Plos ONE: Zveza mTOR in AKT genski polimorfizmi s Dovzetnost in preživetje želodčnega raka

Povzetek

Ozadje

fosfoinozitidnih 3-kinaze (PI3K) /protein kinaze B (PKB, AKT) /tarča rapamicina pri sesalcih (mTOR) signalne poti igra ključno vlogo pri angiogenezo in rast celic, širjenje, metabolizem, migracije, diferenciacijo in apoptozo. Genetska raznolikost v ključnih dejavnikov tej poti lahko vpliva na funkcije proteinov ter prenos signala, ki prispevajo k začetku bolezni in napredovanja. Študije kažejo, da je mTOR
rs1064261 in AKT
rs1130233 polimorfizmi so povezane s tveganjem in /ali prognozo več vrst raka. Vendar pa je ta odnos z rakom želodca (GC), ostaja nejasno. Cilj te raziskave je bil raziskati vlogo mTOR
in AKT
polimorfizmi v tveganju in prognozo GC.

Metode

Sequenom MassARRAY platforma je bila uporabljena za genotip 1842 posameznikov za mTOR
rs1064261 T → C in AKT
rs1130233 G → polimorfizmov A. ELISA je bil uporabljen za odkrivanje Helicobacter pylori
protitelesa v serumu. Imunohistokemijsko analiza je bila uporabljena za odkrivanje skupnih in fosforilirane mTOR in AKT proteine.

Rezultati

mTOR
rs1064261 (TC + ​​CC) genotipa in AKT
rs1130233 (GA + AA) genotip je bila povezana s povečanim tveganjem za GC pri moških ( P
= 0,049, P
= 0.030). V H
. pylori
HBeAg negativnih posamezniki, AKT PODJETJA
rs1130233 GA in (GA + AA) genotipi so bili povezani s povečanim tveganjem za atrofični gastritis (AG; P
= 0.012, P
= 0,024). Predvsem je AKT
rs1130233 (GA + AA) genotip je pokazala pomembne interakcije z H
. pylori
in napredovanje bolezni iz zdravih kontrolah (CON) v AG ( P
= 0,013) in od AG v GC ( P
= 0,049). Poleg tega je za posameznike s AKT
rs1130233 varianto, tiste v H. pylori pozitivni skupini so imeli višjo stopnjo fosforiliranega AKT (p-AKT) izraz. AKT PODJETJA
rs1130233 genotip je bilo ugotovljeno, da je povezana z clinicopathological parametrov, vključno bezgavkah metastaze in alkohola, pitje ( P
< 0,05).

Zaključek

mTOR
rs1064261and AKT
rs1130233 polimorfizmi so povezana s povečanim tveganjem GC pri moških in povečala AG tveganja v H
. pylori
HBeAg negativnih posamezniki. obstajal pomembna interakcija med AKT
rs1130233 genotip in H
. pylori
okužba CON → AG → GC napredovanja bolezni. AKT
rs1130233 genotipa vplivajo p-AKT protein izraz v H
. pylori
okuženimi posamezniki

Navedba. Piao Y Li Y Xu Q Liu J-w, Xing C-Z, Xie X-d, et al. (2015) Zveza mTOR
in AKT
genski polimorfizmi s Dovzetnost in preživetje želodčnega raka. PLoS ONE 10 (8): e0136447. doi: 10,1371 /journal.pone.0136447

Urednik: Masaru Katoh, National Cancer Center, JAPONSKA

Prejeto: 2. marec 2015; Sprejeto: 3. avgust 2015; Objavljeno: 28. avgust 2015

Copyright: © 2015 piao et al. To je prost dostop članek razširja pod pogoji Creative Commons Attribution License, ki omogoča neomejeno uporabo, distribucijo in razmnoževanje v katerem koli mediju, pod pogojem, da prvotni avtor in vir knjižijo

Razpoložljivost podatkov: Vsi pomembni podatki so v papir in njene dodatne informacije datotek

Financiranje:. To delo je podprta s sredstvi iz National Key Temeljni raziskovalni program Kitajske (. 973 Program ref ni 2010CB529304), National Natural Science Foundation of China ( Ref No.31200968)

nasprotujočimi si interesi. avtorji so izjavili, da ne obstajajo konkurenčni interesi

