Uno studio dell'attività antimicrobica, tossicità acuta e effetto citoprotettivo di un estratto polierbale in un'ulcera gastrica rat etanolo-HCl model

Uno studio dell'attività antimicrobica, tossicità acuta e effetto citoprotettivo di un estratto polierbale in un modello di ulcera gastrica di ratto etanolo-HCl
Astratto
sfondo
Il decotto delle parti aeree di Rhynchosia recinosa
(A.Rich.) Bak. [Fabaceae] è utilizzato in combinazione con le cortecce staminali del Ozoroa insignis
Del. (Anacardiaceae), Maytenus senegalensis
(Lam.) Excell. [Celastraceae] Entada abyssinica
Steud. ex A.Rich [Fabaceae] e Lannea schimperi
(Hochst.) Engl. [Anacardiaceae] come un rimedio tradizionale per la gestione delle ulcere peptiche. Tuttavia, la sicurezza e l'efficacia di questa preparazione polierbale non è stata valutata. Questo studio riporta sul profilo fitochimica e alcune attività biologiche delle singole estratti vegetali e una combinazione di estratti delle cinque piante.
Metodi
Una miscela di 80% di etanolo estratti di R. recinosa, O. insignis, M . senegalensis, E. abyssinica Comprare e L. schimperi
a dosi di 100, 200, 400 e 800 mg /kg peso corporeo sono stati valutati per la capacità di proteggere ratti Sprague Dawley da ulcera gastrica da una miscela etanolo-HCl. effetto citoprotettivo è stata valutata in confronto con un gruppo di controllo negativo in 1% di Tween 80 in soluzione salina normale e un gruppo di controllo positivo dato 40 mg /kg di peso corporeo pantoprazolo. I singoli estratti e le loro combinazioni sono stati testati anche per l'attività antibatterica contro quattro batteri Gram-negativi; Escherichia coli
(ATCC 25922), Salmonella typhi
(NCTC 8385), Vibrio cholerae
(isolato clinico), e Klebsiella pneumoniae
(isolato clinico) utilizzando il metodo microdiluizione. Inoltre gli estratti sono stati valutati per la tossicità artemie e tossicità acuta nel topo. test fitochimici sono stati fatti usando metodi standard per determinare la presenza di tannini, saponine, steroidi, glicosidi cardiaci, flavonoidi, alcaloidi e terpenoidi nei singoli estratti vegetali e nell'estratto mista delle cinque piante.
Risultati
combinata estratti etanolici delle 5 piante causato una protezione dipendente dalla dose contro etanolo /HCl ulcere indotte di ratto mucosa gastrica, raggiungendo 81,7% significa protezione rispetto alla protezione 87,5% da 40 mg /kg di peso corporeo pantoprazolo. Entrambi i singoli estratti vegetali e gli estratti misti di 5 piante esposte debole per attività antibatterica moderata contro quattro G-ve batteri. Nonostante Ozoroa insignis
sia tossico per topi a dosi superiori a 1000 mg /kg di peso corporeo, gli altri estratti vegetali e l'estratto combinato delle 5 piante erano tollerati dai topi fino a 5000 mg /kg di peso corporeo. I risultati del test del gambero di salamoia hanno mostrato lo stesso modello di tossicità con Ozoroa insignis
è il più tossico (LC 50 = 10.63 mg /ml). test fitochimici hanno mostrato che l'estratto combinato dei cinque impianti conteneva tannini, saponine, steroidi, glicosidi cardiaci, flavonoidi e terpenoidi. Flavonoidi, tannini e terpenoidi sono noti per avere attività antiossidante.
