The signalnih poti, ki so bistvenega pomena za želodčne organogenezo so proučevali v nekaterih podrobnostih; Vendar pa tisti, ki urejajo ohranjanje želodčne epitela v odrasli homeostaze ostajajo nejasne. V tej študiji smo raziskovali vlogo fibroblastnega rastnega faktorja 10 (FGF10) in njegovim glavnim receptorja, fibroblastnega rastnega faktorja receptorja 2b (FGFR2b), pri odraslih žleznega želodca homeostaze. Najprej smo pokazali, da miška odraslih žleznega želodca izrazil Fgf10 Navedba. Speer AL, Alam DA, Sala FG, Ford HR , Bellusci S, Grikscheit TC (2012) Fibroblastni Growth Factor 10-Fibroblastni Growth Factor Receptor 2b posredovana signalizacija ni potrebna za odrasle glandularnega želodca Homeostazo. PLoS ONE 7 (11): e49127. doi: 10,1371 /journal.pone.0049127 Urednik: Hemachandra Reddy, Oregon Health & Science University, Združene države Amerike Prejeto: 6. junij 2012; Sprejeto: 4. oktober 2012; Objavljeno: 1. november 2012 Copyright: © 2012 Speer et al. To je odprtega dostopa članek razširja pod pogoji Creative Commons Attribution License, ki omogoča neomejeno uporabo, distribucijo in razmnoževanje v katerem koli mediju, pod pogojem, da prvotni avtor in vir knjižijo Financiranje:. To delo so podprli: 1) Ethicon-društvo univerzitetnih kirurgov: Kirurški Research Fellowship Award, Allison L. Speer, http://www.susweb.org/mc/page.do?sitePageId=93045. 2) National Institutes of Health: 1R01HD052609-01A2, 5R01HD052609-02, 5R01HD052609-03, Saverio Bellusci in Henri R. Ford, http://projectreporter.nih.gov/project_info_history.cfm?aid=7426527&icde=12717266~~HEAD=pobj. 3) California Institute za regenerativno medicino: RN2-00946-1, Tracy C. Grikscheit, http://www.cirm.ca.gov/content/mechanism-tissue-engineered-small-intestine-formation~~HEAD=pobj. Med financerji imel nobene vloge pri oblikovanju študije, zbiranje in analizo podatkov, sklep, da se objavi, ali pripravi rokopisa nasprotujočimi si interesi. Avtorji Prebral politiko revije in imajo naslednje konflikt: SB trenutno služi kot urednik PLoS ONE. Avtorji želi potrditi, da to ne spremeni pripadnost avtorjev vseh PLoS ONE politike o izmenjavi podatkov in materialov. Adenokarcinom želodca je četrti najpogostejši rak in drugi najpogostejši vzrok smrti zaradi raka [1], po vsem svetu s celotno 5-letno relativno stopnjo preživetja v večini držav približno 20% [2]. Želodca nastanek raka se najpogosteje povezan z okužbo s H. pylori, ampak drugi dejavniki tveganja vključujejo prehransko porabo (vnos visoko sol in /ali pomanjkanje sadja in zelenjave), kot tudi afriško-ameriški etičnost in nizek socialno-ekonomskega statusa [3]. Parietalnih izguba celic, ali oxyntic atrofija, je najbolj zanesljiv preneoplastično korelat pri ljudeh. Izguba parietalnih celicah, ne glede na vzrok (okužbe z bakterijo Helicobacter ali farmakološkimi agentov), vodi v nadaljnji razvoj metaplazijo in jih je mogoče pospešiti s pomanjkanjem gastrin ali histamina [4], [5]. Pri ljudeh, lahko dve vrsti sluznične celične metaplazijo nastanejo kot posledica oxyntic atrofije: čašo celica intestinalna metaplazija (IM) ali spazmolitično-polipeptidne izražanje metaplazijo (SPEM) [4], [6]. fibroblastni