Uvod

rak želodca (GC) je ena najpogostejših rakavih obolenj. svetu in vodilni vzrok smrti zaradi raka [1]. Začetek in razvoj GC je večstopenjski proces, ki ga genetskih in okoljskih dejavnikov vplivala. Študije so pokazale, da eksogeni dejavniki okolja, vključno z okužbo Helicobacter pylori
(HP), prehrana navade, kajenje, pitje alkohola in ekonomski dejavniki prispevajo k rakotvornost želodca [2]. Pod podobnimi pogoji v okolju, posamezniki z različno genetsko znanjem utrpeli različne tveganje za raka z različnih kliničnih izidov. Do sedaj, je interakcija genetskih in okoljskih dejavnikov z želodčno rakotvornosti v veliki meri neznan.

polimorfizmi so razred genetskih dejavnikov, ki sodelujejo v želodcu rakotvornosti in določajo inter-individualne razlike v GC tveganja. Genetski polimorfizem lahko oslabi bistvene zaščitne mehanizme in poveča škodo, ki jo okoljski rakotvornim povzročil. Prevozniki dovzetnih genotipov so na večje tveganje za razvoj raka kot tisti z odpornimi genotipi pod podobnimi pogoji. Zato, genetski dejavniki igrajo ključno vlogo pri GC tveganja in kliničnim izidom.

fosfoinozitidnih 3-kinaze (PI3K) /protein kinaze B (PKB, AKT) /tarča rapamicina pri sesalcih (mTOR) pot ureja različne celične funkcije, vključno rast, proliferacijo, migracijo in apoptoze. Tapia sod. poročali, da je PI3K /AKT /mTOR poti aktivira GC in da večina proteini (fosforiliranih in unphosphorylated oblike) preučevali doslej v tej poti so izraženi pri tumorskih tkiv [3]. MTOR je ključni član PI3K /AKT /mTOR poti in jedro signalizacijo metabolično molekula [4, 5]. Enonukleotidnih polimorfizmov (SNP), lahko vplivajo na mTOR izražanja in transkripcijske aktivnosti, s čimer se spremeni funkcije proteinov. Do sedaj je bilo skupaj 14 polimorfizmov v tem genu študiral, od katerih so bile tri SNP (rs2295080, rs1883965 in rs2536), najpogosteje poročali. Rs2295080 polimorfizem v promotorski regiji je poročalo, da se zmanjša tveganje za raka ledvičnih celic [6], GC [7], in rak prostate [8], ki ga downregulating endogenega izražanje proteinov. Rs1883965 polimorfizem je bila povezana s povečanim tveganjem za GC [9] in požiralnika raka luskaste [10]. Poleg tega je rs2536 polimorfizem povezan z znatno povečano tveganje za raka na prostati [8]. Poleg tega mTOR
rs11121704 polimorfizma je povezan s slabšimi kliničnimi parametri (omogočil, metastaze in odpornosti kemoterapije) [11]. Obstaja 45 eksonov v mTOR
gena, in rs1064261 polimorfizem se nahaja v eksonu 18. Razlika T → C se nahaja na meji eksona 18 in introna 19, vendar je njegova povezava z boleznijo, je še vedno nejasno .

AKT
gena je ključnega pomena za preživetje celic in kodira pomembno nadaljnjega efektor PI3K / AKT
/ mTOR
pot, ki ureja ključ celične funkcije, vključno s presnovo glukoze in sintezo beljakovin. AKT
, alternativno znan kot AKT1
, ima pet obširno raziskan polimorfizmov (rs3803300, rs1130214, rs2494732, rs2498804 in rs1130233); Prvi štirje so povezane s tveganjem ali prognozo nazofaringealnega karcinoma, oralnega skvamoznega celičnega in nedrobnoceličnim pljučnim rakom. Rs1130233 polimorfizem se nahaja v eksonu 8 in G → Sprememba se nahaja na meji eksona 8 in introna 7. AKT
1 AA haplotip tako rs1130233 in rs2494732 je poročalo, da daje povečano tveganje nazofaringealni karcinom [12]; haplotip vsebujejo variantne alele rs1130214 in rs3803300 polimorfizmov bistveno poveča dovzetnost za peroralno skvamoznega karcinoma [13]. Nosilci (GT + GG) genotipa AKT
1 rs2498804 ali CT /TT genotipa AKT
1 rs2494732 bilo ugotovljeno, da imajo povečano tveganje za možgansko metastazami nedrobnoceličnim pljučni rak [14]. AKT
1 rs3803300, rs1130214 in rs2494732 bodo pomembno vplivale na preživetje pri bolnikih, ki niso majhne pljučnega raka: bolniki z alelov rs3803300 G in rs1130214 G alela imela krajše celokupno preživetje (OS) in brez bolezni preživetje (DFS) krat [15].

