Sårläkning och mekanism (er) av åtgärder som deltar i magskyddande aktiviteten hos fraktioner erhållna från Syngonanthus arthrotrichus och Syngonanthus bisulcatus

Sårläkning och mekanism (er) av åtgärder som deltar i magskyddande aktiviteten hos fraktioner erhållna från Syngonanthus arthrotrichus Mössor och Syngonanthus bisulcatus
abstrakt
Bakgrund
Syngonanthus arthrotrichus Mössor och Syngonanthus bisulcatus
, för närvarande känd för Comanthera aciphylla
(Bong.) LRParra & Giul. Mössor och Comanthera bisulcata
(Koern.) L.R. Parra & Giul, populärt kallad i Brasilien som "sempre-Vivas
" är växter från familjen eriocaulaceae. De finns i delstaterna Minas Gerais och Bahia. Arten är kända för att vara rik på flavonoider som deras magskyddande aktivitet har tillskrivits. I denna forskning var experimentella protokoll utfördes för att klarlägga de associerade verkningsmekanismer.
Metoder
aktivitet utvärderades med användning av inducerade magsårsmodeller (ättiksyra och etanol-inducerade gastriska lesioner i NEM eller L-NAME förbehandlade möss, och av ischemi /reperfusion). Antioxidant enzymer, serum somatostatin och gastrin utvärderades också.
Resultat
I kroniska magsår, en enda daglig oral dos av Sa
-FRF eller Sb
-FRF (100 mg /kg kroppsvikt .) under 14 dagar i följd accelererade sårläkning i en omfattning som liknar den som ses med en lika stor dos av cimetidin. För-behandling av möss med NEM (N-etylmaleimid) eller L-NAME (N-nitro-L-arginin) avskaffade den skyddande aktiviteten hos Sa
-FRF, Sa
-FDF, Sb-FDF och Sb
-FRF eller Sa
-FRF och Sb
-FRF, respektive, vilket tyder på att antioxidantföreningar och kväveoxidsyntasaktivitet är involverade i magskyddande. Sa
-FRF och Sb
-FRF (100 mg /kg p.o.) skyddade magslemhinnan mot sårbildning som inducerades genom ischemi /reperfusion (72 och 76%, respektive). Det minskade också lipidperoxidation och återställde den totala tioler i magväggen av möss som hade behandlats med etanol. När den administreras till råttor har inkommit till etanol-inducerade gastriska lesioner, Sa
-FRF och Sb
-FRF (100 mg /kg, po) ökade de somatostatin serumnivåerna, medan de gastrin Serumkoncentrationer proportionellt minskat.
slutsatser
resultaten tyder på betydande läkande effekter och gastro aktivitet för Sa
-FRF och Sb
-FRF, vilket sannolikt innebär deltagande av SH-grupper, kväveoxid (NO), antioxidantsystemet, somatostatin , och gastrin. Alla är integrerade delar av mag-tarmslemhinnan är cytoprotektiva mekanismer mot aggressiva faktorer.
Nyckelord
eriocaulaceae Syngonanthus arthrotrichus
Syngonanthus bisulcatus
Flavonoid Healing magskyddande aktivitet Bakgrund
Magsår är en sjukdom som drabbar många människor runt världen, och dess progression tillskrivs en obalans mellan aggressiva faktorer (syra, pepsin, Helicobacter pylori,
stress, alkohol, och fortsatt användning av icke-steroida antiinflammatoriska läkemedel), och skyddsfaktorer (slem, bikarbonat, prostaglandin, blodflöde, antioxidantsystemet, sulfhydrylföreningar, kväveoxid och cellproliferation) [1-3].
magsår är en vanlig sjukdom med flera etiologier. Faktorer som rökning, stress, en felaktig kost, och mag-skyddande brister är nära besläktade med utvecklingen av magslemhinnan sår. Bakteriell infektion med Helicobacter pylori
har också pekats ut som en viktig predisponerande faktor för att utveckla magsår [4]. Sälja Thru åren har förvärvat en stor förråd av kunskap om utvecklingen av magsår, och en bred spektrum av läkemedel för behandlingen, såsom antacida, protonpumpshämmare, antikolinergika och histamin-receptorantagonister [5], har utvecklats. Ändå existerande terapier har ofta biverkningar (överkänslighet, arytmi, impotens, gynekomasti och hematopoetiska ändringar), och är dyra. Detta har stimulerat fortsatt forskning för nya terapeutiska alternativ. Vid denna punkt, vi sätter medicinalväxter för deras olika fördelar såsom större tillgänglighet, effektivare skydd, lägre kostnad och lägre toxicitet [6, 7].