rastni faktor (FGF), ježek, Preoblikovanje rastnega faktorja beta (TGFβ) /kostni morfogenetski protein (BMP), in NT signalne poti so pomembni in sorodnih morfogenezo omrežja, ki uravnavajo izvornih celic, zlasti v prebavnem traktu [7], [ ,,,0],8]. Te signalne poti so ključnega pomena v času razvoja zarodka, adult homeostaze, popravilo tkiva in regeneracijo ter rakotvornost. Definiranje vloge signalnih poti FGF10-FGFR2b v odrasli žleznega želodca homeostaze je prvi korak k razmejevanju celične mehanizme želodčnega epitela popravila in regeneracije po poškodbi. fibroblastni rastni dejavniki (FGF) igrajo ključno vlogo v celični proliferacija, diferenciacija, migracija in vnetje v različnih organih [8]. FGF se veže na enega ali več tirozin kinaza transmembranski FGF-ja receptorjev (FGFRs) [9]. Kot pri številnih drugih visoko ohranjenih signalnih poti, FGF signalizacijo ponavadi pojavijo pri parakrin način med epitela in mesenchyme s FGF ligandom izražen v tkivu, ki mejijo na njen odgovarjajoči FGFR (-e) [10]. Na primer, v želodcu organogenezo, Fgf10 smo že poročali, da je FGF10-FGFR2b posredovano signalizacija bistvenega pomena za organogeneze želodca [13], dvanajstnika [14], [15] je slepo črevo [16], [17] in debelega črevesa [18], [19], [20], pri miših. Debelega atrezija je bilo povezano z zmanjšanjem epitela orožja in povečanje epitela apoptoze v obeh Fgf10 - /- V tej študiji smo raziskali vlogo FGF10-FGFR2b signalizacijo med odraslo žleznega želodca homeostaza. Najprej smo dokazali prisotnost Fgf10 Izražanje Fgf10 da bi preučili izražanje Fgf10 določitev prostorsko izraz vzorec Fgf10 da bi raziskali vlogo FGF10 pri odraslih žleznega želodca homeostaze, smo ustvarili inducibilne dvojno transgenih heterozigotnega miši, ki povsod prekomerno Fgf10 Hematoxylin in eozin obarvanje odsekov nadzor littermate odraslih žleznega želodca je pokazala preprosto nosilni epitel organizirana v želodčnih žlez, ki vsebujejo številne parietalnih celic z veliko eozinofilnega citoplazmo, vodja celice na dnu žlez z bazofilna citoplazmo, basally nahajajo jeder in apical izločevalnih zrncih in sluznic vratu celic s sluzjo videli v beli barvi na apical odsekom celice v vratu žlez (Slika 2A). To histološke je bistveno spremenila v odraslih žleznega želodcu Fgf10 PODJETJA Ker je tudi ugotovljeno, da FGF10 spodbuja proliferacijo v številnih organih, vključno gastrointestinalnega trakta [13], [19], [20], [23], [24], smo analizirali širjenje želodčne epitela s PCNA imunskim barvanjem v kontrolnih littermates in mutirane miši. V primerjavi s kontrolno skupino littermate so mutant žleznih želodci so pokazale znatno povečanje širjenja epitela (14,7 ± 1,8% epitelnih celic PCNA pozitivni vs. 22,7 ± 2,6% v mutantov, p = 0,017, n = 5 za vsak genotip) (Slika 2D-F). Naši podatki pokazali, da prekomerna FGF10 spodbuja proliferacijo celic v epitela odraslih miške žleznega želodca. Da nadalje opredeliti vlogo FGF10 pri epitelijskega diferenciacije v odrasli žleznega želodca homeostaze, smo izvedli imunskim barvanjem za različne želodčne označevalcev epitelnih celic v mutirane in kontrolnih želodcev. Sluzničnih vratu celice v žleznega želodca so označene