PLoS ONE: Združenie mTOR a Akt Génové polymorfizmy s citlivosťou a prežitie žalúdočné Cancer

abstraktné

Pozadie

fosfoinositidu 3-kinázy (PI3K) /proteín kinázy B (PKB, AKT ) /cicavcov cieľ rapamycínu (mTOR) signálne dráhy hrá kritickú úlohu v angiogenézu a rast buniek, proliferácie, metabolizmu, migrácie, diferenciácie a apoptózy. Genetickej rozmanitosti v kľúčových faktorov tejto dráhy môže mať vplyv na funkciu proteínu a prenosu signálu, čo prispieva k iniciácii a progresii ochorenia. Štúdie naznačujú, že mTOR
rs1064261 a AKT
rs1130233 polymorfizmy sú spojené s rizikom a /alebo prognózy rôznych typov rakoviny. Avšak, tento vzťah s rakovinou žalúdka (GC) zostáva nejasný. Cieľom tejto štúdie bolo skúmať úlohu mTOR stroje a AKT
polymorfizmy riziká a prognózy GC.

Metódy

Sequenom MassARRAY platforma bola použitá na genotype jedinca 1842 za mTOR
rs1064261 T → C a akt
rs1130233 G → a polymorfizmy. ELISA bola použitá pre detekciu Helicobacter pylori
protilátok v sére. Imunohistochemické analýza bola použitá na detekciu celkovej a fosforylovanej Akt mTOR a bielkoviny.

Výsledky

mTOR
rs1064261 (TC + ​​CC) genotyp a AKT
rs1130233 (GA + AA) genotyp boli spojené so zvýšeným rizikom GC u mužov ( P
= 0,049, P
= 0,030). V H
. pylori
negatívnych jedincov, AKT
rs1130233 GA a (GA + AA) genotypy boli spojené s vyšším rizikom atrofická gastritída (AG; P
= 0,012, P
= 0,024). Pozoruhodne, AKT
rs1130233 (GA + AA) genotyp preukázali významné interakcie s H
. pylori
do progresie ochorenia od zdravých kontrol (CON) k AG ( P
= 0,013) a od AG GC ( P
= 0,049). Naviac u jedincov s varianta AKT
rs1130233, tí v H. pylori-pozitívnej skupiny mali vyššie hladiny fosforylovaného AKT (p-AKT) výrazu.
bolo zistené AKT rs1130233 genotyp byť spájaný s klinicko-parametrov, vrátane lymfatických uzlín a pitie alkoholu ( P Hotel < 0,05).

Záver

mTOR
rs1064261and AKT
rs1130233 polymorfizmy boli spojené so zvýšeným rizikom GC u mužov a zvýšené riziko AG v H
. pylori
negatívnych jedincov. Významná interakcia existovala medzi AKT
rs1130233 genotyp a H
. pylori
infekcie CON → progresie AG → GC ochorenia. AKT
rs1130233 genotyp ovplyvnil proteín expresie p-AKT vo H
. pylori
-infected jedinci

Citácia :. Piao Y, Li Y, Xu Q, Liu J-w, Xing C-z, Xie X-d, et al. (2015) Združenie mTOR stroje a AKT
polymorfizmy génu s citlivosťou a prežitie rakoviny žalúdka. PLoS ONE 10 (8): e0136447. doi: 10,1371 /journal.pone.0136447

Editor: Masaru Katoh, National Cancer Center, JAPAN

prijatá: 2. marca 2015; Prijaté: 03.08.2015; Uverejnené: 28.augusta 2015

Copyright: © 2015 Piao et al. Toto je článok o otvorenej distribuovaný pod podmienkami Creative Commons Attribution licencie, ktorá umožňuje neobmedzené použitie, distribúciu a reprodukciu v nejakom médiu, za predpokladu, že pôvodný autor a zdroj sú pripísané

Data Dostupnosť: Všetky relevantné údaje spadajú do papiera a jeho podporné informácie súbory

Financovanie :. Táto práca bola podporená dotácií z Národného Key Basic programu výskumu Číny (. 973 Program čj 2010CB529304), Národná prírodná Science Foundation Číny ( Ref No.31200968)