Čeprav razlike v mTOR
in AKT
igrajo pomembno vlogo v želodcu rakotvornosti nobena študiji so raziskovali odnos AKT
polimorfizem z GC tveganja in prognozo. Poleg tega mehanične povezave med mTOR
rs1064261 in tako občutljivost in preživetje raka niso znani. Pojasniti, ali mTOR
in AKT
polimorfizmi lahko služijo kot tveganje in /ali prognostičnih označevalcev za GC, smo preiskovali mTOR
rs1064261 in AKT
rs1130233 polimorfizmi v zvezi z GC tveganja in njihovih interakcij s H
. pylori
v študiji primerov in kontrol v 1842 predmetov. Pri 205 osebah z zadostnimi podatki, so bili analizirani clinicopathological parametri za raziskovanje pridružitvi teh dveh polimorfizmov z GC prognozo in s tem opredelitev novih biomarkerjev za GC tveganja in prognozo.

Materiali in metode

Študij dizajn in študij prebivalstva

zasnova te študije je odobril odbor za humano etiko prve odvisnimi Hospital China Medical University (Shenyang, Kitajska). Vsak udeleženec ob predložitvi pisnega soglasja, med epidemiološko preiskavo. Zasnova študija je vključevala dva dela (polimorfizem in raven beljakovin analize) in so bile preiskane vezi med polimorfizmov in tveganja za nastanek bolezni in prognozo. V analizi GC tveganja, so bili bolniki GC iz prve odvisnimi bolnišnici Kitajske medicinske univerze, ki je dobil delovanje kirurgija resekcijo ali gastroscopic diagnozo /zdravljenje med letoma 2004 in 2013. AG bolnikov in kontrol so bili zaposleni iz stanja zdravstvenega programa v Zhuanghe, Liaoning province, med letoma 2002 in 2013. Vse diagnoze so temeljile na gastroscopic in histopatoloških preiskav

Poleg tega so bili primeri, GC razvrščeni v črevesni vrsto in razpršenega tipa, ki temelji na klasifikaciji Lauren [16, 17].; Razvrstitev AG in uprizoritev so temeljili na novem sistemu Sydney [18, 19]. Udeleženci Kontrolne imeli normalne ugotovitve ali gastritis želodčne samo. Informacije o kajenjem, uživanjem alkohola in družinsko zgodovino so bile pridobljene z "oči v oči", smo vprašalnik. Kadilci in alkoholne pijače so bili opredeljeni kot sledi: če dimljeni več kot enkrat na dan, in če je to trajalo več kot 1 leto, nato pa je bil ta posameznik opredeljen kot kadilci, in ta položaj vključeni trenutnih kadilcev in nekdanjih kadilcev, ki so se prenehati kaditi več kot 1 leto. Osebe, ki ne izpolnjujejo tega stanja so bili opredeljeni kot nikoli kadilcev. Če nekdo porabi eno steklenico piva ali peti funt alkoholnih pijač na dan, in če to stanje trajalo več kot 1 leto, nato pa je ta oseba šteje za pivce. Posamezniki, ki ne ustrezajo temu standardu so opredeljene kot nondrinkers. Tešče venske krvi je bila pridobljena iz vsakega udeleženca in shranili pri -20 ° C, kot serumu in strjene celic.

Da bi še dodatno ovrednotiti odnos polimorfizmov z clinicopathological parametrov in preživetje GC smo izvedli napovedno analizo bolnikov GC za katere je bilo na voljo dovolj kliničnih podatkov. Podatki histološki so bili ocenjeni v skladu z merili zdravstvene organizacije in tumor-node-metastaz (TNM) uprizoritev pooperativne patoloških osebkov je bilo opravljeno v skladu s 7. izdaja Mednarodne unije proti raku (UICC) /Skupni odbor ameriške raka (AJCC) ( 2010) merila. Bolniki z oddaljenih metastaz pred operacijo, so bili tisti, ki so prejeli obsevanje ali kemoterapijo pred operacijo, in tiste, ki imajo premalo informacij za prognostičnega analize izključena. Analiza občutljivosti je bila izvedena za preverjanje, ali je imela učinka na analizo preživetja so izključili bolnike. Spremljanje pri vseh bolnikih je bila zaključena v mesecu maju 2014.