Conclusione
L'estratto combinato delle cinque piante ha mostrato un'attività protettiva dose-dipendente nel modello di ulcera gastrica di ratto etanolo-HCl. Gli estratti esposti anche debole attività antibatterica contro quattro batteri Gram-negativi e bassa tossicità acuta nel topo e gamberetti salamoia. Anche se i risultati supportano reclami da parte di guaritori tradizionali che utilizzano un decotto di cinque impianti per il trattamento delle ulcere peptiche, più modelli di ulcere gastriche e studi di tossicità animale adeguati sono necessari per convalidare possibile uso clinico dell'estratto polierbale. È altresì evidente che le dosi degli estratti grezzi mostrano la protezione della mucosa gastrica sono troppo grandi per la traduzione realistico diretta applicazione clinica, ma ulteriori studi usando saggio biologico guidato frazionamento sono importanti per entrambi identificare frazioni più pratiche o attivi composti /s.
Parole
Ozoroa insignis Maytenus senegalensis Entada abyssinica Lannea schimperi gastroprotezione Tossicità Sfondo
le persone Haya della regione di Kagera sono dotati di una cultura ricca di pratica medicina tradizionale nei confronti di un ampio scambio interculturale tra le diverse tribù etniche del Lago Victoria bacino [1]. In questa serie di rapporti combinati documentazione [1, 2] e di valutazione per stabilire la prova del concetto è stato fatto. In relazioni precedenti una buona conferma di crediti nei confronti di attività antimicrobica è stata stabilita da prove di laboratorio [3-5] e utilizzando elementi dalla letteratura, che ha indicato un accordo medio del 20-30% con le indicazioni terapeutiche da parte dei guaritori tradizionali Kagera [1, 2].
una delle piante utilizzate nella medicina tradizionale è Rhynchosia recinosa
(A.Rich.) Bak. (Fabaceae) [Akashakanyaliyoya]. Le parti aeree di questa pianta sono pestate insieme alle cortecce staminali del Ozoroa insignis
Del. (Anacardiaceae) [Omkerenge], Maytenus senegalensis
(Lam.) Excell. (Celastraceae) [Omurosho], Entada abyssinica
Steud. ex A. Rich (Fabaceae) [Mwiganjula] e Lannea schimperi
(Hochst.) Engl. (Anacardiaceae) [Omusangesange] e poi bollita con acqua per fare un decotto. Il decotto viene somministrato alla dose di un bicchiere tre volte al giorno per il trattamento di ulcere peptiche. In questo studio una miscela di estratti delle cinque piante è stata valutata per la capacità di offrire protezione contro l'etanolo-HCl indotta ulcera gastrica [6-8], attività antibatterica contro alcuni batteri Gram-negativi, la tossicità acuta nel topo e la tossicità artemie.
Metodi
Materiali
Etanolo (assoluto) è stato acquistato da Fluka Chemie GmbH (Sigma-Aldrich®, Zwijndrecht, Paesi Bassi), mentre dimetilsolfossido (DMSO) è stato acquistato da Sigma® (Poole, Dorset, Regno Unito). Tryptone Soya brodo è stato acquistato da HIMEDIA® (Himedia Laboratories Pvt Ltd, Mumbai, India. Escherichia coli
(ATCC 25922), Salmonella typhi
(NCTC 8385), Vibrio cholerae
(isolato clinico), e Klebsiella pneumoniae
(isolato clinico) sono stati ottenuti dal Dipartimento di Microbiologia e Immunologia, Università Muhimbili della Salute e Scienze alleate (MUHAS). p-
Iodonitrotetrazolio cloruro (INT) è stato acquistato da Sigma® (Sigma-Aldrich®, St Louis, Stati Uniti d'America), mentre pantoprazolo (polvere liofilizzata per iniezione endovenosa;. Batch No. JKJ 3534D e realizzato da Sun Pharmaceutical Industries Ltd, Halol-Baroda Highway, Halol-389.350, Gujarat, India), è stato acquistato da una farmacia locale. le uova del gambero di salamoia sono stati acquistati da Innovations acquacoltura (Grahamstown 6140, Sudafrica) e sale marino è stato preparato a livello locale facendo evaporare l'acqua raccolta dall'Oceano indiano, lungo la Costa Dar es Salaam. Ciclofosfamide, NEOPHOS 500® (CIPLA Ltd, MIDC Boisar, INDIA) è stato acquistato da una farmacia locale a Dar es Salaam, in Tanzania.