Konflikt záujmov :. autori vyhlásili, že žiadne konkurenčné záujmy neexistujú

Úvod

rakovina žalúdka (GC) je jedným z najčastejších nádorových ochorení. na celom svete a hlavnou príčinou úmrtí na nádorové ochorenia [1]. Iniciácie a vývoj GC je viacstupňový proces, ovplyvňovaný genetických a environmentálnych faktorov. Štúdie ukázali, že exogénne faktory životného prostredia vrátane Helicobacter pylori
(HP) infekcia, diétne návyky, fajčenie, pitie alkoholu a ekonomické faktory prispievajú k žalúdočnej karcinogenéze [2]. Za podobných podmienok v oblasti životného prostredia, jedinci s odlišným genetickým pozadím trpia odlišná rizika rakoviny s rôznymi klinickými výsledkami. Až doteraz interakcie genetických a environmentálnych faktorov s žalúdočnej karcinogenéze bolo do značnej miery neznámy.

polymorfizmy sú triedou genetických faktorov, ktoré sa podieľajú na žalúdočné karcinogenéze a určujú inter-individuálne rozdiely vo veľkosti rizika GC. Genetické polymorfizmy môže oslabiť vnútorný ochranné mechanizmy a zvýšiť škody spôsobené v oblasti životného prostredia karcinogény. Nosiče vnímavých genotypov sú vystavené väčšiemu riziku vzniku rakoviny ako pacienti s odolnosť genotypov za podobných podmienok. Z tohto dôvodu, genetické faktory zohrávajú kľúčovú úlohu v GC riziko a klinickým výsledkom.

fosfoinositid 3-kináza (PI3K) /proteínkinázy B (PKB, AKT) /cicavčie cieľ rapamycínu (mTOR) upravuje rôzne bunkové funkcie vrátane rastu, množenia sa, migrácie a apoptózy. Tapia a kol. uvádzajú, že PI3K /Akt /mTOR je aktivovaný v GC, a že väčšina proteínov (fosforylovanej a nefosforylované formy) až doteraz študovaných v tejto dráhe sú nadmerne exprimované v nádorových tkanivách [3]. MTOR je kľúčovým členom PI3K /Akt /mTOR a jadro metabolickú signálne molekuly [4, 5]. Jednonukleotidových polymorfizmy (SNP) môže ovplyvniť expresiu a mTOR transkripčný aktivitu, a tým zmeniť funkciu proteínu. Doteraz boli študované celkom 14 polymorfizmov v tomto géne, z ktorých tri SNP (rs2295080, rs1883965 a rs2536) boli najčastejšie hlásené. Rs2295080 polymorfizmus v promotorové oblasti sa uvádza zníženie rizika karcinómu obličkových buniek [6], GC [7], a rakoviny prostaty [8], ktoré downregulating endogénne expresiu proteínov. Rs1883965 polymorfizmus je spojená so zvýšeným rizikom GC [9] a pažeráka spinocelulárneho karcinómu [10]. Okrem toho, rs2536 polymorfizmus je v spojení s výrazne zvýšeným rizikom rakoviny prostaty [8]. Okrem toho je mTOR
rs11121704 polymorfizmus je spojená s horšími klinickými parametrami (úmrtie, metastázy, a odolnosť proti chemoterapii) [11]. K dispozícii je 45 exónov v mTOR
génu, a rs1064261 polymorfizmus sa nachádza v exóne 18. variant T → C sa nachádza na hranici exónu 18 a intronom 19, ale jej vzťah k ochorenia je stále nejasná .

AKT
génu je rozhodujúca pre prežitie buniek a kóduje dôležitú downstream efektor PI3K / AKT
/ mTOR
cesta, ktorá reguluje kľúč bunkových funkcií vrátane metabolizmu glukózy a syntézu proteínov. AKT
, alternatívne známy ako AKT1
, má päť široko študované polymorfizmy (rs3803300, rs1130214, rs2494732, rs2498804 a rs1130233); prvé štyri sú spojené s rizikom alebo prognózu karcinómu nosohltanu, orálny karcinóm dlaždicových buniek, a nemalobunkového karcinómu pľúc. Rs1130233 polymorfizmus sa nachádza v exóne 8 a G → variácie sa nachádza na hranici exónu 8 a intronom 7. AKT
1 AA haplotypu pre rs1130233 a rs2494732, je údajne zveriť zvýšené riziko nazofaryngálne karcinóm [12]; haplotypu obsahujúce variantné alely rs1130214 a rs3803300 polymorfizmy výrazne zvyšuje náchylnosť k ústnej spinocelulárneho karcinómu [13]. Bolo zistené, nositeľmi (GT + GG) genotypu akt
1 rs2498804 alebo CT /TT genotyp AKT
1 rs2494732 mať zvýšené riziko mozgovej metastázy nemalobunkového rakovina pľúc [14]. akt
1 rs3803300, rs1130214 a rs2494732 mať významný vplyv na prežitie v non-malých pacientov s rakovinou pľúc Pacienti s rs3803300 G alely a rs1130214 G alely mal kratšie celkové prežívanie (OS) a prežívanie bez známok ochorenia (DFS) časy [15].