z lektin GSI-II, ki je bila vzpostavljena kot sluznice vratu celični označevalec [25] [26] [27]. Fgf10 intestinalno metaplazijo (IM) in spazmolitično-polipeptid izražanje metaplazijo (SPEM) sta metaplazija epitela želodca, ki se običajno razvije po akutna oxyntic atrofija in povzroči povečanje-sluz, ki izločajo celice: črevesnih Kelih celic v UI ali sluznic vratu celic v SPEM [32]. Trenutno je mislil, da je izguba parietalnih celic rezultatov v transdifferentiation zrelih glavnih celic poleg zaviranja normalne sluznice vratu celico diferenciacijo glavni celic [5], [21] [33]. Ker je mutant miših je pokazala podobno fenotipa z znatno izgubo parietalnih celic, povečanje sluznice vratu celic in zmanjšanje glavnih celic, smo skušali raziskati, če Fgf10 da bi ugotovili pomen signalne osi FGF10-FGFR2b v odrasli žleznega želodca homeostaze, smo ustvarili inducibilne dvojno transgenih heterozigotnega miši, ki povsod izrazijo prevladujoč negativni topno obliko Fgfr2b Hematoxylin in eozin obarvanje odsekov kontrolni littermate (slika 5A) in mutiranih (slika 5B) odraslih žleznega želodcev pokazala normalno histologijo z ustreznim arhitekturo želodčnega žleze ter jih bilo mogoče razlikovati od drugega. FGF10-FGFR2b posredovano signalizacijo Dokazano je, da je potrebno za epitela orožja tako med želodca in debelega razvoj [13], [19] [20]. Da bi ugotovili, ali je FGF10-FGFR2b signalizacija potrebna tudi za želodčne epitela orožja med homeostaze, imunskim barvanjem za PCNA je bila izvedena v kontrolni littermate (Slika 5D) in mutant (Slika 5E) odraslih žleznih želodcev. Ni bilo nobene razlike v hitrosti širjenja med nadzorom in mutanti littermate (16,5 ± 1,7% v primerjavi z 15,3 ± 1,5%, vrednost p = 0,313, n = 5 za vsak genotip) (slika 5F). Kot je bilo že dokazano, da je FGF10-FGFR2b signalizacijo ključnega pomena za epitelnega razlikovanje med želodčno organogenezo, zlasti za razvoj celičnega rodu parietalnih [13], smo skušali ugotoviti, ali je bila zahteva FGF10-FGFR2b posredovano signalizacijo za želodčni epitelijske diferenciacijo med homeostaze. Področja žleznega želodca pri R26 rtTA /+; tet (O) sFgfr2b /+ Ker je življenjska doba parietalnih celic je 54 dni [37], je potrebna dolgoročna študija za potrditev nepotrebnost FGF10-FGFR2b posredovano signalizacijo za diferenciacijo parietalnih celic pri odraslih žleznega želodca homeostaze. Za uresničitev tega smo povzroča povsod prekomerno prevladujočega-negativne sFgfr2b FGF10-FGFR2b posredovano signalizacija je bistvenega pomena za embrionalni razvoj želodčne [11], [13] [23]. Vendar pa je malo znanega o vlogi FGF10-FGFR2b signalizacijo pri vzdrževanju zrele želodčnega epitela. smo želeli razumeti FGF10-FGFR2b posredovanega signalizacijo med odraslo žleznega želodca homeostaze. Double transgenih miših, ki povsod izražajo Fgf10 Ugotovili smo, da je Fgf10 Več študije so priznane FGF10 kot promotor epitelnih orožja med sapnika [42], kolona [19], [20] in želodca [13], [23] razvoj kot tudi po rojstvu med mlečna žleza [36] in sekalec [35] homeostaze. Mnoge od teh opredelitev izgubo funkcije pristopa, kar kaže zmanjšala epitelne širjenja v Fgf10 - /- Poleg tega, FGF10 igra