Collezione di materiale vegetale
le piante sono state raccolte e identificate dal Sig Selemani Haji del Dipartimento di Botanica dell'Università di Dar es Salaam e il campione di voucher; R. resinosa
(MJM 3506), O. insignis
(MJM 3476), E. abyssinica
(MJM 3466), L. schimperi
(MJM 3411) e M. Senegalensis
(MJM 3428) sono conservati negli erbari dell 'Istituto di Medicina tradizionale, MUHAS e Dipartimento di Botanica dell'Università di Dar es Salaam.
Preparazione di estratti vegetali
Tutti i campioni di piante sono state aria essiccati e macinati in polvere utilizzato una macchina impianto di macinazione. Campioni di ciascun piante sono stati macerati con 80% di etanolo a temperatura ambiente per 24 ore e filtrato attraverso carta da filtro Whatman n ° 1. Questa procedura è stata ripetuta tre volte per garantire la completa estrazione del materiale vegetale. Gli estratti sono stati concentrati per evaporazione a pressione ridotta in evaporatore rotante a 40 ° C e acqua residua rimossi mediante liofilizzazione. I rendimenti estratto percentuale ottenuti sono stati Rhynchosia resinosa
(14,4%), Ozoroa insignis
(2,0%), Entada abyssinica
(5,3%), Maytenus senegalensis
(2,2%) e Lannea schimperi
(5,9%).
proiezione Fitochimico
I diversi estratti sono stati testati per la presenza di steroidi, saponine, flavonoidi, terpenoidi, glicosidi cardiaci, alcaloidi e tannini utilizzando metodi standard [9, 10]
. Preparazione e la somministrazione dell'estratto polierbale
Una miscela di 80% di etanolo estratti di R. recinosa
(l'impianto principale della ricetta), O. insignis, M. senegalensis, E. abyssinica
e L. schimperi
a dosi di 100, 200, 400 e 800 mg /kg peso corporeo sono stati valutati per la capacità di proteggere ratti Sprague Dawley da ulcera gastrica da una miscela etanolo-HCl. effetto citoprotettivo è stata valutata in confronto con un gruppo di controllo negativo in 1% di Tween 80 in soluzione salina normale e un gruppo di controllo positivo dato 40 mg /kg di peso corporeo pantoprazolo. Uguali quantità di 80% etanolo estratti di ciascuno dei cinque impianti sono stati mescolati insieme per ottenere una miscela uniforme. La miscela è stata sciolta in 1% Tween 80 per rendere le soluzioni 40, 80 e 160 mg /ml. I ratti sono stati dati 5 ml /kg corpo peso di queste soluzioni, che si traduce in 200, 400 e 800 mg /kg di peso corporeo, rispettivamente.