aj keď rozdiely vo mTOR stroje a AKT
hrajú dôležitú úlohu v žalúdočnej karcinogenéze, žiadna štúdia skúmala vzťah AKT
polymorfizmus s GC riziká a prognózou. Okrem toho je mechanický väzba medzi mTOR
rs1064261 a ako rakoviny citlivosťou a prežitie sú neznáme. Ak chcete zistiť, či sa mTOR stroje a AKT
polymorfizmy môžu slúžiť ako riziko a /alebo prognostických markerov pre GC sme skúmali mTOR
rs1064261 a AKT
rs1130233 polymorfizmy vo vzťahu k GC riziká a ich interakcie s H
. pylori
v case-control štúdii 1842 subjektov. V roku 205 jedincov s dostatočnými údajmi, klinicko-patologické parametre boli analyzované k objavovaniu pridružení týchto dvoch polymorfizmy s GC prognózou, a tak identifikovať nové biomarkery pre GC riziká a prognózy.

materiáloch a metódach

Štúdium dizajnu a populačné štúdie

Dizajn štúdie bola schválená etickou komisiou Human prvého Affiliated nemocnice Čínskej lekárskej univerzity (Shenyang, Čína). Každý účastník za predpokladu, písomný informovaný súhlas počas epidemiologického vyšetrovania. Usporiadanie štúdia zahŕňala dve časti (polymorfizmus aj na úrovni proteínov analýzy) a boli skúmané asociácie medzi polymorfizmy a rizika ochorenia a prognózou. V analýze GC rizík, pacienti GC boli z pričlenené nemocnice Čínske lekárskej univerzity, ktorá získala chirurgia operačný resekcii alebo gastroskopicky diagnóza /liečba v rokoch 2004 a 2013. AG pacientmi a kontrolnou skupinou sa regrutovali z kontroly stavu programu v Zhuanghe, Liaoning sa Province, medzi rokmi 2002 a 2013 všetky diagnózy boli založené na gastroskopicky a histopatologických vyšetrenie

Okrem toho prípady GC boli rozdelené do črevnej písať a rozptyľovať typ založený na Lauren klasifikáciu [16, 17] .; AG klasifikáciu a staging boli založené na novom systéme Sydney [18, 19]. Účastníci kontrolné mali normálnu nálezy žalúdka alebo len gastritídu. Informácie o fajčenie, konzumácia alkoholu a rodinnej histórie na boli získané "tvárou v tvár" dotazníkového šetrenia. Fajčiari a alkoholické nápoje boli definované nasledovne: ak jeden údené viac ako raz denne, a ak to trvalo dlhšie ako jeden rok, potom táto osoba bola definovaná ako fajčiarov, a táto situácia súčasťou súčasných fajčiarov a bývalých fajčiarov, ktorí prestali fajčiť viac ako 1 rok. Osoby, ktorí nemali túto situáciu spĺňajú boli definované ako nikdy fajčiarov. Ak jeden spotrebovaný jednu fľašu piva alebo piaty kilá likéru denne a ak je táto situácia trvala dlhšie ako jeden rok, potom táto osoba bola považovaná za napájačky. Jednotlivci, ktorí sa nezmestia tento štandard boli definované ako nondrinkers. Nalačno žilovej krv bola získaná od každého účastníka, a skladované pri -20 ° C, ako sérum a zrazená buniek.

Pre ďalšie vyhodnotenie vzťah polymorfizmov s klinicko-parametrami a prežitie GC sme vykonali analýzu prognostický pacientov GC pre ktoré bolo k dispozícii dostatočné klinické údaje. Histologické údaje boli hodnotené podľa kritérií zdravotníckou organizáciou a tumor-node-metastázy (TNM) stagingu pooperačných patologických vzoriek bola vykonaná podľa 7. ročník Medzinárodnej únie proti rakovine (UICC) /americký Spoločný výbor rakoviny (AJCC) ( 2010) kritérií. Pacienti s vzdialených metastáz pred operáciou, tí, ktorí dostávali rádioterapiu alebo chemoterapii pred operáciou, a tí s nedostatočnými informáciami o prognostické analýzy boli vylúčené. Vykoná sa analýza citlivosti bola vykonaná otestovať, či boli vylúčení pacienti mali vplyv na analýzu prežitie. Follow-up u všetkých pacientov bolo dokončené v máji 2014.