SNP genotipizacijo

genomske DNK je bila vzeta iz vzorcev krvi z metodo fenol-kloroform [20] in razredčimo na delovno koncentracijo 50 ng /ul za mTOR
rs1064261 T → C in AKT
rs1130233 G → genotipizacije. Vzorci so bili naključno postavljeni v 384 vdolbinami in analizirani v slepi način na stanje bolezni. Genotipizacije je bila izvedena s pomočjo platforme Sequenom MassARRAY (Sequenom, San Diego, California, ZDA) po navodilih proizvajalca. Za kontrolo kakovosti, 5% vzorcev doživelo ponovi genotipizacijo; rezultati so bili 100% dosledni.

H. pylori pregled serologija

Analiza Serologija odkriti H
. pylori
okužba je bila izvedena z uporabo ELISA ( H
. pylori
-IgG ELISA kit, BIOHIT, Helsinki, Finska), kot je opisano zgoraj [21]. Branje > 34 encimski imunski enote je štela za označevanje H
. pylori
pozitivnost.

Odkrivanje mTOR in AKT proteinov v tkivu
je

imunohistokemičnim analize, ki se uporabljajo za določitev izraz skupne in fosforiliranega mTOR in AKT (p-mTOR in p -AKT) beljakovine v 65, vzorcev GC tkivno parafinskih vgrajeni-formalin določen. Vzorce tkiva smo razrezali v 4-mikrometrov debelih odsekov in montiran na poli-L-lizina prevlečenih steklenih ploščicah. Po pridobivanje antigenov citronsko kislino, primarna protitelesa inkubirana z oddelki tkiva pri 4 ° C preko noči (koncentracija redčenje: mTOR in p-mTOR 1: 100, AKT 1: 300 in p-AKT 01:50, vsi so bili kupljeni iz celic signaliziranje tehnologija). Po treh 5-min opere v fosfatnem pufru slanici so odseki tkiva inkubiramo z biotiniliranega sekundarnih protiteles (Maixin, Fujian, Kitajska) in streptavidina-biotin peroksidazo za vsakih 10 minut pri 37 ° C. Za negativne kontrole, je bila primarna protitelesa nadomesti s PBS pufrom.

Statistična analiza

Statistična analiza je bila opravljena s pomočjo SPSS (različica 18,0) statistične programske opreme (SPSS, Chicago, IL, ZDA). Hardy-Weinberg ravnovesje (HWE) je bil prvič ocenili pri zdravih kontrolah. Prilagojene razmerja obetov in 95% intervali zaupanja (CIS) za razmerje med obema polimorfizmov in tveganja za nastanek bolezni so izračunani z multivariabilnega logistične regresije, s prilagoditvijo za spol, starost in H
. pylori
stanje okužbe. . V razslojeni analizi, ko se porazdeli glede na starost, spol in H
bile prilagojene
stanje okužbe pylori; . Ko razdeljeni glede na spol, starost in H
bile prilagojene
stanje okužbe pylori; in ko razdeljeni glede na H
. pylori
stanje okužbe, spol in starost so bile prilagojene. Test Razmerje verjetnosti je bila izvedena za oceno učinkov Interakcija genotip in H
. pylori
na tveganja za nastanek bolezni s primerjavo vzorca, ki vključuje le glavne učinke na spol, starost, H
. pylori
stanje in genotip s polno modela (prav tako vsebuje interakcijo mandat genotipa s H
. pylori
stanje). Pearsonov χ ^{2 testu je bila uporabljena za oceno razmerja različnih genotipov s clinicopathological parametri GC. Natančen način Fisher je bil uporabljen, ko je bilo pričakovano frekvenco manj kot pet. Metoda Kaplan-Meier je bila uporabljena za vizualizacijo OS s genotipa skupine. Preskus log-rank je bila uporabljena za preiskavo razlik pri distribucij preživetje. Univariablinega in multivariabilen Cox sorazmernih tveganj modeli so bili izvedeni za izračun surovo ali usklajenih razmerij nevarnosti, in 95% čujejo za vsak genotip za oceno vpliva na preživetje, z ali brez prilagoditve za zavajajočih dejavnikov. Logistično regresijo smo raziskati vpliv polimorfizmov na izražanje proteinov, prilagojenih glede na spol, starost in H
. pylori
stanje. Two-tailed P
vrednosti. ≪ 0,05 so ocenili statistično značilno}

