Порода предрасположенность к собачьей карциномы желудка - исследование, основанное на норвежском собачьего ракового регистра
Аннотация
Справочная информация
Предыдущие исследования показали порода предрасположенность к карциноме желудка у собак. Тем не менее, на сегодняшний день результаты противоречивы, поскольку некоторые исследования не смогли доказать такую предрасположенности. Более глубокое понимание пород риска может способствовать раннему выявлению рака желудка у собак. Цель исследования состояла в том, чтобы ретроспективно исследовать пропорции и возможную предрасположенность породы к собачьей рака желудка с использованием норвежского Кинолог Раковый регистр для расчета пропорциональных соотношений заболеваемости (УПС) за период 1998-2009 гг.
Результаты
гистологически верифицированной были изучены опухоли, записанные в Норвежском собачьих рака регистра (п = 19,715). Всего было выявлено 31 (0,16%) случаев собачьего желудка карцином. Средний возраст пострадавших собак было 10 лет. Наиболее частыми клиническими признаками были рвота, потеря аппетита, и потеря веса. Мужчины имеют значительно более высокие шансы на рак желудка, чем у женщин (р = 0,02). PMR с 95% доверительный интервал (ДИ) рассчитывали для каждой породы, и порода была выявлена предрасположенность. Лица пород Тервурене (PMR 56,1), фландрский бувье (PMR 36,5), Groenendael (PMR 34,5), колли (PMR 26,1), пудель (PMR 7.6), и норвежский Elkhound (PMR 6.1), имели значительно повышенный риск был обнаружен рак желудка развивается.
Обсуждение и выводы
доля случаев рака желудка, зарегистрированным в норвежском собачьих рака регистра быть 0,16%, а порода предрасположенность была выявлена. Порода предрасположение наблюдается в настоящем исследовании указывает на генетическую предрасположенность к карциноме желудка.
Ключевые слова этого
Собака желудочной карциномой Породы Пропорциональное соотношение заболеваемости рака регистрирующего фон
Собачий рак желудка диагностируется редко и, как сообщается, составляют приблизительно 0,1 -0,5% собачьих неоплазий [1-3]. Тем не менее, это все еще более распространены у собак, чем у других домашних животных [4]. Большинство опухолей желудка у собак карцином, что составляет 50-90% [2, 5, 6], с последующей leiomyosarcomas и злокачественную лимфому [2]. Аденокарцинома является наиболее распространенным типом рака желудка [2]. Этот подтип карциномы формы трубчатых структур и могут демонстрировать различные модели на различных уровнях вторжения стенки желудка. Неопределенная карцином, которые содержат оставшиеся карцином, не имеют видимых железистых структур [4]. Клиническая значимость этих гистологических подтипов рака неизвестна, и общий термин «рак желудка» используется в данной статье. Среди собак, рак желудка, как сообщается, влияют на мужчин чаще, чем у женщин [2, 3, 6-9]. Более высокая заболеваемость среди мужчин также наблюдается для карциномы желудка человека [10]. Карциномы желудка, как правило, болезнь пожилых собак, но было сообщено в собаках в возрасте 3-20 лет, средний возраст на момент постановки диагноза 8.4-10.8 лет [2, 3, 5, 7-9, 11, 12 ]. Частота карциномы желудка увеличивается с возрастом и в людях [10]. Карциномы желудка у собак чаще всего находится в малой кривизны и пилорического отдела желудка [2, 3, 5, 8].
Наиболее распространенные клинические признаки, связанные с карциномой желудка являются рвота, потеря аппетита, и потеря веса. Haematemesis, мелена, анемия, апатия, слюнотечение, полидипсия, вздутие живота и дискомфорт в животе и другие отмечены признаки [3, 5, 6, 8, 9]. Клинические признаки напоминают те, которые связаны с хроническим гастритом [13]. Большинство собачьих пациентов имели клинические признаки в течение примерно четырех месяцев или менее на момент постановки диагноза, хотя продолжительность столько, сколько 18 месяцев сообщается [3, 5, 6, 8, 14]. Прогноз в случаях рака желудка оставляет желать лучшего. Один случай серии сообщили среднее время выживания 35 дней, с диапазоном от 0 дней до 10 месяцев после установления диагноза [5]. Кроме того, 70-90% желудочных карцином имеют метастазы на момент постановки диагноза или эвтаназии [3, 5, 7]. Наиболее распространенные места сообщили метастазов являются региональные лимфатические узлы, с другими лицами, сальник, двенадцатиперстной кишки, печени, поджелудочной железы, селезенки, пищевода, надпочечники и легкие [3, 5, 7, 9].