SNP genotypizácia

genómovej DNA bola extrahovaná z krvných vzoriek metódou fenol-chloroform [20] a riedi na pracovnú koncentráciu 50 ng /ul u mTOR
rs1064261 T → C a AKT
rs1130233 G → V genotypu. Vzorky boli umiestnené náhodne do 384-jamkových doštičiek a analyzované zaslepenej fáze stavu ochorenia. Genotypizácia bola vykonaná pomocou platformy Sequenom MassARRAY (Sequenom, San Diego, Kalifornia, USA) podľa inštrukcií výrobcu. Pre kontrolu kvality, 5% vzoriek podstúpila opakovanú genotypizáciu; Výsledky boli 100% konzistentné.

H. pylori sérologia skúmanie

analýza Sérologický detekovať H
. pylori
infekcie bola vykonaná za použitia ELISA ( H
. pylori
-IgG ELISA kit, Biohit, Helsinky, Fínsko), ako bolo opísané skôr [21]. Čítanie > 34 enzýmovej imunitný jednotky bol považovaný ukázať H
. pylori
pozitivity.

Detekcia mTOR a AKT proteínov v tkanive

Imunohistochemické analýza bola použitá na stanovenie expresie celkového a fosforylovaného mTOR a AKT (p-mTOR a p -Akt) proteíny 65 formalínom fixované, parafínových vzorkách tkanív GC. Vzorky tkaniva boli narezané na 4-um silné oddiely a namontovaný na sklenené sklíčka poly-L-lyzínom potiahnuté. Po vyhľadaní antigénu citrónová kyselina, primárna protilátka bola inkubovaná s tkanivových rezoch pri teplote 4 ° C cez noc (koncentrácia riedenie: mTOR a p-mTOR 1: 100, AKT 1: 300, a p-AKT 01:50, všetky boli zakúpené od Cell Signaling technológie). Po troch 5-minútových premytí fosfátom tlmeného fyziologického roztoku, tkanivové rezy boli inkubované s biotinylizované sekundárnou protilátkou (Maixin, Fujian, Čína) a streptavidín-biotín peroxidáze počas 10 minút každý pri 37 ° C. Pre negatívne kontroly, primárna protilátka bola nahradená pufri PBS.

Štatistická analýza

Štatistická analýza bola vykonaná s použitím SPSS (verzia 18,0) štatistického softwaru (SPSS, Chicago, IL, USA). Hardy-Weinberg rovnováha (HWE) bol najprv hodnotené u zdravých kontrol. Upravený vzájomné pomery a 95% intervaly spoľahlivosti (CIS) pre vzťah medzi oboma polymorfizmov a rizika ochorenia boli vypočítané multivariable logistickej regresie, s úpravou pre pohlavia, veku a H
. pylori
stav infekcie. . V rozvrstvené analýze, pri stratifikácii podľa veku, pohlavia a H
pylori
stav infekcie boli upravené; . Pri rozdelení podľa pohlavia, veku a H
pylori
stav infekcie boli upravené; a keď rozdelenie podľa H
. pylori
zdravotný stav, pohlavie a vek boli upravené. Skúšobný koeficient pravdepodobnosti bola vykonaná za účelom posúdenia interakcií účinky genotypu a H
. pylori
na rizika ochorenia porovnaním model, ktoré sa týkajú iba hlavných vplyvov na pohlavie, vek, H
. pylori
status, a genotyp s úplným modelom (tiež obsahujúce interakcie termín genotypu s H
. pylori
stav). Pearsonov χ ^{2 test bol použitý pre vyhodnotenie vzťahu rôznych genotypov s klinicko parametrami GC. Fisherov presný metóda bola použitá pri očakávanej frekvencie bola nižšia ako päť. Spôsob podľa Kaplan-Meiera sa používajú pre zobrazovanie OS podľa genotypu skupinou. Log-rank test sa používa na skúmanie rozdielov v distribúciách prežitie. Univariable a viacrozmernom Cox proporcionálneho rizika modely boli vykonané pre výpočet surové alebo upravené Nebezpečenstvo pre pomery a 95% CI pre každý genotyp odhadnúť vplyv na prežitie s alebo bez úpravy mätúcich faktorov. Logistická regresná analýza bola použitá na preskúmanie vplyvu polymorfizmu na expresiu proteínu upravených podľa pohlavia, veku a H
. pylori
stav. Dvojchvostý P
hodnoty. ≪ 0,05 boli považované za štatisticky významné}