Induzione di ulcere peptiche
Sia maschi e ratti Sprague Dawley femmine del peso di 100-188g erano abituati. I ratti sono stati tenuti a digiuno per 36 ore, ma ha permesso il libero accesso all'acqua [11] potabile. Trenta ratti sono stati assegnati in modo casuale a 5 gruppi di 6 ratti ciascuno. I topi del gruppo uno (di controllo solvente) erano per via orale pre-dosato con 5 ml /kg di peso corporeo 1% di Tween 80 in soluzione fisiologica; ratti del gruppo di due stati per via orale pre-trattati con 40 mg /kg di peso corporeo pantoprazolo come controllo positivo [12], e ratti nei gruppi 3, 4 e 5 sono stati pre-dosati con 200, 400 e 800 mg /soluzione kg di peso corporeo di gli estratti combinati un'ora prima della somministrazione orale di 5 ml /kg di peso corporeo del miscuglio ulcerogena. La miscela ulcerogeno conteneva 80% di etanolo e 5% di acido cloridrico in acqua distillata [6-8]. Gli animali sono stati sacrificati con etere 4h anestesia dopo la dose ulcerogeno della miscela /HCl etanolo. Gli stomaci sono stati rimossi, tagliato aperto lungo la grande curvatura, lavato con soluzione salina normale e osservati per la gravità delle ulcere [13]. Ogni stomaco è stato esaminato grossolanamente e il grado di ulcerazione stata classificata secondo il metodo di Shay et al [14] con alcune modifiche come segue:. 0 = nessuna lesione (normale stomaco); 0.5 = iperemia (colorazione rossa); 1 = macchie emorragiche, 2 = 1-5 piccole ulcere; 3 = molte piccole ulcere, 4 = tante piccole e grandi ulcere; 6 = stomaco pieno di ulcere con perforazioni. Protezione percentuale è stato calcolato rispetto al gruppo di controllo non trattato [14]
protezione percentuale =
100 | -.
M
e

a n
u
l
c
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r
i
n
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x
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p
×
100 | analisi statistica
I risultati dell'indice ulcera sono espressi come media ± deviazione standard (SD). I risultati di indice dell'ulcera sono stati analizzati utilizzando Kruskal-Wallis analisi un modo di varianza. I mezzi sono stati confrontati con non parametrico test di Kruskal-Wallis.
Test per attività antibatterica
Quattro batteri Gram-negativi Escherichia coli
(ATCC 25922), Salmonella typhi
(NCTC 8385),
e isolati clinici di Vibrio cholerae
e Klebsiella pneumoniae
sono stati utilizzati per lo studio. concentrazione minima inibitoria (MIC) sono state determinate utilizzando il metodo microdiluizione [15]. Soluzioni madri degli estratti sono stati preparati sciogliendo 100 mg di estratti in 1 ml di DMSO (100 mg /ml). Ciascuna delle 96 piastre da microtitolazione e sono stati prima precaricato con 100 ml di media brodo seguita da aggiunta di 100 ml di estratti nel primo pozzetto di ogni fila per fare un volume totale di 200μl nei primi pozzetti. Dopo accurata miscelazione 100 microlitri sono stati stabiliti da ciascuno dei primi pozzi di riga e mettere in successivi pozzetti riga. Il processo è stato ripetuto le colonne agli ultimi pozzetti a fondo dove è stato scartato 100 microlitri. Successivamente, 100ul delle sospensioni batteriche (0.5Mac Farland torbidità serie) sono stati aggiunti a ciascun pozzetto per dare un volume finale di 200 microlitri in ciascun pozzetto. Gentamicina solfato (100 mcg /ml) è stato utilizzato come farmaco standard. Le righe contenenti brodo, DMSO e batteri sono stati inclusi come controlli negativi (controllo solvente) e le righe contenenti brodo e batteri sono stati inclusi solo per vedere se c'era la crescita batterica o no (controllo della crescita). Le piastre sono state poi incubate a 37 ° C per 24h. Dopo incubazione per 24 ore, a 37 ° C, 40μl di 0,02% p
-iodonitrotetrazolium (INT) soluzione di cloruro è stato aggiunto a ciascun pozzetto seguita da incubazione per 1 ora a 37 ° C. La crescita batterica è stata indicata da un cambiamento di colore al rosa nei pozzetti. L'assenza di crescita batterica è stato indicato da nessun cambiamento di colore del colorante. Artemia Il primo concentrazione alla quale si è verificata alcuna crescita batterica è stato preso come il MIC.