Предварительный диагноз собачьего рака желудка, обычно получают с помощью ультразвука или эндоскопическое обследование желудка. С помощью ультразвука, утолщение стенки желудка, потеря стенки желудка отводками, и увеличение регионарных лимфатических узлов, вероятно, будет наблюдаться [15]. Эндоскопия позволяет визуализировать слизистую оболочку и выполняя биопсию, с тем чтобы определенный диагноз. Отдельным язва с толстыми стенками и нерегулярными повышенных от окружения обычно наблюдается, но более диффузные изменения в связи с потерей Ругаль складок и подслизистого сосудистого рисунка при отсутствии язв также описаны [3, 8].
В организме человека 95 % от рака желудка являются спорадические случаи, и Helicobacter Pylori
инфекция является наиболее важным фактором риска для окружающей среды [16]. Семейную агрегацию в небольшом количестве случаев предполагает значительную генетическую предрасположенность [17, 18]. Наследственные диффузный рак желудка у людей, где возбудитель мутации зародышевой линии была определена как CDH1
, как сообщается, связан с 5% всех рака желудка [17].
Кинолог породы предрасположение сообщалось для некоторых типов рака [1]. Хотя порода предрасположенность к карциноме желудка подозревался, некоторые исследования не предоставили доказательств, подтверждающих [2, 5, 9]. В таблице 1 приводится краткая информация о предрасположенных пород сообщили из других исследований, большинство из которых являются серии случаев. Эти серии случаев являются чисто описательные исследования, без сравнения между характеристиками подгрупп. Из-за этого ограничения, никаких предположений о связи между воздействием и результатом может быть сделано [19]. Другие исследователи провели исследования случай-контроль на основе больничных записей [3, 12]. Никакое знание не доступно в отношении населения, подверженных риску, из которого возникают случаи, в этой конструкции. Следовательно, они не могут быть использованы для оценок заболеваемости раком, хотя отношение шансов рака по породе можно оценить [20] результаты .table 1 Предыдущие исследования 'связанные разводить предрасположенности к карциноме желудка у собак
Авторы
случаи
Страна
Breed предрасположенности
дизайн исследования
Сравнение
1. (LINGEMAN и др. [9])
61 Meet США Singles Нет породы предрасположенности
Case серии
2. (Зауттер не и др. [6])
14
США
нет породы предрасположенности
Case серии
3. (Patnaik и др. [2])
26
США не
нет породы предрасположенности
Case серии
4. ( Sullivan и др. [3])
31
Соединенное Королевство
7/31 бордер колли и 3/31 Стаффордширский бультерьер контроль
чехол для сравнения с породами больничных присоединений
Результаты 5. (Fonda и др. [8])
15
Италия
генетический механизм предложил в 8 бельгийских овчарок (7 Groenendael и 1 Тервурене)
Дело серии
Родословная рассмотрены в 8 случаях <бр> 6. (Scanziani и др. [7])
11
Италия
Высокая частота в бельгийских овчарок (Groenendael)
Case серии
7. (Penninck и др. [12]) <бр> 16 Meet США Singles 4/16 случаи чау-чау (46,2 RR)
контроль относительной чехол для распространения определенной против больницы населения
8. (Swann и Холт. [5])
19 Meet США Singles Нет порода предрасположенности
Дело серии
9. (Билек и Hirt. [11])
19
Австрия
3/19 чау-чау (ИЛИ 23.5)
контроль чехол для сравнения с номерами от австрийского клуба собаководства
10. (Qvigstad и др. [21]) 4
Норвегии
Норвежский Lundehund
серии
11. Case (Lubbes и др. [10])
92
Голландия
Заболеваемость: 1,18% среди Тервурене
ретроспективное
Благодаря продвинутой стадии заболевания на момент постановки диагноза и высокая частота метастазирования, раннее обнаружение является существенным, если лечение собачьей рака желудка должна быть пытался. Поскольку представляющие признаки могут быть аналогичны тем, которые наблюдались в случаях хронического гастрита, некоторые пациенты симптоматическое лечение при гастрите в течение длительных периодов времени. Подозрение рака желудка может сначала возникнуть, когда эта форма лечения не удается. Поэтому очень важно для благополучия животных, чтобы получить правильный диагноз как можно раньше. Лучшее знание пород в группу риска может обеспечить раннее выявление рака желудка в пострадавших случаях, а также могут способствовать сравнительные генетические исследования, которые могли бы выявить факторы, способствующие развитию рака желудка.