Výsledky

charakteristika Základné pacientov

Demografické a klinické charakteristiky 1842 osoby podieľajúce sa na analýzu rizík, zahŕňajúce 483 pacientov, GC, 686 pacientov AG a 673 zdravých kontrol sú uvedené v tabuľke 1. Obe SNP boli prítomné v HWE; distribúcia genotyp je uvedená v tabuľke 2. Výsledok analýzy citlivosti bol uvedený v tabuľke S1, ktorý overil boli vylúčení pacienti nemal žiadny vplyv na analýzu prežitie. Demografické a klinické charakteristiky 205 pacientov GC podieľajúcich sa na analýzu prežitie, vrátane veku, pohlavia, Borrmann klasifikácie, Lauren klasifikácie TNM štádium, štruktúra rastu, hĺbka invázie, lymfatických uzlín, fajčenie, pitie, rodinná anamnéza, a H
. pylori
infekcie sú uvedené v tabuľke 3.

Združenie SNP s GC a AG rizík

Multivariable logistická regresia bola použitá k objavovaniu asociácii
rs1064261and AKT
rs1130233 s GC a rizikom AG. Nebol žiadny významný rozdiel mTOR
rs1064261 a AKT
rs1130233 o riziku vzniku CON → AG, AG → GC, CON → GC, alebo CON + AG → GC progresie (pozri tabuľku 2) .

pri analýze stratifikácia mužov (tabuľka 2) nosiče TC genotypu mTOR
rs1064261 mal 1,55 násobne vyššie riziko GC v porovnaní s AG ( P
= 0,049, 95% interval spoľahlivosti 1,00 - 2,38); A alela AKT
rs1130233 titul 1,32-krát 1,29-krát a 1,30-násobné zvýšenie AG → GC, CON → GC a (CON + AG) → progresie GC, respektíve cez G alela ( P
= 0,013, 95% interval spoľahlivosti 1,06 - 1,64; P
= 0,038, 95% interval spoľahlivosti 1,01 - 1,64; a P
= 0,008, 95% interval spoľahlivosti 1,07-1,58, S2 tabuľka). V H
. pylori
-negativní skupina, AKT
rs1130233 GA genotyp bolo spojené s 1,69-násobné zvýšenie rizika AG v porovnaní s CON ( P
= 0,012, 95% interval spoľahlivosti 1,12 - 2,54, tabuľka 2). Okrem toho žiadna významná súvislosť bola zistená medzi týmito dvoma polymorfizmy a črevné typu alebo difúzne typu GC do celkových a vrstvené analýz (S3 a S4 tabuľkách).

potom analyzoval interakcií na mTOR
rs1064261 a AKT
rs1130233 s H
. pylori
infekcie. Výsledky ukázali, že AKT
rs1130233 (GA + AA) genotyp mala významný interakciu s H
. pylori
infekcie CON → AG a AG → GC progresie ( P
= 0,013 a P
= 0,049; Tabuľka 4). Avšak, žiadna významná interakcia mTOR
rs1064261 s akt
rs1130233 bolo pozorované u CON → AG → GC progresie v celej a vrstvené analýz (S5 tabuľka). Ďalej, tam sa žiadna významná interakcia medzi týmito dvoma polymorfizmov a H
. pylori
infekcie CON → AG → GC progresie (pozri tabuľku 4).

Združenie SNP s klinicko-parametrami GC pacientov

Analýza vzťahu mTOR
rs1064261 a AKT
rs1130233 s klinicko-parametre pacientov GC navrhol, že AKT
rs1130233 GA a GA (+ AA) varianty genotypov sa vyskytujú častejšie u pacientov GC bez lymfatických uzlín než u pacientov s lymfatických uzlín (GA 89,1% verzus 71,1%, P
= 0,012; GA + AA 92,2% verzus 81,1%, P
= 0,030). GA, AA a (GA + AA) genotypy boli častejšie u pijanov ako v nondrinkers (GA 61,0% verzus 95,8%, P
= 0,047; AA 63,6% verzus 88,9%, P
= 0,047; GA + AA 76,8% verzus 96,9%, P
= 0,038; tabuľka 5). Avšak, žiadna významná súvislosť bola zistená medzi mTOR
rs1064261 varianty a klinicko-parametre u pacientov s GC.

