxidatív stressz. A nyálkahártya-MDA-tartalom hidrogénben gazdag elektrolizált víz kezelt csoportok szignifikáns csökkenés összehasonlítva a csoport ivóvíz változatlan víz (4. ábra). És gátolja mintázat hasonló az eredményeket a gyomor pontszám és az MPO aktivitást. 4. ábra MDA szintek gyomornyálkahártya 7 csoportok. A mennyiség az MDA normalizálódott a MDA szintet G csoport (nincs sérülés kontroll). Az értékek az átlag ± SE 6-8 állatokat. *: P < 0,05, míg a F csoport (semleges víz kontroll).
Hidrogénben gazdag elektrolizált víz csökkentette a 8-OHdG szérum
8-OHdG egyik domináns formái szabad gyök által indukált DNS-károsodást sejtmagok és mitokondrium, és ezért széles körben használják a biomarker oxidatív stressz és a karcinogenezis. A szérum 8-OHdG szignifikánsan csökkent a magas hidrogén csoportokban (hidrogén koncentráció nagyobb, vagy egyenlő, mint 0,22 ppm), mint a csapvíz kontroll csoport F (5. ábra). Azonban szemben a többi vizsgálati végpontok csökkentési szinteket és a hidrogén-adagok nem korrelált a pH = 8,5 csoportokban, ami arra utal, hogy a dózis-válasz hatás nem volt jelen a szérum 8-OHdG (2. táblázat). A többi különböző megállapítás 8-OHdG teszt volt, hogy a G csoport is hasonló szinten az F csoportban, amely arra utalna, mindkét csoportban háttér-8-OHdG. Egy másik oxidatív stressz marker, HEL, amely érzékeli a lipid peroxidációt, szintén teszteltünk a szérumban, de az eredmények nem mutattak szignifikáns különbséget az összes csoport (Plusz fájl 1: ábra S3). 5. ábra A szérum 8-OHdG szinten a különböző csoportokban. Az értékek az átlag ± SE 6-8 állatokat. ***: P < 0,001, míg a csoport E (alacsony hidrogén és alacsony pH-csoport), N (semleges víz kontroll), vagy a G (nincs sérülés kontroll).
Megbeszélés
Mint már korábban említettük, az egyik nyugtalanító kérdés az alkalmazása során hidrogén a hiányzó dózis-válasz hatást. Ez a vizsgálat, feltéve, néhány bizonyíték, hogy a hidrogén dózisfüggő gátló hatást lehet megfigyelni a aszpirin által kiváltott gyomor sérülés modell keresztül elektrolizált lúgos víz, és így, a hiánya egy megállapított közötti kapcsolat dózis és a hatás szintjének következménye lehet a szállítási mód, kísérleti tervezés, és célszerv.
Tanulmányunkban adtunk három különböző koncentrációjú hidrogén-lúgos vízben, és azt tapasztaltuk, nyilvánvaló dózisfüggő hatás a gyomor nyálkahártyájának, míg a legtöbb más jelentések csak hatásait hasonlították össze, vagy anélkül hidrogén [31-37]. Mindegyikük alkalmazott magas hidrogén koncentrációja 0,8 ppm és 1,5 ppm, és mindegyik megfigyelt védő hatásait ellen különféle betegségek vagy orvosi kezelések. Annak ellenére, hogy nem adja meg a pontos ivás mennyisége az állatok, meg tudjuk becsülni a hidrogén adagot annak koncentrációja, ugyanis az állatok mindig szabadon hozzáférhető víz és a hidrogén nem változtatnak alkoholfogyasztást. Csak egy tanulmány alkalmazott két különböző hidrogén koncentrációban (0,08 és 1,5 ppm) a kezelésére egér modell a Parkinson-kór. Azonban ezek az eredmények arra utalnak két dózisban volt egy hasonló funkciót enyhítésében folyamatban a neurodegeneratív [22]. A másik fő különbség a mi és a korábbi tanulmányok az, hogy a hidrogént keresztül szállítják ivóvíz közvetlenül a gyomorba, ahelyett, hogy által szállított vért a célszervek [17, 18]. A víz bejuthat a gyomorban, és úgy véljük, hogy a hidrogén koncentrációja a nyálkahártya sejtek a gyomor függően változnak hidrogén koncentráció a vízben. Ahhoz azonban, hogy más szervek ez nem lehet a helyzet, mivel a hidrogén kerül a vérbe először, majd szállítják minden szerv az egész szervezetben. Hidrogén farmakokinetikáját nem teljesen tisztázott; Még egy friss tanulmány kimutatta, hogy a máj glikogén lerakódhat hidrogén ivóvíz [38]. Ez a tanulmány nem csak kiderült az egyik oka annak, hogy fogyasztása még egy kis mennyiségű hidrogén alatt egy rövid idő alatt hatékonyan javítja a betegségek különböző modellek, hanem azt javasolta, hogy a hidrogén koncentrációja lehet pufferelt a vérben. Tartjuk a glikogén puffer hatása, mint az egyik oka, hogy nincs dózis-válasz jelenségek sok más tanulmányok. Ebben a vizsgálatban, a 8-OHdG szérumban nélkül módosítható dózisfüggő hatást, amely támogatja ezt a hipotézist.
Habár a csoportoknak a magas hidrogén-koncentráció szignifikánsan alacsonyabb szérum 8-OHdG szinten összehasonlítva a csoport ivóvíz létesítmény csapvíz után gyomor sérülés , meglepő volt, hogy a G csoport, amelyet nem sérült aszpirinnel-HCI, közel azonos szintet 8-OHdG mint a sérült csoport F. Ez azt jelentheti, hogy a kis DNS-károsodás történt a gyomorban, vagy hogy a károsodott gyomor nyálkahártya nem engedte 8-OHdG vérbe alatt 3 órával sérülést. A hidrogén csökkentették a háttér szintjét 8-OHdG a szérumban. Úgy gondoljuk, ez lehet ugyanaz oka változatlan HEL szint a szérumban. Az oxidatív károsodás a gyomor nem volt hatással a vér nagyon sok, és a háttér szintjét HEL túl alacsony ahhoz, hogy kimutathatók a készlet.