Rezultati

karakteristike bolnikov Osnovni

demografske in klinične značilnosti 1842 posamezniki, ki sodelujejo pri analizi tveganja, ki vsebuje 483 GC bolnikov, 686 bolnikov AG in 673 zdravih kontrol, so prikazani v tabeli 1. Oba SNP so bili prisotni v HWE; porazdelitev genotip je naveden v tabeli 2. Rezultati analize občutljivosti je prikazano v S1 tabeli, ki preverjene izključili bolnike ni imel nobenega vpliva na analizo preživetja. Demografske in klinične značilnosti 205 bolnikov, ki so GC, vključenih v analizo preživetja tudi starost, spol, klasifikacija BORRMANN, klasifikacija Lauren, oder TNM rast vzorec, globina invazije, bezgavko metastaze, kajenje, pitje, družinska anamneza, in H
. pylori
okužbe so prikazani v tabeli 3.

Zveza SNP z GC in AG
tveganja

multivariatno logistično regresijo smo ga uporabili za preiskavo pridružitvi mTOR
rs1064261and AKT
rs1130233 z GC in AG tveganja. Ni bilo bistvene razlike v mTOR
rs1064261 in AKT
rs1130233 o tveganju CON → AG, AG → GC, CON → GC, ali CON + AG → GC napredovanje (tabela 2) .

v analizi stratifikacije moških (tabela 2), prevozniki TC genotipa imel mTOR
rs1064261 1,55-krat večje tveganje za GC primerjavi z AG ( P
= 0.049, 95% IZ 1,00-2,38); A alel za AKT
rs1130233 prenese 1,32-krat, 1,29-krat in 1,30-krat povečanje AG → GC, CON → GC, in (CON + AG) → napredovanje GC, oziroma, nad G alel ( P
= 0,013; 95% interval zaupanja 1,06-1,64; P
= 0.038, 95% CI 1,01-1,64 in P
= 0,008, 95% CI 1,07-1,58, S2 tabelo). V H
. pylori
-negativno skupina, je AKT PODJETJA
rs1130233 GA genotip povezana s 1,69-krat večje tveganje za AG v primerjavi z CON ( P
= 0,012, 95% CI 1,12-2,54, tabela 2). Poleg tega ni bilo značilno povezavo našel med tema dvema polimorfizmov in črevesne tipa ali difuzna tipa GC v splošnih in stratumov analiz (S3 in S4 tabelah).

Nato smo izvedli analizo interakcije za mTOR
rs1064261 in AKT
rs1130233 s H
. pylori
okužbe. Rezultati so pokazali, da je AKT
rs1130233 (GA + AA) genotipa pomembno medsebojno delovanje z H
. pylori
okužba CON → AG in napredovanje AG → GC ( P
= 0.013 in P
= 0,049; tabela 4). Vendar pa ni pomembna interakcija mTOR
rs1064261 s opazili AKT
rs1130233 za CON → AG → napredovanje GC v splošnih in stratumov analiz (S5 tabela). Poleg tega ni bilo pomembnih interakcij med tema dvema polimorfizmov in H
. pylori
okužba CON → AG → GC napredovanje (tabela 4).

Združenja SNP z clinicopathological parametrov GC bolnikov

Analiza odnosa mTOR
rs1064261 in AKT
rs1130233 z clinicopathological parametri pri bolnikih z GC predlagal, da AKT
rs1130233 GA in (GA + AA) variantne genotipi pogosteje pojavi pri bolnikih GC brez bezgavk metastaz kot pri tistih z bezgavkah metastaze (GA 89,1% v primerjavi z 71,1%, P
= 0,012; GA + AA 92,2% v primerjavi s 81,1%, P
= 0.030). GA, AA, in (GA + AA) genotipi so bili pogostejši pri pivcev kot v nondrinkers (GA 61,0% v primerjavi z 95,8%, P
= 0,047; AA 63,6% proti 88,9%, P
= 0,047; GA + AA 76,8% v primerjavi z 96,9%, P
= 0,038; Tabela 5). Vendar pa ni bilo opaziti pomembne povezave med mTOR
rs1064261 variante in clinicopathological parametre pri bolnikih GC.