letalità prova
Il test artemie letalità (BST) è stato utilizzato per prevedere la presenza, negli estratti, di attività citotossica [16] . Soluzioni madri degli estratti sono state effettuate in DMSO e poi adattati per 5ml con mare artificiale per ottenere concentrazioni comprese 8-240 mg /ml e incubate in fiale duplicati con gambero di salamoia larve. Ciclofosfamide che era un controllo positivo per l'attività citotossica è stata sciolta in acqua distillata. Dieci artemie larve sono stati collocati in ciascuna delle fiale duplicati. Controllo artemie larve sono stati collocati in una miscela di acqua di mare artificiale (3,8 g /l di sale marino) e DMSO soltanto. Le concentrazioni DMSO sono state limitate al 0,6% o al di sotto. Dopo 24 ore i nauplii sono stati esaminati uno sfondo illuminato, e il numero medio di larve sopravvissute in ogni fiala duplicato è stato determinato.
L'analisi dei dati
I risultati medi di mortalità artemie sono state tracciate contro i logaritmi delle concentrazioni che utilizzano il Fig P programma per computer (Biosoft Inc, USA), che dà anche le equazioni di regressione. Le equazioni di regressione sono stati utilizzati per calcolare LC 16, LC 50 e LC 84 valori. Intervalli di confidenza (IC 95%) sono stati quindi calcolati utilizzando i tre risultati [17]. Un LC 50 valore superiore a 100 mg /ml è stata considerata per rappresentare un estratto inattiva. Gli studi di tossicità acuta

Sia maschi e topi albini originali femminile di Theiller sono stati utilizzati. I topi sono stati acclimatati in una camera climatizzata a 20 ° C per 7 giorni prima sperimentazione. Prima di dosaggio con estratti i topi sono stati fame per 36 ore, ma consentito l'accesso ad acqua potabile adeguata, e tenuti in gabbie con fondo di rete metallica per evitare coprofagia. Inizialmente una dose di 1000 mg wt /kg corpo è stato somministrato ad un gruppo di 6 topi (3 maschi e 3 femmine), ei topi osservati segni di tossicità immediato e /o la morte per 72 h. Se è stata osservata alcuna tossicità altro gruppo di 3 maschi e 3 femmine di topo è stata data una dose di 2000 mg /kg di peso corporeo e le stesse osservazioni. Se non segni di tossicità o di morte si sono verificati in sequenza dosi sono state aumentate a 3000, 4000, e 5000 mg /kg di peso corporeo, rispettivamente. Estratti sono stati solubilizzati in 1% Tween 80 e somministrati in un unico volume dose orale di 5 ml /kg di peso corporeo o due separati 5 ml /kg di peso corporeo dosi indicate all'interno di un intervallo orario, a seconda della solubilità. Un gruppo di controllo è stato eseguito per ogni estratto vegetale che è stata somministrata una singola 5 ml o due 5 ml /kg corpo peso di 1% di Tween 80 da abbinare con il volume di estratto vegetale somministrato.
Spazio etico
Questo studio è stato dato spazio etico dall'Università Muhimbili della Salute e scienze connesse etico Review Board.