žiadna asociácia medzi SNP a prežitie pacienta GC

Univariable a viac premenných Cox proporcionálne nebezpečenstvo modely boli vykonané na zhodnotenie účinku na mTOR
rs1064261 a akt
rs1130233 polymorfizmy na prežitie GC (pozri tabuľku 6). Vzhľadom k tomu, Lauren klasifikácie TNM štádiu, štruktúry rastu, hĺbku invázie a metastáz do lymfatických uzlín boli významne spojené s prežitím ( P Hotel < 0,05, je uvedené v tabuľke 3), boli považované za upravených kovariátov v Cox proporcionálne nebezpečenstvo regresného modelu. Výsledky neukázali žiadne významné spojenie medzi oboma SNP a GC prognózou (tabuľka 6). Rovnako tak vrstevnatý analýza nepreukázala žiadnu významnú súvislosť medzi SNP genotypu a GC prognózou (S6 tabuľka).

SNP genotyp koreluje s expresiou celkový a fosforylovanej proteíny

Expresia celkového a fosforylovaného mTOR a Akt proteínov bola analyzovaná v tkanivách z rôznych skupín účastníkov (obrázok 1). Celkovo nebol žiadny významný vzťah medzi dotknutými mTOR
rs1064261 alebo AKT
rs1130233 polymorfizmus a celkovej alebo fosforylovanej mTOR a Akt proteíny. V H
. pylori
-pozitívny podskupina, podiel p-AKT-pozitívnych buniek bolo v skupine genotypu varianty významne vyššia ako u divokého typu skupiny ( P
= 0,045; Tabuľka 7).

Diskusia

V tejto štúdii sme sa hlási prvýkrát združenia na mTOR
rs1064261 a AKT
rs1130233 polymorfizmy s GC riziká a prognózy , U mužov je mTOR
rs1064261 (TC + ​​CC) genotyp a A alela AKT
rs1130233 boli spojené so zvýšeným rizikom GC. V H
. pylori
negatívnych samca, AKT
rs1130233 (GA + AA) genotyp bolo spojené so zvýšeným rizikom AG. Okrem toho je AKT
rs1130233 (GA + AA) genotyp ukázala významné interakcie s H
. pylori
infekcie CON → AG → GC progresie. Variant genotyp AKT
rs1130233 bola spojená so zvýšenou expresiou proteínu p-AKT. AKT
rs1130233 polymorfizmus bol tiež spájaný s lymfatických uzlín a pitie alkoholu. Tieto nálezy poskytujú experimentálny dôkaz na podporu mTOR a AKT ako potenciálny biomarkery špecifické typy GC a tiež poskytnúť vodítko k interakcii medzi H
. pylori
infekcie a mTOR /AKT signalizácie.

mTOR
gén je umiestnený na ľudskom chromozóme 1p36.2 a kóduje proteín 289 kDa mTOR, ktorý sa skladá z 2549 aminokyselín , MTOR je členom fosfatidylinozitol kinázy (PIK) rodiny a je serín /treonín kinázy aktivity. Zistili sme, že mTOR
gén (TC + ​​CC) variant genotyp bol spojený so zvýšeným rizikom GC u samcov, čo naznačuje, že sa podieľa na karcinogenéze. MTOR existuje hlavne v cytoplazme za obvyklých podmienok a vstupuje do jadra po aktivácii regulovať následní terčov eukaryotických iniciačný faktor 4E (EIF-4E) viažuci proteín 1 (4E-BP1) a ribozómu 40S malé podjednotky S6 proteín kinázu (p70S6K) [22 -24]. Tá je základným členom PI3K /Akt /mTOR a centrálne metabolické signálne molekuly. MTOR integruje rad bunkových signálov z rastových faktorov a nutričnú hodnotu a energie stave; tak, že má významné biologické funkcie v angiogenézu a rast buniek, proliferácie, metabolizmu, migrácie, diferenciácie a apoptózy [25]. Jeho funkcia je úzko spojená s premenou normálneho do nádorových buniek a na proliferáciu nádorových buniek. Genetické rozdiely v génoch mTOR signálnej dráhy ( PI3K
AKT stroje a Ptení
) môže podporovať karcinogenéze [26-28]. mTOR
SNP sú hlásené, že sú spojené s náchylnosťou k GC [7, 9], karcinóm renálnych buniek [6], rakoviny prostaty [8], a pažeráka spinocelulárny karcinóm [10]. Tieto SNP môže ovplyvniť hladinu expresie mTOR a transkripčný aktivity, a tým zmeniť funkciu proteínu. G alela mTOR
rs2295080 polymorfizmus je spojená so znížením rizika GC, čo môže spôsobiť zníženú aktivitu promótorom a expresiu mRNA [7]. Ďalšie mTOR
polymorfizmus sa nachádza v promotorové oblasti, rs1883965 G → A, udeľuje zvýšené riziko GC [9] a pažeráka spinocelulárneho karcinómu [10]. Naše zistenia naznačujú, že (TC + ​​CC) genotyp je spojená so zvýšeným rizikom GC u mužov, aj keď nebol pozorovaný žiadny vplyv na expresiu proteínu. mTOR
môže podporovať proliferáciu buniek a trochu "onkogénnu" vlastnosti. Variant genotyp môže mať ešte väčšiu onkogénne aktivitu. Ako muži sú častejšie vystavení viac expozičných rizikových faktorov (fajčenie, pitie a nezdravé životné návyky), nosiče určitého genotypu môžu byť citlivé k zvýšenému riziku GC.