Ne pridružitvi med SNP in preživetje bolnikov GC

univariablinega in multivariabilen Cox sorazmernih nevarnosti modeli so bili izvedeni za oceno učinka mTOR
rs1064261 in AKT
rs1130233 polimorfizmi za preživetje GC (tabela 6). Ker klasifikaciji Lauren, stopnji TNM, vzorec rasti, globina invazije, in bezgavk metastaz so bistveno povezana s preživetjem ( P
< 0,05, je prikazano v tabeli 3), se je štelo, da so prilagojene covariables v Cox sorazmerna nevarnosti regresijski model. Rezultati so pokazali nobenega pomembnega povezavo med obema SNP in GC prognozo (tabela 6). Podobno je stratificiran analiza ni izkazal nobenega pomembnega povezavo med SNP genotipa in GC prognozo (S6 tabeli).

SNP genotip povezana s skupnega in fosforiliranih beljakovin izražanja

Izraz skupne in fosforiliranega mTOR in AKT beljakovine je bila analizirana v tkivih iz različnih skupin udeležencev (slika 1). Na splošno, ni bilo značilno povezavo med mTOR
rs1064261 ali AKT
rs1130233 polimorfizem in skupno ali fosforiliranih mTOR in AKT beljakovine. V H
. pylori
-positive podskupina, je bil delež p-AKT-pozitivnih celic v genotipa skupine varianto bistveno višja kot v skupini z divjim tipom ( P
= 0,045; Tabela 7).

Pogovor

v tej študiji smo poročilo prvič združenje mTOR
rs1064261 in AKT
rs1130233 polimorfizmov z GC tveganja in prognozo . Pri moških, mTOR
rs1064261 (TC + ​​CC) genotip in A alel za AKT
rs1130233 je bila povezana s povečanim tveganjem za GC. V H
. pylori
-negativno samcev, AKT
rs1130233 (GA + AA) genotip je bila povezana s povečanim tveganjem AG. Poleg tega AKT
rs1130233 (GA + AA) genotip je pokazala pomembno interakcijo z H
. pylori
okužba CON → AG → GC napredovanja. Varianta genotip AKT
rs1130233 je bila povezana s povečano ekspresijo p-AKT beljakovin. AKT
rs1130233 polimorfizem je bila povezana tudi z bezgavkah metastaz in pitja alkohola. Te ugotovitve eksperimentalne dokaze za mTOR in AKT kot potencialnih biomarkerjev posebnih vrst GC in tudi zagotoviti namigov za interakcijo med H
. pylori
okužbe in mTOR /AKT signalizacijo.

mTOR
gen se nahaja na človeškem kromosomu 1p36.2 in kodira 289 kDa mTOR protein, sestavljen iz 2549 aminokislin . MTOR je član fosfatidil inozitol kinaze (PIK), družino in ima serinske /treonin kinaze dejavnosti. Ugotovili smo, da je mTOR
gen (TC + ​​CC) varianta genotipa povezana s povečanim tveganjem GC pri moških, kar kaže, da je vpletena v rakotvornost. MTOR večinoma obstaja v citoplazmi v normalnih pogojih in vstopi v jedro po aktivaciji urediti nižji stopnji cilje evkariontskih iniciacijski faktor 4E (EIS-4E) vezavo proteinov 1 (4E-BP1) in ribosome 40S majhno podenoto S6 protein kinazo (p70S6K) [22 -24]. Slednji je bistveni element v PI3K /AKT /mTOR poti in osrednji presnovni signalizacijo molekule. MTOR združuje različne celičnih signalov iz rastnih faktorjev in hranilno in energijsko stanje; tako, da ima pomembne biološke funkcije v angiogenezo in celično rast, proliferacijo, presnove, migracije, diferenciacijo in apoptozo [25]. Njegova funkcija je tesno povezan s preoblikovanjem normalno do rakavih celic in preprečevanja širjenja rakavih celic. Genetske razlike v genih mTOR signalne poti v ( PI3K
, AKT
in PTEN
) lahko spodbujajo rakotvornost [26-28]. mTOR
SNP so poročali, da so povezani z dovzetnostjo do GC [7, 9], karcinom ledvičnih celic [6], rak prostate [8], in požiralnika rak ploščatocelični [10]. Ti SNP lahko vpliva na raven mTOR izražanja in transkripcijske aktivnosti, s čimer se spremeni funkcije proteinov. Alel G mTOR
rs2295080 polimorfizem je povezana z zmanjšanim tveganjem GC, verjetno posledica zmanjšane promotorja dejavnosti in mRNA izražanja [7]. Drug mTOR
polimorfizma, ki se nahaja v promotorski regiji, rs1883965 G → A, jim poveča tveganje GC [9] in požiralnika raka luskaste [10]. Naše ugotovitve kažejo, da je (TC + ​​CC) genotipa povezana s povečanim tveganjem GC pri moških, čeprav so opazili nobenega vpliva na izražanje proteinov. mTOR
lahko spodbuja celično proliferacijo in nekoliko "onkogeni" značilnosti. Varianta genotip morda še več onkogenega dejavnost. Ker so moški bolj verjetno, da bo izpostavljeno več dejavnikov izpostavljenosti tveganja (kajenje, pitje in nezdravih življenjskih navad), lahko prevozniki iz določenega genotipa biti občutljivi na povečano tveganje za GC.