risultati
Fitochimico proiezione
i risultati delle prove di fitochimici come riportato in tabella 1 mostrano che i tannini erano presenti in tutti gli estratti vegetali e 5 nella miscela dei 5 stabilimenti, salvo nel R.recinosa
estratto. Steroidi e terpenoidi erano presenti in tutti i 5 estratti vegetali e l'estratto mista dei 5 piante. Gli alcaloidi sono stati rilevati solo nel O. insignis
estratto ma non gli altri 4 impianti o la miscela. I flavonoidi sono presenti in L. schimperi, O. insignis, E. abyssinica
estratti e l'estratto misto delle 5 piante. Gli altri composti sono riportati in tabella 1 1.Table composti Fitochimici presenti in estratti vegetali
Estrarre
Tannini
saponine
Steroidi
cardiaca glicosidi
flavonoidi
alcaloidi
terpenoidi
L. schimperi
+ -
+
+
+ -
+
R. resinosa - Wooel.com +
+ -
- -
+
O. insignis
+
+
+
+
+
+
+
M. senegalensis
+
+
+
+
- -
+
E. abssynica
+ -
+
+
+ -
+
miscela
+
+
+
+
+ -
+
chiave: + = mezzi composti indicati sono presenti; - Mezzi indicati composti sono assenti
attività Antiulcerogenic
combinata estratti 80% etanolica di O. insignis, E. abyssinica, L. schimperi, R. recinosa
e M. senegalensis
protetta ratto gastrica. mucosa da ulcera dalla miscela etanolo-HCl. La figura 1 mostra le fotografie dell'oggetto aspetto lorda di stomaci ratto pre-trattata con 1% di Tween 80 in soluzione fisiologica, 800 mg /kg peso corporeo di una miscela di estratti vegetali 5 e 40 mg /kg di peso corporeo pantoprazolo, rispettivamente. L'estratto mista mostrato un'attività gastro-protettivo dose-dipendente, che passa dal 28,3% alla dose di 200 mg /kg di peso corporeo (P ≤ 0,001) a 53,3 (P ≤ 0,001) a 400 mg /kg di peso corporeo e il 81,7% (P ≤ 0,001) a 800 mg /kg di peso corporeo, rispetto al solvente ratti trattati (Tabella 2). Pantoprazolo, un inibitore della pompa protonica, a 40 mg /kg di peso corporeo, ha raggiunto l'87,5% significa gastroprotezione (P ≤ 0,001). Tutte le tre dosi e pantoprazolo mostrato un indice di un'ulcera significativamente inferiore rispetto ai topi trattati solvente (p ≤ 0,001). Vi era una differenza significativa nei punteggi indice ulcera tra le 3 dosi estratto utilizzato, e tra 40 mg /kg di peso corporeo pantoprazolo ed entrambi 200 e 400 mg /kg peso corporeo dell'estratto (P ≤ 0,001). Tuttavia alla dose di 800 mg /corpo kg peso media punteggio dell'indice ulcera dell'estratto era paragonabile a quella di 40 mg /kg di pantoprazolo peso corporeo (P > 0,05), indicando che a questa dose l'estratto era buono come pantoprazolo . Figura 1 fotografie che mostrano la comparsa lordo dei stomaci ratto dopo insulto con la miscela etanolo /HCl (80% /5%). In A il ratto è stato pre-dosato con il solvente prima di insulto con miscela etanolo /HCl. In B ratto era pre-trattati con 40 mg /kg di peso corporeo pantoprazolo prima dell'esposizione alla miscela ulcerosa e in C ratto è stato predosate con 800 mg /kg peso corporeo degli estratti combinati dei 5 piante. Le aree scure o macchie indicano i punti ulcerate.
Tabella 2 Effetto di estratti etanolici combinati in etanolo /HCl indotta ulcere gastriche nel ratto
trattamento
Dose (mg /kg di peso corporeo)

medio indice di ulcera (n = 6)
% ge Protezione
controllo solvente
0
6.0
0
combinato 5 estratti vegetali
200 mg /kg
4.3 ± 0.8
28.3 *
combinata 5 estratti vegetali
400 mg /kg
2.8 ± 1.2
53,3 *
combinata 5 estratti vegetali
800 mg /kg
1.1 ± 0.8
81,7 *
Pantoprazolo
40 mg /kg
0,7 ± 0,9
87,5 *
Ogni valore è una media dei risultati di 6 ratti. * = P ≤ 0,001 significativo rispetto al solvente controlli.