pomembno vlogo pri epitela diferenciacije Med razvoj številnih organov [13] [42] [43] [44]. Zlasti v želodcu organogenezo, izguba FGF10-FGFR2b posreduje rezultate signalnih v popolni odsotnosti parietalnih celic [13]. To pomeni, da je FGF10-FGFR2b posredovano signalizacija bistvenega pomena za razlikovanje parietalnih celic med razvojem želodcu, in še, je tudi Fgf10 endokrinega celice predstavljajo majhen, vendar heterogena populacija celic, ki izločajo različne hormone v želodcu epitela. Terminal endokrinih celic usoda se zdi, ne vpliva na izgubo FGF10-FGFR2b posredovano signalizacijo med razvojem [13]; Vendar ektopično Fgf10 FGF10-FGFR2b posredovana signalizacijo spodbuja glavni diferenciacijo celic med želodca organogenezo kar dokazuje zmanjšane številčnosti glavnih celic v Fgf10 - /- Znano je, da je FGF10-FGFR2b posredovano signalizacija ni potrebna za sluznice celične diferenciacije med želodcu razvoj [13], in smo ugotovili, enako bi bilo res v telesu. Vendar se je izkazalo FGF10 v predhodnih študijah bodisi inducira sluz izločajo število celic [24] ali premik lokacijo celic v želodcu žleze od lumen proti dnu žleze [11], [23]. Opazili smo tako pojavi v odrasli žleznega želodca homeostaze. Ta fenotip, skupaj z izgubo parietalnih celic, se pogosto opisuje kot "antralization" in je opaziti v želodčnih metaplazija, kot so UI in /ali SPEM. Izguba parietalnih celic, običajno za posledico metaplazijo [4], [32] [33]. Med tem procesom, glavni celice transdifferentiate z izgubo izraz MIST1 in pridobivanje izražanje CDX2 v IM ali TFF2 v SPEM [21], [33]. Morda je zmanjšanje števila glavnega celic v našem modelu je posledica transdifferentiation, vendar bi to zahtevalo dodatne preiskave za potrditev. Nismo prvi, ki opazujejo SPEM podoben fenotip v povezavi s FGF10 signalizacijo. Spencer-Dene et al. pokazala, da je nesorazmerno razvit antruma z razširjeno preprostim nerazvejenega želodčnega epitela za oba Fgf10 - /-
, njegove receptorje, Fgfr1b
in Fgfr2b
, in večina drugih FGFR2b ligande ( Fgf1, Fgf7 , Fgf22
), razen za Fgf3
in Fgf20
. Fgf10
izraz je mezenhimske medtem ko so FGFR1 in FGFR2 izraz večinoma epitelijskih. Študij dvojno transgenih miši, ki omogočajo inducibilne čezmerno Fgf10
pri odraslih miših, smo pokazali, da je Fgf10
prekomerno v normalnem odraslih žleznega želodca povečano epitelijska orožja, odpeljal sluznice diferenciacijo vratu celic, in zmanjšano parietalnih in diferenciacija glavni celic. Čeprav je podoben fenotip lahko povezana z razvojem metaplazijo, smo ugotovili, da je Fgf10
overexpression za kratek čas ne povzroča metaplazijo. Nazadnje, preiskovalni dvojno transgenih miši, ki omogočajo izražanje topne oblike Fgfr2b,
glavnega receptorja FGF10 je, ki deluje kot prevladujoča negativna, smo ugotovili nobenih bistvenih sprememb v želodcu epitela proliferacijo ali diferenciacijo mutantov. Naše delo predloži dokaze, prvič, da je FGF10-FGFR2b signalne poti ni potrebno za epitela proliferacijo in diferenciacijo med odrasle žleznega želodca homeostaze
Uvod
je izražena v mesenchyme, medtem ko je njen glavni receptor, Fgfr2IIIb
(v nadaljnjem besedilu: Fgfr2b
), ki je izražena v epitela [11 ], [12] [13].