AKT
je v- AKT
mišje timomom virusnega onkogena homolog, preslika na humani kromosom 14q32.32 in kodira 56 kDa protein, ki sestoji iz 480 aminokislin [15]. AKT je pomemben efektor signala poti v PI3K /AKT /mTOR, in genetske mutacije ali nenormalno izraz protein lahko spremenijo različne celične procesa, vključno z migracijo, proliferacijo, rast in preživetje. Poleg tega se aktivacija AKT vključeni v celično proliferacijo in apoptozo, ki so povezane z začetkom raka in napredovanja [29]. AKT
SNP so poročali, da so povezani z dovzetnostjo za in /ali napovedi različnih vrst raka, vključno z nazofaringealnega karcinoma [12], oralno ploščatocelični karcinom [13, 30], nedrobnoceličnim rakom pljuč [14 15], trebušne duktalni adenokarcinom [31], ter GC [32] prek učinkov na proteinsko ekspresijo in transkripcijske aktivnosti. Wang et al. študiral štiri SNP vključno rs1130233 v kitajskega prebivalstva [13], in ugotovila, da so bili trije polimorfizmi povezan z dovzetnostjo za peroralno skvamoznega karcinoma ali DFS, vendar brez pomembne zveze za rs1130233. Zhang et al. poročali, da je AA haplotipov iz AKT
rs1130233 in rs2494732 podeljenih povečano nazofaringealnega karcinoma tveganje [12] in da nekateri AKT
haplotipov povzroči zvišanje AKT protein izražanje [33, 34], kar vodi v spremenjeno celični migracije in širjenje. Zato je AKT
rs1130233 A alel morda povečala proliferacije aktivnost. V tej raziskavi smo ugotovili, da je AKT
rs1130233 alela podeli večje tveganje za GC pri moških. Na splošno, moški imajo večjo incidenco z GC in višjo stopnjo smrtnosti GC kot odrasle ženske [35]. Visoka raven izpostavljenosti samcev do dejavnikom okoljskih tveganj (kajenje, pitje in nezdravih življenjskih navad) povečuje njihovo dovzetnost za GC [36]. Ker bi lahko imela alel močnejši proliferativni aktivnosti, skupni učinek AKT
lahko polimorfizem in spol delno razložiti opaženo veliko tveganje GC povezano s AKT
rs1130233 polimorfizma pri moških.