Bár sok végpont teszteltük mi sérülés modellben, gyomorrák pontszám, MPO aktivitást és MDA mennyiség a legjobbak. A gyomor erózió nyilvánvaló alatt boncolás mikroszkóp 3 óra után az aszpirin-sósavas kezelést, és az erózió területén lehet számítani egy mikro-uralkodó. Azonban a súlyos eróziót nem vették figyelembe, mint a legtöbb korábbi tanulmányok nem. Néhány erózió területeket szabálytalan fehér foltok, míg a vérzés volt látható más régiókban. Nincs szabály beállítása a súlyokat a különböző eróziós megszorítások. Úgy gondoljuk, ez lehet egy esetleges javítására, amely lehet tenni erre a sérülés modell a jövőben.
MPO legnagyobb mennyiségben kifejezve granulociták. Jelentős bizonyítékok azt sugallják, hogy a neutrofil-mediált gyulladás szerepet játszik a fejlesztés a aszpirin által kiváltott gyomor sérülés [39-42]. Naito et al. [29] megállapította, hogy az MPO aktivitás növekedett a gyomornyálkahártya 1 óra elteltével aszpirin kezelés és kitartott a 3 H, és csökkenthető lenne pH = 10 elektrolizált vizet. A gyulladás általában által indukált pusztuló sejtek a szövetben. Nehéz közvetlenül érzékeli a mennyiséget haldokló sejtek nyálkahártya, mivel egy részük már darabokra tört. Így vizsgálva az élő gyulladásos sejtek egy bölcs döntés.
Oxidatív stressz egyik fő hatása okozta aszpirin kezelés a gyomorban. És a hidrogén leírták, hogy enyhíti az oxidatív stressz számos szövetben [17, 18]. MDA egyike a legismertebb biomarkerek oxidatív stressz. Ebből származik a lebomlását, többszörösen telítetlen lipid a reaktív oxigéngyökök. Ez az egyik a sok reakcióképes elektrofil fajok, amelyeket kovalens fehérje adduktokat nevezik fejlett lipoxidation végtermék (ALE). Mielőtt láttuk az eredményeket, féltünk, hogy MDA túlságosan reakcióképes kell kimutatni a mintákban volt, amely tárolja a hűtőben néhány hétig. Szerencsére az eredmények azt mutatták, következetes csökkentését MDA hidrogénnel adagot, ami jól mutatja, hogy egy megbízható és stabil végpont aszpirin-HCl sérülés modellben.
A TNF-α expressziója leírták, hogy jelentősen javuljon a aszpirin-HCl sérült gyomor és a szérum [29]. És ivóvíz elektrolizált lúgos víz csökkentheti a TNF-α mindkét fehérje és mRNS szinten. Azt is teszteltük a TNF-α mRNS szintje a gyomorban és a TNF-α mRNS volt növekedés a sérült gyomorban. Ugyanakkor nem találtunk szignifikáns eltérést a különböző kezelt csoportok (Plusz fájl 1: Ábra S4). Ez amiatt lehet, hogy az idő pont a betakarítás a szövetmintában. A TNF-α egy korai responder a gyomor sérülések és indukálhat apoptózist gyomor hámsejtek valamint endoteliális sejtek [43-45]. A jelentős gátlás a TNF-α mRNS expresszió által elektrolizált vízkezelő figyelhető után 1 órával aszpirin kezelés [29], de nem a 3 órát kommunikált a szerző ezt a korábbi munkát. Után 1 órával az aszpirin-HCl-kezelés, az erózió nem lehet könnyen megfigyelhető, ami azt jelenti, a nyálkahártya-réteg még mindig viszonylag érintetlen. Abban az időben, minden darab a gyomor is lehetnek hasonló a TNF-α mRNS szintjén. Azonban, amikor néhány eróziók képződött 3 óra, a különböző darabok a gyomor fal különböző lehet a TNF-a-mRNS-szinteket, mivel az erózió részek viszonylag több súlyosan sérült. Úgy véljük, hogy ez jobb, hogy az egész gyomor TNF-α mRNS mennyiségi meghatározására más, mint egy darab a gyomorfal, de szükség lesz egy dupla állatok számát.
Másik kérdéses pont az a mechanizmus a hidrogénben gazdag elektrolizált lúgos víz okozta károsodás gátló hatása. Korai munka már kimutatták, hogy gátolja a gyomor károsodást közvetve által kiváltott folyamatos elektrolizált lúgos víz kezelés, de nem közvetlen kölcsönhatás az elektrolizált lúgos víz és az aszpirin [29]. Ezen túlmenően a gátló hatásait elektrolizált lúgos víz nem okozza azáltal, hogy csökkenti a gyomor savasságát, amely érintheti felszívódását aszpirin [29]. A hidrogénnel elektrolizált lúgos víz javasolta mint aktív molekuláris. Ohsawa et al. talált közvetlen közötti reakciót hidrogén és hidroxil gyök és peroxinitrit [7]. Minden szerző elolvasta és jóváhagyta a végleges kéziratot. Katalógusa

• Az emberi gyomor Helicobacter pylori kórokozó potenciállal rendelkezik aceton karboxiláz, amely fokozza a képességét, hogy gyarmatosítani egerek
• Létrehozása és azonosítását nyúlmodellben peritoneális carcinomatosis származó gyomorrák