Мы предположили, что порода предрасположенность к собачьей рака желудка существует у собак , Цель исследования состояла в том, чтобы ретроспективно исследовать пропорции и возможную предрасположенность породы к собачьей карциномы желудка с использованием данных из Норвежского собачьих рака регистра в качестве основы для расчета PMR за период 1998-2009 гг.
Материалы и методы
Исследование населения
Данные были получены из норвежской собачьих рака регистра, базы данных, состоящей из всех проверенных гистопатологически опухолей, представленных в диагностической лаборатории патологии в норвежской школе ветеринарной науки в период с марта 1998 года по декабрь 2009 образцы возник из частных ветеринарных клиник все над Норвегией, а также из норвежской школы ветеринарных наук. Информация о имени каждой собаки, порода, пол, возраст в годах, и гистологической диагностики включена в базу данных. Оригинальные формы направления были искали информацию о методах отбора проб, клинических признаков, продолжительность симптомов и состояния питания. Норвежский Lundehund Сообщалось, что быть предрасположены к желудочной карциномы [21], но желудочно-кишечные образцы из норвежских Lundehunds не были включены в реестр в течение этого периода времени из-за отдельного проекта с участием этой породы. База данных искали терминов «неоплазия» и «живот», и сочетание этих двух терминов был определен как «рак желудка».
Гистопатологического исследования
Гистопатологические исследования проводили на формалин-фиксированных, парафин образцы ткани окрашивали гематоксилин-эозином и ван Гизону годов. Все гистологические слайды, классифицируемые как рак желудка в базе были повторно осмотрен опытным ветеринарным патологоанатомом (EJ) в течение 2011 года Классификация была проведена в соответствии со стандартом Всемирной организации здравоохранения [4]. Патологоанатом был слеп к первоначальному гистологической диагностики при просмотре слайдов. Иммуногистохимия с цитокератином и виментину была выполнена, если существует неопределенность в отношении диагноза. Образцы диагностированы как карцином были включены в качестве случаев в исследовании.
Статистический анализ
Количество желудочных карцином в реестре было разделено на количество всех других представленных опухолей того, чтобы получить общую долю желудочных карцином. PMR желудочной карциномы по породе была рассчитывается путем деления числа желудочных карцином в породе (а
<суб> 1) всех опухолей в породе (п
<суб> 1), по числу желудочных карцином во всех других пород (A
<суб> 0), разделенное на всех других опухолей в других пород в базе данных (п
<суб> 0) = (а
<суб> 1 /п
<суб> 1) /(а
<суб> 0 /п
<суб> 0) [22]. 95% ДИ для PMR была вычислена по логарифмической шкале [23]. Отношение шансов (OR) для рака желудка была рассчитана для мужчин по сравнению с женщинами, а Р-величина была оценена на основе точного критерия Фишера. Уровень статистической значимости был установлен на уровне P < 0.05. Все статистические анализы были выполнены с использованием программного пакета Stata, версия 11 (Stata Corporation, College Station, Texas, США).