Attività antibatterica
Gli estratti etanolo acquoso di tutte le cinque piante esposte alcune attività antibatterica con MIC vanno da 0.8-12.5 mg /ml (Tabella 3). La più alta attività è stato dimostrato da M. senegalensis
(MIC 0,8 mg /ml) e E. abyssinica
(MIC 0,8 mg /ml) estrae contro Vibrio cholerae
seguita dalla L. schimperi
estratto con una MIC di 1,6 mg /ml contro S. typhi
. La L. schimperi
estratto è stato inattivo contro E. coli
e V. choleraee
, mentre la E. abyssinica
estratto è stato inattivo contro K. pneumoniae
. Quando gli estratti delle cinque piante sono state combinate (C1) hanno mostrato attività antimicrobica contro tutti i quattro batteri con MIC tra 0,8 - 12,5 mg /ml (Tabella 4). La combinazione ha dato valori di MIC di 0,8 mg /ml contro S. typhi
ed E. coli
e 1,6 mg /ml contro K. pneumoniae
mentre il MIC per V. choleraee
era 12,5 mg /ml. Allo stesso modo le altre combinazioni C2 (Rynchosia resinosa
+ Maytenus senegalensis
+ Entada abyssinica
), C3 (Lannea schimperi
+ Rynchosia recinosa
+ Maytenus senegalensis)
, e C4 (Lannea schimperi
+ Rynchosia resinosa
+ Ozoroa insignis
) che sono stati testati (Tabella 4) erano più attivo del singolo impianto extracts.Table 3 Risultati per attività antibatterica del singolo impianto estratti
organismi di prova
estratti vegetali (MIC mg /ml)
L.shimperi
R.recinosa
O.insignis
M .senegalensis
E.abyssinica
Gentamicina solfato
K.pneumoniae
6,25
12,5
NA
12,5
NA
0.000325
S.typhi
1.6
6,25
NA
6,25
12,5
0,00125
E.coli
NA
6,25
NA
12.5
12.5
0,000,625 mila
Vibrio cholerae
NA
6,25
NA
0,8
0.8
0,00,156 mila
chiave: NA = MIC > 12,5 mg /ml.
Tabella 4 Attività antibatterica della pianta combinato estratti
Organismi di prova

MIC (mg /ml)
C1
C2
C3
C4
C5
C6
Gentamicina solfato
K.pneumoniae
1.6
0.8
3.12
6,25
1.6
6,25
0,000,325 mila
S.typhi
0,8
0.8
0.8
1.6
0.8
6.25
0,00125
E.coli
0,8
1.6
0,8
1.6
1.6
6,25
0,000,625 mila
Vibrio cholerae
12.5
12,5
6,25
6,25
12,5
6,25
0,00,156 mila
Legenda: C1 = Rynchosia resinosa
+ Ozoroa insignis
+ Maytenus senegalensis
+ Entada abyssinica
+ Lannea schimperi
; C2 = Rynchosia resinosa
+ Maytenus senegalensis
+ Entada abyssinica;
C3 = Rynchosia recinosa
+ Lannea schimperi
+ Maytenus senegalensis
; C4 = Rynchosia resinosa
+ Lannea schimperi
+ Ozoroa insignis;
C5 = Rynchosia resinosa
+ Entada abyssinica
+ Lannea schimperi
; C6 = Rynchosia resinosa
+ Maytenus senegalensis
+ Lannea schimperi
. Test di tossicità salamoia gamberetti (BST)
tabella 5 mostra che la Ozoroa insignis
estratto (LC 50 = 10.63 mg /ml) è stato il più tossico per le larve artemia. L'estratto di Maytenus senegalensis
è stato il successivo tossica (LC 50 = 81.63 mg /ml), ma gli altri estratti vegetali sono stati praticamente non tossico con LC 50 valori compresi 128,41-222,43 mg /ml. Gli estratti di etanolo combinate delle cinque piante hanno dato un LC 50 valore della 66.12μg /ml.Table 5 Risultati per la tossicità artemie di estratti vegetali
Estratti
CL50 (mg /ml)

95% CI (mg /ml)
Entada abyssinica
140.39
102,47-192,34
Lannea shimperi
128.41
100.32- 164.40
Rhynchosia recinosa
222,43
151,31-326,97
Ozoroa insignis
10.63
7,65-14,78
Maytenus senegalensis
81.63
64,79-102,84
estratto combinato di 5 piante
66.12
52,52-83,24
Ciclofosfamide
16.30
12,01-22,30 tossicità acuta nei topi

Il 80% estratto etanolo di Ozoroa insignis