Tidigt sökning i området för medicinalväxt vid behandling av peptisk sår öppnade upptäckten av det första läkemedlet effektivt mot magsår; karbenoxolon från Glycyrrhiza glabra
[8-10], och lakritsrot flytande extrakt har använts för att behandla magsår hos patienter som inte hade förbättrats med konventionell medicin. Den glycyrrhizin av lakrits befanns stoppa två enzymer som bryter ner prostaglandin E [11]. Effektiviteten av andra källor växt som kål att förbättra magsår har rapporterats [12-14].
Bland de medicinalväxter som presenteras som kandidater för behandling av magsår noterar vi de som tillhör eriocaulaceae familjen. Familjen består av mer än 10 släkten, som är ungefär 1200 arter. Även om det har en pan tropiskt distribution, de flesta arter förekommer i närheten av tropiska områden, såsom i bergen i Venezuela, eller i Brasilien [15-17]. Eriocaulaceae är den dominerande växtbaserade familj av Cipó bergskedjan i delstaten Minas Gerais, Brasilien. Vi fokuserade på arter som tillhör släktet Syngonanthus
(Comanthera
), S. arthrotrichus och S. bisulcatus.
Dessa arter går nu under beteckningen Comanthera aciphylla och Comanthera bisulcata
[18],
respektive, och populärt kallad "sempre-Vivas-mini-saia" och "sempre-Vivas-chapadeira".
phytochemical screening av extrakt av Syngonanthus bisulcatus
(Comanthera bisulcata
(Koern. ) LR Parra & Giul) och Syngonanthus artrotrichus
(Comanthera aciphylla
(Bong) LRParra &. Giul) utförs av Batista [19] visade att de viktigaste föreningar som finns i extrakten var flavonoider och fenolföreningar.
kromatografiska studie av flavonoid rika fraktionerna erhållna från skaft av arten S. bisulcatus
och S. arthrotricus
utfördes såsom beskrivits av Batista [19]. de arter Syngonanthus bisulcatus
presenterade större föreningar såsom luteolin och glykosylerade derivat av luteolin bekräftar de tidigare studierna som beskrivs av Agrawal [20] och Harbone [21].
studier utförda av Coelho [22] visade i denna fraktion även närvaron av isovitexin, lutonarine och 5, 6 , 3 ', 4'-tetrahidroxi-7-OD-glucopiranosilflavone. I flavonoid rika fraktioner av Syngonanthus arthrotrichus
var möjligt att isolera föreningen luteolin. I studier som tidigare beskrivits av Agrawal [20] och Rinaldi [23] identifierades också luteolina, apigenin och luteolin-6-C-β-D-glucopiranoside.
Forskning har visat att medicinalväxter främja antiinflammatoriska, antioxidanter, och gastroprotektiva effekter [24-29]. Den gastro aktivitet främjas av flavonoider har visats i en litteraturöversikt publicerad av Mota et al. [30]. Studier utförda av vår grupp har visat magskyddande aktivitet växtarter såsom S. arthrotrichus
[31], S. bisulcatus
[32], och S. macrolepsis
[33] som alla samlades i delstaten Minas Gerais, Brasilien.
bakgrund av ovanstående, som syftar vi att undersöka gastro effekter främjas av fraktioner erhållna från S. arthrotrichus Mössor och S. bisulcatus
, med hjälp av olika inducerade magsårsmodeller, för att sålunda utvärdera verkningsmekanismer involverade.
metoder
Djur sälja The experimentella protokoll godkändes av kommittén för etik inom djurförsöks (CEEA /UNICAMP) med registernummer 502-1, 2002. Man Swiss albinomöss (30-40 g) eller Wistar albinoråttor (180-250 g), från central Animal House of State University of Campinas (CEMIB /UNICAMP) användes. Djuren matades en certifierad Nuvilab CR-diet, och dessutom hade fri tillgång till vatten under fasta förhållanden belysnings (12/12 h ljus /mörker-cykel), luftfuktighet (60 ± 1,0%), och en temperatur på (21 , 5 ° ± 1,0). Fastan användes före alla analyser, eftersom standardläkemedel administrerades oralt (genom sondmatning) eller genom intra-duodenal rutt med hjälp av en 0,9% saltlösning (10 ml /kg) som fordonet (negativ kontroll). Djuren hölls i burar med upphöjda breda nätgolv att förhindra coprophagy.