AKT
je v- AKT
myšou thymom vírusového onkogénu homológov, mapuje na ľudský chromozóm 14q32.32 a kóduje 56 kDa proteín, ktorý sa skladá z 480 aminokyselín [15]. AKT je dôležitým efektor signálneho dráhy PI3K /Akt /mTOR, a genetickej mutácie alebo abnormálne expresie proteínu môže ovplyvniť rôzne bunkové procesu, vrátane migrácie, proliferáciu, rast a prežitie. Navyše, aktivácia AKT sa podieľa na proliferáciu a apoptóze buniek, ktoré sa vzťahujú k iniciácii a progresii rakoviny [29]. akt
SNP sú hlásené, že sú spojené s vnímavosťou k a /alebo prognózy rôznych typov rakoviny, vrátane rakoviny nosohltana [12], perorálne skvamocelulárneho karcinómu [13, 30], nemalobunkového karcinómu pľúc [14 , 15], duktálny adenokarcinóm [31], a GC [32], prostredníctvom účinkov na expresiu proteínu a transkripčný aktivity. Wang et al. študované štyri SNP vrátane rs1130233 v čínskej populácie [13], a zistilo sa, že tri polymorfizmy boli spojené s náchylnosťou k ústnej spinocelulárneho karcinómu alebo DFS, ale bez významnej vzťahu pre rs1130233. Zhang et al. hlásil, že AA haplotypu AKT
rs1130233 a rs2494732 titul zvýšené riziko karcinómu nosohltanu [12] a že niektorí AKT
haplotypu spôsobiť expresiu zvýšil AKT proteínovú [33, 34], čo vedie k poškodeniu bunkovej migrácie a proliferácie. Preto je AKT
rs1130233 A alely mohla zvýšená proliferačnú aktivity. V tejto štúdii sme zistili, že AKT
rs1130233 alely titul zvýšené riziko GC u mužov. Všeobecne platí, že muži majú vyšší výskyt GC a vyššia úmrtnosť než GC dospelých žien [35]. Vysoká miera vystavenia mužov rizikových faktorov životného prostredia (fajčenie, pitie a nezdravých životných návykov), zvyšuje ich náchylnosť k GC [36]. Vzhľadom k tomu, alely môže mať silnejšie proliferačnej aktivity, kombinovaný účinok akt
polymorfizmus a pohlavia by mohlo čiastočne vysvetliť pozorované vysoké GC rizika spojeného s AKT
rs1130233 polymorfizmus u mužov.