Poleg tega smo ugotovili, da v H
. pylori
-negativno podskupina, AKT
rs1130233 (GA + AA) genotip je bila povezana s povečanim tveganjem AG. AKT
rs1130233 polimorfizem pokazala pomembnega medsebojnega delovanja s H
. pylori
okužba CON → AG → GC napredovanja. Na splošno velja, da je H
. pylori
je glavni vzrok za GC. H
. pylori
virulentni dejavniki, ki lahko povzročijo nenormalno celično proliferacijo in apoptozo preko urejanja signalnih poti (vključno PI3K /AKT); to je nedavna raziskava hotspot [37-39]. Tabassam sod. predlagal, da AKT fosforilacija, ki jih H
povzroča. pylori
virulence dejavniki CAG PAI in OipA ureja znotrajcelične signale, ki so odgovorni za vrsto celičnih funkcij, vključenih v želodcu rakotvornost. Poseben spodbujanje AKT serin 473 ali treonin 308 fosforilacijo s strani OAS PAI in OipA lahko motijo ​​orožja in apoptozo signale na nižji stopnji. Kombinacija OAS PAI in OipA zadostuje za aktiviranje PI3K /PDK1 pot in AKT /ERK nadaljnjega signalizacijo /[39]. Nakayama et al. poročali, da je H
. pylori
virulence dejavnik Váca sproži funkcijo β-catenin z aktiviranjem PI3K /Akt pot in inaktivira GSK33β [38], s čimer se ureja proliferacije celic, diferenciacijo in apoptozo. Ti podatki kažejo, da interakcije H
. pylori
z aktivnim AKT ima biološko funkcijo. Vendar nobena od SNP v tej raziskavi niti H
. pylori
okužba v okviru teh SNP je pokazala pomembno interakcijo z GC. Ti podatki na splošno poudarjajo pomembno vlogo AKT
rs1130233 polimorfizma v PI3K /mTOR /AKT poti v. Poleg tega so v H
. pylori
-positive podskupina, tiste z AKT
rs1130233 varianto genotip je povečano izražanje p-AKT. Ker je ta polimorfizem je pokazala, da je komunikacija s H
. pylori
okužba, učinek tega polimorfizma na izražanje proteinov lahko pojavijo le v prisotnosti H
. pylori
okužbe. Genetski mutacija vodi do nenormalnega AKT izražanja je poročalo, da spodbujajo migracijo celic in proliferacijo [40, 41], kar bi lahko pojasnilo, zakaj je ta polimorfizem povečala nevarnost AG. Nadaljnje študije obsežnih so potrebni za potrditev teh rezultatov.

Primerjali smo tudi distribucijo genotip teh dveh polimorfizmov v skupinah z različnimi clinicopathological parametrov in oceniti njihovo povezavo z GC prognozo. Ugotovili smo, da je AKT
rs1130233 GA, AA, in (GA + AA) genotipi so bili pogostejši pri pivcev kot v nondrinkers. Zato predvidevamo, da pivci s AKT
rs1130233 GA, AA, in (GA + AA) genotipov so bolj dovzetni za GC. Avan sod. [31] poroča, da je AKT
rs1130233 A alel je povezana z zmanjšanim preživetjem trebušne slinavke bolnikov duktalni adenokarcinom, ki se lahko pripisuje zmanjšano AKT1
mRNA in izražanja beljakovin in zmanjšane učinkovitosti apoptoze [33 42]. AKT
rs1130233 A alel je genotip tveganje za raka, po možnosti v povezavi s pitjem alkohola, kot je uživanje alkohola eden od povečanih dejavnikov tveganja GC [43-46]. Vendar pa ni bilo pomembno združenje teh dveh SNP s preživetjem GC našel Cox regresijska analiza. Zaradi relativno majhnega vzorca, lahko pristranskost odpoklic obstajajo v študiji primerov in kontrol ter stanja na izid bi lahko povzročila primere spremeniti svoj profil izpostavljenosti. Zato bi bile potrebne nadaljnje poskuse in študije obsežnih za potrditev naše rezultate.

Ta raziskava ima nekatere omejitve. Najprej je bila velikost vzorca relativno majhna, zlasti za preživetje in beljakovin izražanje analize, ki sta potrebna nadaljnja potrditev v velikih populacijah. Po drugi strani je samo OS analizirali v analizi preživetja in drugih prognostični parametri, kot so preživetje brez napredovanja bolezni so utemeljena tudi. Tretjič, analiza preživetja izvaja samo v podskupini celih bolnikov GC, ki bi lahko verjetnost selektivnega pristranskosti, in velik vzorec za prognostično študije je treba opraviti v bližnji prihodnosti. Četrtič, funkcionalni poskusi potrebni za pojasnitev mehanizma osnovne bolezni.

Zaključek

Skratka, odnos mTOR
rs1064261 in AKT
rs1130233 polimorfizmov z GC dovzetnostjo in OS dokazano je prvič. mTOR
rs1064261 in AKT
rs1130233 polimorfizmi so statistično pomembno povezane z GC tveganja pri moških. AKT
rs1130233 polimorfizem in H
. pylori
okužba pokazala pomembnih interakcij pri CON → AG → napredovanje GC. AKT
rs1130233 polimorfizem je bila povezana s povečanim beljakovin izražanja p-AKT v H
. pylori
-positive posamezniki.

• Plos ONE: Prehranska Fat vnos in tveganja želodčnega raka: Meta-analiza opazovalne študije
• Plos Computational Biology: Odkritje drog sinergije v želodcu raka celic z logičnimi Modeling