Droger sälja The droger och reagens framställdes omedelbart före användning. Följande läkemedel användes: cimetidin (Sigma Chemical Co., USA), lansoprazol (AChE, Brasilien), absolut etanol (Merck, Tyskland), saltsyra (Merck, Tyskland), Nω-nitro-L-arginin-metylester-hydroklorid (Sigma Chemical Co, USA), och N-etylmaleimid (Sigma Chemical Co., USA). Alla läkemedel och fraktioner administreras oralt (sondmatning), eller intraduodenalt.
Växtmaterial
Scapes S. arthrotrichus, Mössor och S. bisulcatus
samlades in 2002 vid Cipó Mountain, Diamantina City, i staten Minas Gerais, Brasilien. S. arthrotrichus
bekräftades av Dr Ana Maria Giulietti, och S. bisulcatus
bekräftades av Dr Paulo Takeo Sano. En kupong på varje prov (n ° 2122 och 2137, respektive) deponerades i Herbarium av Botaniska institutionen vid Institute of Biosciences, USP.
Scapes (500 g) av S. arthrotrichus Mössor och S . bisulcatus
uppsamlas i Serra do Cipó, Minas Gerais, torkades i en ugn vid 60 ° C under 4 d och sedan pulvriserad. Det resulterande materialet urlakade sekventiellt vid rumstemperatur i metylenklorid, EEOH och 70% EEOH för en vecka med varje lösningsmedel. Extrakten filtrerades och koncentrerades under vakuum
EEOH och 70% EEOH extrakten analyserades genom TLC på kiselgelplattor med användning av n- BuOH /HOAc /H2O. (6: 1: 2, volym /volym /volym). TLC-fläckar detekterades med användning av UV-ljus och NP /PEG-reagens som ger gula eller orange fläckar karakteristiska för flavonoider. Eftersom dessa extrakt innehöll material med liknande reduktionsfaktorer (RF), de kombinerade och vägdes. Ett prov (3,5 g) av det etanolextrakt löstes i 10 ml MeOH och fraktionerades på en Sephadex LH-20 CC-kolonn (10033 cm). Extraktet eluerades i MeOH vid en flödeshastighet av 0,5 ml /min och 3 ml fraktioner uppsamlades. Fraktionerna kombinerades baserat på deras migration i TLC-systemet beskrivet ovan. Fraktioner 1-22 var bristfälliga på flavonoider, fraktioner 23-47 var mellanliggande fraktioner och fraktioner 58-64 var rikt på flavonoider och administrerades vid en dos av 100 mg /kg.
Healing i ättiksyra-inducerad gastrisk lesion
experimentet utfördes i enlighet med metoden beskriven av Takagi et al. [34], med vissa modifieringar. Efter fasta under 24 h, och under anestesi, en laparotomi utfördes på alla djur genom en mittlinje epigastrisk snitt. Efter exponering magen tillsattes en 30% (volym /volym) ättiksyra-lösning (0,05 ml) injicerades i subserosal skiktet i den glandulära delen av den främre väggen. Buken tillslöts därefter och alla djur utfodrades normalt. Två dagar efter ättiksyra indution av gastrisk skada, var behandlingar inletts med orala administrationer av Sa
-FRF, Sa
-FDF; Sb
-FRF, sb
-FDF; cimetidin (100 mg /kg); eller 0,9% saltlösning vid 10 ml /kg. Alla behandlingar administrerades oralt en gång per dag under 14 på varandra följande dagar. På dagen efter den sista läkemedelsadministrationen, (och efter fasta i 12 h), avlivades råttorna, och deras magar avlägsnades därefter. Den makroskopiska sår sårytan (ULA) av de inre och yttre gränser i mm 2 bestämdes såsom beskrivits i metoden.
Etanol-inducerade gastriska lesioner i NEM förbehandlade möss
Mössen delades in grupper (n
= 5-7 djur), och fastades under 24 h. De behandlades sedan intraperitonealt med NEM (N-etylmaleimid) vid 10 mg /kg, eller 0,9% saltlösning vid 10 ml /kg. Vid trettio minuter, fick grupperna en oral dos av antingen 0,9% saltlösning, Sa
-FRF, Sa
-FDF, Sb
-FRF eller Sb
-FDF. Efter 60 min tillsattes alla grupper behandlades oralt med 0,2 ml HCl /etanol för att inducera gastriska magsår [35]. En timme efter administreringen av HCl /etanol djuren avlivades genom cervikal dislokation och deras magar skars ut. Gastric skada bestämdes med hjälp av ulcerös index (UI) som beskrivs av Szelenyi och Thiemer [36].