Navyše sme zistili, že v H
. pylori
-negativní podskupina, AKT
rs1130233 (GA + AA) genotyp bol spojený so zvýšeným rizikom AG. AKT
rs1130233 polymorfizmus vykazoval významnú interakciu s H
. pylori
infekcie CON → AG → GC progresie. Je všeobecne uznáva, že H
. pylori
je hlavnou príčinou GC. H
. pylori
virulentné faktory môžu vyvolať abnormálne proliferáciu buniek a apoptózu prostredníctvom regulačné signálne dráhy (vrátane PI3K /AKT); je to nedávny výskum hotspot [37-39]. Tabassam et al. navrhol, že fosforylácie AKT vyvolaná H
. pylori
virulentné faktory CAG PAI a OipA reguluje vnútrobunkové signály sú zodpovedné za rad bunkových funkcií podieľajúcich sa na žalúdočné rakoviny. Konkrétne podpora AKT serínu 473 alebo treonínu 308 fosforylácie CAG PAI a OipA môže narušiť následnej proliferácie a apoptózy signály. Kombinácia CAG PAI a OipA je dostatočná pre aktiváciu PI3K /PDK1 dráhu a Akt /EKR /downstream signalizáciu [39]. Nakayama et al. hlásil, že H
. pylori
faktor virulencie Vaca vyvoláva funkciu β-katenin aktiváciou PI3K /Akt dráhy a inaktiváciou GSK33β [38], a tým reguláciu bunkovej proliferácie, diferenciácie a apoptózy. Tieto údaje naznačujú, že interakcia H
. pylori
s aktívnym AKT má biologickú funkciu. Avšak, ani jedna z dvoch SNP v rámci tejto štúdie ani H
. pylori
infekcie v súvislosti s týmito SNP ukázala významné interakcie s GC. Celkovo tieto údaje zdôrazňujú významnú úlohu AKT
rs1130233 polymorfizmu v PI3K /mTOR /AKT dráhy. Okrem toho, v H
. pylori
-pozitívny podskupina, tie s AKT
rs1130233 variantu genotyp so zvýšenou expresiou p-AKT. Vzhľadom k tomu, polymorfizmus vykazoval interakciu s H
. pylori
infekcie, účinok tohto polymorfizmu na expresiu proteínu sa môžu objaviť len v prítomnosti H
. pylori
infekcie. Genetická mutácia vedúca k abnormálne AKT vyjadrenie je hlásený na podporu migrácie buniek a proliferáciu [40, 41], čo by mohlo vysvetľovať, prečo tento polymorfizmus zvyšuje riziko AG. Štúdia Budúce vo veľkom meradle sú nutné pre potvrdenie týchto výsledkov.

Tiež v porovnaní distribúcii genotyp týchto dvoch polymorfizmov v skupinách s rôznymi klinicko-parametre a posúdená ich vzťah k GC prognózou. Zistili sme, že AKT
rs1130233 Ga, AA a (GA + AA) genotypy boli častejšie u pijanov ako u nondrinkers. Preto predpokladáme, že pijani s AKT
rs1130233 Ga, AA a (GA + AA) genotypy sú náchylnejšie na GC. Avan et al. [31] uvádzajú, že AKT
rs1130233 A alely je spojená so zníženým prežitím pacientov pankreasu duktálny adenokarcinóm, ktorý by mohol byť pripisovaný zníženie AKT1
mRNA a expresie bielkovín a zníženie účinnosti apoptózy [33 , 42]. AKT
rs1130233 A alely je riziko genotyp rakoviny, prípadne v spojení s pitím alkoholu, ako konzumácia alkoholu bola jedným z rizikových faktorov zvýšenej GC [43-46]. Avšak, žiadna významná asociácia týchto dvoch SNP sa prežitie GC bolo zistené, regresnej analýzy Cox. Vzhľadom k relatívne malej veľkosti vzorky, odvolanie zaujatosť by mohla existovať v case-control štúdii a stav výsledok môže spôsobiť prípady meniť svoj profil expozície. Preto bolo potrebné ďalšie experimenty a veľkých štúdií na potvrdenie našich výsledkov.

Táto štúdia má niektoré obmedzenia. Po prvé, veľkosť vzorky bola relatívne malá, a to najmä pre prežitie a expresie proteínov analýzy, z ktorých oba potrebovať ďalšie potvrdenie vo veľkých populácií. Po druhé, iba OS bol analyzovaný v analýze prežitie a ďalšie prognostické parametre, ako sú prežitie bez progresie sú tiež oprávnené. Po tretie, analýza prežitia bola vykonaná iba v podskupine pacientov celých GC, ktoré by mohli urobiť pravdepodobnosť selektívne skreslenia, a veľkú veľkosť vzorky pre prognostické štúdie by mali byť vykonávané v blízkej budúcnosti. Po štvrté, funkčné pokusy sú potrebné na objasnenie mechanizmu ochorenia.

Záver

V súhrne možno konštatovať, vzťah mTOR
rs1064261 a AKT
rs1130233 polymorfizmy GC citlivosťou a OS bolo preukázané, prvýkrát. mTOR
rs1064261 a akt
rs1130233 polymorfizmy boli významne spojené s rizikom GC u mužov. AKT
rs1130233 polymorfizmus a H
. pylori
infekcie ukázala významné interakcie v CON → AG → GC progresie. AKT
rs1130233 polymorfizmus bola spojená so zvýšenou expresiou proteínu p-AKT v H
. pylori
-pozitívnych jednotlivci.

• Ploche ONE: Diétne Fat Príjem a riziko rakoviny žalúdka: Meta-Analysis of pozorovacích štúdií
• PLoS Computational Biology: Discovery of Drug synergia v žalúdočnej nádorových buniek predpovedal Logical Modeling