era tossico per i topi a dosi superiori a 1000 mg /kg di peso corporeo; causando l'iperventilazione entro 30 minuti di somministrazione di estratto, aumentato defecazione e il passaggio di feci. I topi hanno mostrato capelli arruffati per lo più dopo 24-72 h. Due topi morti e 4 esposte diarrea alla dose di 2000 mg /kg di peso corporeo. I topi nutriti il ​​Entada abyssinica
estratto non ha mostrato alcuna tossicità fino a 2000 mg /kg di peso corporeo, ma soprattutto questa dose il topo esibivano aumento della frequenza respiratoria e capelli arruffati. Due topi sono morti alla dose di 3000 mg /kg di peso corporeo. Il Lannea schimperi
estratto causato aumentata defecazione /diarrea, ma non ha ucciso alcun topi fino a 2000 mg /kg di peso corporeo. La mortalità a topi verificato a dosi di 3000 mg /kg peso corporeo e superiori. Maytenus senegalensis
e Rhynchosia resinosa
estratti sono stati ben tollerati dai topi fino a 5000 mg /kg di peso corporeo. Diversamente gli estratti singole piante, l'estratto combinata è stata ben tollerata dai topi fino a 5000 mg /kg di peso corporeo, senza segni di tossicità o morte.
Discussione
etanolo indotta ulcera gastrica è dovuto a una serie di meccanismi che includono l'esaurimento del muco gastrico e rompere la barriera della mucosa, di nuovo la diffusione di acido, aumento della permeabilità della mucosa gastrica, con conseguente aumento delle perdite di ioni idrogeno dal lume, e una diminuzione transluminale differenza di potenziale elettrico [18]. Essa provoca anche cambiamenti nel flusso sanguigno della mucosa, la distruzione delle cellule microvascolari e non vascolari, degranulazione dei mastociti, neutrofili lesioni della mucosa mediato [18], e l'esaurimento di alcuni spazzini dei radicali liberi dell'ossigeno [18]. Metabolismo dell'etanolo rilascia anche i radicali liberi [19]. L'inibitore della pompa protonica pantoprazolo protetto il ratto mucosa gastrica da insulto da etanolo acidificato suggerendo il ruolo di acido gastrico in etanolo /HCl indotta ulcere gastriche. Vi è un cambiamento nell'aspetto lordo della mucosa gastrica rispetto al gruppo trattato con solvente. L'estratto polierbale, alla dose di 800 mg /kg peso corporeo ridotto il grado di gastrica ulcerazioni della mucosa con un'efficacia che era paragonabile a quella di 40 mg /kg di peso corporeo pantoprazolo. lo screening Fitochimico ha indicato che l'estratto polierbale tannini e flavonoidi, che sono composti fenolici contenuti. fenoli vegetali sono noti per essere antiossidanti e antiradicali liberi [20]. Terpenoidi che hanno attività antiossidante erano presenti nell'estratto anche. Poiché etanolo-indotta ulcera gastrica provoca neutrofili mediato lesioni della mucosa attraverso il rilascio di radicali liberi dell'ossigeno, proteasi e enzimi lisosomiali [19], i risultati fitochimici può suggerire che l'estratto devono il suo effetto anti-ulcerogeno parte dovuta alla presenza di questi composti che hanno antiossidante e libero proprietà scavenging radicali. RSON partecipato agli esperimenti ed è stato il supervisore del laboratorio per lo studio. Ha inoltre partecipato nella progettazione dello studio. RLAM è una co-mentore di EEH e ha partecipato nella consulenza progettazione dello studio e proposta di sviluppo. Tutti gli autori hanno letto e approvato il manoscritto finale.

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