Etanol-inducerade gastrointestinala lesioner i L-NAME-förbehandlade möss
Mössen fastade under 24 timmar och uppdelade i 3 grupper (n
= 5-7), enligt förbehandlingar: en grupp fick 0,9% saltlösning (10 ml /kg, SC), och två grupperna fick Nω-L-arginin-metylester (L -name), en oxid-syntas blockerande medel, vid 70 mg /kg (se). Trettio minuter efter administrering har grupperna behandlades oralt med antingen 0,9% saltlösning, Sa
-FRF, Sa
-FDF, Sb
-FRF eller Sb
-FDF. Sextio minuter senare gavs alla grupper behandlades oralt med 0,2 ml HCl /etanol för att inducera magsår [37]. En timme senare fick djuren avlivas genom cervikal dislokation, var magarna skars ut och gastrisk skada bestämdes såsom tidigare beskrivits.
Gastric lesion inducerad av ischemi /reperfusion
Ischemi /reperfusionsskada producerades i råttorna genom en metod som föreslagits av Ueda et al. [38]. Råttorna fick fasta under 24 timmar och delas (enligt förbehandling) i fyra grupper (n
= 5-7): normal (ingen förbehandling och varken ischemi eller reperfusion), bluff (ingen förbehandling) , 0,9% saltlösning (10 ml /kg), och Sa
-FRF eller Sb
-FRF. Efter 15 min fick råttorna anestetiserades genom en intramuskulär injektion av ketamin (50 mg /kg) och xylazin (10 mg /kg). Den vänstra sidan av buken rakades och ett snitt gjordes. I korthet sattes celiaki artären dissekerades fria från överflödigt fett, och fastspänd i 30 minuter (ischemi fas), med användning av en mikro-bulldog klämma. Re-syresättning fick därefter genom avlägsnande av klämman efter 60 min (reperfusion fas). Den makroskopiska sår skadade området bestämdes.
Antioxidant aktivitet
att bedöma effekterna av Sa
-FRF och Sb
-FRF på antioxidativa system analyserade vi lipidperoxidation, och nivåerna av sulfhydryler (GSH), i glandulärmagen slemhinnan i dessa råttor med ischemi /reperfusion gastriska lesioner.
lipidperoxidering (LPO) Review De totala tiobarbitursyra reaktiva ämnen (TBARS) nivå i gastrisk vävnad, (ett index på malonyldialdehyd (MDA) produktion), bestämdes enligt den metod som utvecklats av Ohkawa et al. [39]. Gastriska segment skars i små bitar och homogeniserades sedan i en iskall fosfatbuffert (50 mM, pH 7,4), för att ge en 10% homogenat. Homogenatet av den glandulära delen av magen späddes i 0,15 M KCl (förhållande 01:10). Sedan till 0,5 ml av denna homogenat tillsattes 0,2 ml av dodecylsulfat (8,1%), 1,5 ml ättiksyra 20%, (justerat med en NaOH-lösning till pH 3,5), 1,5 ml tiobarbitursyra (0,8% vikt /volym) , och 0,3 ml destillerat vatten. Därefter upphettades blandningen i ett vattenbad (vattenbad) med termostaten inställd på 95 ° C under 1 timme. Efter detta ades proverna kyldes och sattes till 1 ml destillerat vatten, och 5 ml av en n-butanol + pyridin (15: 1, vol /vol) blandning, och skakades i en vortex under 1 min, och därefter centrifugerades vid 1400 G under 10 minuter. Slutligen absorbansen avlästes vid 532 nm. TEPP (1,1,3,3-tetraetoxipropan) utspädd i etanol användes som standard. Resultaten uttrycktes som pikomol av de substanser som reagerar med tiobarbitursyra (TBARS), per mg protein (nmol TBARS. Mg protein -1).
Totala tiolgrupper i magen homogenatet
De totala tioler i magsäcksvävnaden bestämdes enligt Faure och Lafond [40] metod med ändringar. Kortfattat, 500 pl av 0,25 mM Tris och 20 mM EDTA-lösning (pH 8,2), sattes till en alikvot (100 ml) av homogenatet (i en fosfat 10 mM buffert, pH 7,8), som erhållits från magen skrapning. Absorbansen (A1) hos den slutliga lösningen bestämdes genom spektrofotometer vid 412 nm. Därefter tillsattes 10

• Magskyddande mekanismen för paederia foetida Linn. (Rubiaceae) - en populär ätbar växt som används av stam- gemenskap nordöstra India
• Effekten av kanel på magsäckstömning, artärstelhet, postprandial lipemi, glykemi och aptit svar på fettrik breakfast