Результаты
Материал, состоял из 19,715 опухолей, из которых 44 были диагностированы как рак желудка. В общей сложности, 10/44 (22,7%) получили новый гистопатологические диагноз, когда пересмотрела в течение 2011 года 31/44 были подтверждены как желудочных карцином (0,16% от общего числа). В 13 случаев, которые были диагностированы с раком желудка в реестре, и которые не были диагностированы как карцином, были признаны две рак на месте, один аденома, один гиперплазия, два метастаз опухоли с неизвестными первичными опухолями, а также шесть опухолей круглых клеток , В одном случае диагноз не был окончательно решен из-за небольших и неадекватных биопсий. Аденокарцинома был наиболее распространенным раком, происходящих в 23/31 (74%) случаев, в то время как 8/31 (26%) были недифференцированные раки. В общей сложности 14 из 31 случаев возник из Норвежской школы ветеринарных наук, а остальные 17 случаев возник из частных клиник
от пола был известен 19,489 опухолей больных собак. Распределение по полу представлено в таблице 2. ИЛИ для мужчин против женщин было 2,3 (P &ЛТ 0,02). Соотношение мужчин и женщин составляло 1,2: 1. Возраст на момент постановки диагноза опухоли желудка колебалась от 1 года до 13 лет, средний возраст 10 лет. В 17 из 31 случаев опухоль была оцифровываются гастроскопии. Остальные биопсии были проведены во время разведочных лапаротомий или во время трупов и установили. Желудочный расположение опухоли описано дл 19 случаев и была ограничена малой кривизны и /или пилорической в 18 случаях (95%). В одном случае (5%), опухоль наблюдалась в сердечной region.Table распределения 2 секс среди собак с раком желудка, записанная в норвежском собачьего регистра рака (1998-2009)
Случаи
Non-случаи
Общее
Мужчина
17 (0,25%)
6680 (99,75%)
6697
Female
14 (0,11% )
12778 (99,89%)
12792
31 (0,16%)
19456 (99,83%)
19 489
на основе справочных листов из представивших ветеринаром, клиническая информация была полученные для подмножества включенных случаев. Состояние питания был описан в 16 случаях, а также охарактеризовать как «ожирением» (1/16, 6%), «хороший /нормальный» (5/16; 31%), или «бедные /тонкие» (10/16; 63%). В 16 случаях клинические признаки были описаны. Все собаки испытали рвота (16/16; 100%), и haematemesis имели место только в 2/16 (13%) случаев. Анорексия наблюдалась у 6/16 (38%) случаев и потери веса в 5/16 (31%) случаев. Другие, реже описанные признаки были слюнотечение, вялость, понос, снижение общего состояния, боли в животе и полидипсия. Клинические признаки приведены в таблице 3. Продолжительность признаков, предшествующих биопсии или эвтаназии, как правило, описываемое в терминах "недели" или "месяца", но в 15 случаях было указано продолжительность и колебалась от 2 недель до 6 месяцев, с медиана 2 months.Table 3 Клинические признаки у собак с желудочным карцином, зарегистрированных в норвежском собачьего регистра рака (1998-2009) (п = 16)
Рвота
16
Анорексия
6 <бр> потеря веса страница 5 Haematemesis страница 2 Слюнотечение страница 2 Вялость страница 2 Снижение общего состояния страница 2 Мелена
1
боль в животе
1
Полидипсия
1
Таблица 4 показывает общее количество желудочного карцином и PMR с 95% ДИ по породе. Все образцы из Тервурене (п = 7) и Groenendael (п = 3) породы были диагностированы как аденокарциномы. Значение 1 представляет собой соотношение для средней породы. Размножается в котором 95% ДИ не включают в себя 1 рассматривались значительно увеличились (или уменьшения) риск рака желудка. Были найдены породы со значительно повышенным риском быть Тервурен, фландрский бувье, Groenendael, колли (грубая или гладкая, не указано), пудель, и норвежский elkhound.Table 4 Случаи карциномы желудка, опухолей и PMR породой, записанные в Норвежский собачий регистр рака (1998-2009) (п = 31)
порода
Желудочные карцином
Все опухоли в породе
PMR
<бр> 95% ДИ от низких
95% ДИ высокой
Тервурен
7
102
56,1
24,7
127,2
бувье Flandres
1
18
36.5
5.3
253.3
Groenendael
3
61
34.5
10.8
110.5
Collie
2
52
26.1
6.4
106.5
Standard пудель страница 3 из 273
7,6
2,3
25,0
Норвежский Elkhound страница 2 219
6.1
1.5
25,6
Нова Scotia утка толлинга retriever
1
118
5.5
0.8
40.3
Leonberger
1
124
5.3
0.7
38.3
Border колли
1 331
2,0
0,3
14,3
бишон мальков страница 2 434
3,1
0,7
12,8
Такса страница 2 534
2,5
0,6
10,4
Гордон сеттер страница 2 544
2,4
0,6
10,2
Ирландский сеттер
1 349
1,9
0,3
13,5
лабрадор
1 616
1,0
0,1
7,6
Немецкая овчарка
1
+1194
0,5
0,1
3,8
Английский сеттер
1
1407
0,4
0,1
3.2
Обсуждение <бр> в настоящем исследовании, 0,16% от всех собачьих опухолей, представленных в диагностической лаборатории патологии в норвежской школе ветеринарной науки в период с марта 1998 года по декабрь 2009 года были желудочных карцином. Эта пропорция соответствует тому, что Арнесен и др. (2001) обнаружили в своем исследовании норвежской собачьих рака регистра от 1990-1998 [1].
Breed предрасположенностью к карциноме желудка была обнаружена основана на PMR. Наибольший удельный вес рака желудка наблюдалось в Тервурене, бувье Фландрии, Groenendael, колли (грубая или гладкая не указан), стандартный пудель, и норвежский Elkhound. Тервурен был PMR 56, указывая, что эта порода в 56 раз больше шансов быть диагностирована с раком желудка, чем средняя порода в этой базе данных. Бельгийские овчарки разводят как четыре отдельных вида - Тервурене, Groenendal, Mallanois и Lakenois - но разведение между этими типами разрешается норвежским Бельгийская овчарка клуба (NBFK), когда определенные условия выполнены и с ограниченной частотой. Регистрация потомства определяется длины, цвета и структуры шерсти [24]. Даже несмотря на то четыре типа тесно связаны между собой, нет никаких сообщений о повышенный риск рака желудка в Mallanois или Lakenois. Неизвестно, связано ли это с Mallanois и Lakenois быть менее частые виды Бельгийская овчарка или есть ли другая распространенность между типами.
Бельгийские овчарки, как Groenendael и Тервюрен типы и грубые колли ранее были сообщается, что в группе повышенного риска развития рака желудка [3, 7, 8, 25]. Одиночные случаи рака желудка, ранее уже сообщалось в норвежском Elkhound, стандартный пудель и фландрский бувье [5, 6, 12], но данное исследование впервые, что эти породы были найдены, чтобы быть в опасности такого рода рак. В этом исследовании было обнаружено, что порода бувье Фландрский, имеют повышенный риск развития рака желудка, но широкий 95% ДИ для PMR делает результат неопределенным, и оно не может быть клинически значимым.
Стоит отметить, что породы боксер, ротвейлер, и телевизор с плоским покрытием ретривер не были в числе случаев рака желудка в нашем исследовании. Это все общие породы в Норвегии, и в предыдущих исследованиях, основанных на норвежском собачьих рака регистра они были зарегистрированы, чтобы иметь высокий относительный коэффициент риска (ОР) развития опухолей в целом [1]. База данных используется для текущего исследования включали 616 случаев опухоли у боксеров, 514 в ротвейлеров и 1,052 в плоских покрытых ретриверов. Еще одно интересное наблюдение является отсутствие смешанных пород среди случаев рака желудка, хотя есть 1,932 опухоли из смешанных пород в базе данных, что делает "смешанное" наиболее часто "породу". Несмотря на то что наиболее распространенным чистокровных собак в базе данных, с 1407 опухолями, английский сеттер представлен только с одного случая. Чау-чау и Стаффордширский бультерьер породы, ранее уже сообщалось, имеют повышенный риск развития рака желудка [3, 11]. были найдены Обе породы быть нечастым в базе данных, с 14 случаев опухолей в чау-чау и 22 случаев опухолей в стаффордширских бультерьеров в период 1998-2009 гг. Ни один из этих пород представлены в данном исследовании материала. Это может быть потому, что эти породы относительно редки в Норвегии, или что они имеют различный генетический состав по сравнению с собаками из одних и тех же пород в других странах.
Мужчины были найдены, чтобы иметь значительно более высокие шансы на рак желудка, чем у женщин в нашем исследовании , Этот вывод согласуется с результатами других исследований и подобное тому, что было описано в организме человека [2, 3, 6-10].
Все собаки с желудочной карциномы в настоящем исследовании, где клиническая информация была доступна, опытный рвота , Это, в сочетании с потерей веса и анорексией, были наиболее часто встречающимся клинические признаки. Полная клиническая симптоматика может быть занижены, как ветеринарные медицинские записи не была доступна для всех случаев. В ряде случаев «рвота» была сообщалось единственным клиническим признаком, так как это, вероятно, является основной причиной для диагностического обследования, даже если другие клинические признаки, возможно, присутствовал. Описанные клинические признаки в соответствии с тем, сообщалось в ранних работах [3, 5, 6, 8, 9].
Пород собак возникают из ограниченного числа предков и в сочетании с частым использованием популярных самцов, каждый из отечественной породы является изолированной популяции [26, 27]. Генетическое разнообразие внутри пород снижается, но существует большая генетическая дивергенция между породами [26]. Это делает выполнение генетических исследований собак легче, чем те, проводились в сложных популяциях. Собаки разделяют среды с их владельцами. Кроме того, так как они естественным образом развиваются спонтанных раковых заболеваний, в отличие от мышиных моделей, они представляют собой прекрасную модель для сравнительного рака [27]. Результаты исследования, выявление нескольких пород в группу риска, позволяют предположить, что генетическая предрасположенность имеет большее значение, чем у собак людей, которые испытали быстро снижается заболеваемость раком желудка в связи с недавними изменениями в окружающей среде [16]. Таким образом, собака может быть полезной моделью для дальнейших сравнительных генетических исследований рака желудка.
Если различия в способности ветеринаров диагностировать опухоль желудка и готовность владельцев собак продолжать и платить за диагностического обследования связаны с собака породы, они могут повлиять на результаты нашего исследования и быть источником смещения отбора. Недооценка может произойти в результате ложных отрицательных биопсий. Там также может быть недооценка распространенности рака желудка, как и поздних стадиях заболевания и возраст пораженного собаки может привести к владельцы не желая проводить дальнейшие диагностические исследования.
Силой настоящего исследования является использование ПМР оценить долю всех пораженных животных в популяции, которые имеют определенное заболевание под вопросом. Это позволило сравнению с фоном населением представленных случаев, в отличие от случая серии широко упоминаемой в ветеринарной литературе. Тем не менее, слабость PMR является его чувствительность к изменениям породы популярности и неопределенности в оценках, связанных с редкими породами. Это далее под влиянием низкой степени распространенности заболевания. Это может объяснить, почему некоторые породы описано выше, имеют более высокий риск не представлены в данном исследовании. Также возможно, что более обширное исследование было бы в состоянии обнаружить больше пород в группе повышенного риска среди норвежских собак.
В Норвежском собачьих рака регистра существует более высокая доля женщин, чем мужчин. Это, вероятно, из-за опухоли молочной железы доминирующим регистр, как сообщалось в предыдущих исследованиях [1]. Из 44 случаев, которые были диагностированы с раком желудка в норвежском собачьих рака регистра, 22,7% получили новый гистопатологические диагноз, когда они были пересмотрены в 2011 году доля случаев дали новый гистопатологическая диагноз соответствует тому, что в предыдущих исследованиях основанный на норвежском собачьих рака регистра [28].
породе предрасположение наблюдается в настоящем исследовании указывает на генетическую предрасположенность к карциноме желудка. Это в отличие от рака желудка у людей, которые в развитых странах значительно снизилась заболеваемость за последние 50 лет, в значительной степени обусловлено искоренении H пилори
инфекции [16]. Разумный интерпретация является то, что экологические факторы риска играют меньшую роль в развитии рака желудка у собак по сравнению с людьми.
Заключение
Доля случаев рака желудка, зарегистрированным в норвежском Canine рака регистра за период март 1998 в декабре 2009 года было установлено, что 0,16%. Порода предрасположенность к раку желудка была выявлена в исследовании, а именно Тервурене, бувье Фландрии, Groenendael, колли, пудель, и норвежский Elkhound было установлено, что значительно повышенный риск развития рака желудка в соответствии с пропорциональных соотношений заболеваемости (УПС).
Сокращения
PMR:
Пропорциональное соотношение заболеваемости
OR:
отношение шансов
CI :.
доверительный интервал
Заявления
Благодарности
авторы благодарят Норвежский Canine рака Зарегистрированные пользователи получают доступ к базе данных, а также Agria и научно-исследовательский фонд шведского клуба собаководства за финансовую поддержку .
конкурирующие интерес
Все авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов. вклад
авторов
СВХ участвовал в разработке дизайна исследования, подготовки данных из базы данных и выполнил статистический анализ и разработан проект рукопись. EJ принимал участие в разработке исследования и оценки всех гистологических слайдов. Принимал участие в разработке исследования, помогли со статистическим анализом и отредактировали рукопись. CB, ТГ и АМК участвовал в проектировании изучения и пересмотра рукописи. ES принимал участие в разработке исследования, собранные части данных и отредактировали рукопись. Все авторы прочитали и одобрили окончательный вариант рукописи.