in Fgfr2b - /-
miši [19], [ ,,,0],20]. V nasprotju z mesenchyme je bila nespremenjena v Fgf10 diferenciacija debelega epitela - /-
[20]. V času razvoja zarodka želodcu, tako Fgf10
in Fgfr2b
Knockouts je oslabljena epitelne orožja, ampak nasprotno dokazali hudo kompromis želodčnega epitela diferenciacije z odsotnost parietalnih celicah in zmanjša število glavnih celic [13 ]. Poleg tega, zunajmaternične čezmernim Fgf10
med razvojem želodcu pokazala tudi velike spremembe v epitela razlikovanja, vključno z zmanjšanjem parietalnih in endokrinih celic in povečanje glavnih celic [11]. Kljub tem začetnim opazovanj v razvoju prebavil, vloge FGF10-FGFR2b signalizacijo v želodcu v odrasli homeostaze še ni bila raziskana.
in njegove receptorje, Fgfr1b
in Fgfr2b
, pri odraslih žleznega želodca, skupaj z vsemi geni, ki kodirajo druge FGFR2b ligande ( FGF-1, -3, -7, -20, -22
). Preiskovalna dvojno transgenih miši, ki omogočajo Fgf10
prekomerno, smo pokazali, da je Fgf10
Čezmerno povečanje epitelijska orožja, vozi sluznice razlikovanje vratu celic in zmanjšuje parietalnih in glavni diferenciacijo celic v odrasli žleznega želodca homeostaze. Čeprav je izguba parietalnih celic in rasti celic, ki proizvajajo sluz lahko povezana z razvojem metaplazijo, mi ni bila odkrita nobena metaplazijo v našem Fgf10
čezmerno izraženim mutant miši, kot je prikazano z imunskim barvanjem za dva podrobno opisanih označevalcev od metaplazija: CDX2 (IM) [21] in HE4 (IM in SPEM) [6]. Končno, vseprisotno izraz prevladujočega negativnih topni obliki glavnega receptorja Fgfr2b
FGF10 je, ni pokazala bistvenih sprememb v želodcu epitela proliferacijo ali diferenciacijo v mutantov. Tako je ta študija kaže, da je FGF10-FGFR2b signalizacija ni potrebna za odrasle žleznega želodca homeostaze.
Rezultati
svoje receptorje, Fgfr1b in Fgfr2b
in druge FGFR2b ligandi v odraslih miške žleznega želodca
svoje receptorje, Fgfr1b
in Fgfr2b
in druge FGFR2b ligandi v odraslih žleznega želodca, smo izvedli RT-PCR na divji tip za odrasle miške žleznega želodca (n = 3). Oba receptorji so bili izraženi v odrasli žleznega želodca in pozitivno kontrolo divjega tipa E14.5 miši cel zarodkov (slika 1A). Geni, ki kodirajo vse ligandov zavezujočih FGFR2b ( Fgf1
, Fgf7
, Fgf10
, Fgf22
) so bili izraženi v odrasli žleznega želodca, razen za Fgf3
in Fgf20
, medtem ko so bili vsi šest izraženo v pozitivno kontrolo (slika 1A). RT negativne kontrole tako za odrasle žleznega želodca in pozitivni kontroli so bili negativni za Fgfr1b, Fgfr2b,
vseh FGFR2b ligandov, in β aktin
(slika 1A).
, smo izvedli β-galaktozidaze madeže na oddelkih za odrasle žleznega želodca s Fgf10 LacZ /+
novinar miših (n = 3), ki imajo bila predhodno potrjena [20], [22]. Ugotovili smo, da je je Fgf10
izraz prisoten v mesenchyme tik pod želodčnih žlez epitela (slika 1B). Negativne kontrole (divji tip Fgf10 + /+,
n = 3), niso pokazale LacZ madež (slika 1E). Za potrditev izražanje FGF10 receptorjev pri odraslih želodcu, smo izvedli imunohistokemija barvanje za FGFR1 in FGFR2 na divji tip za odrasle miške žleznega želodca (n = 3). Ker specifična protitelesa za IIIb izooblike teh receptorjev ni na voljo, so bile uporabljene protitelesa, ki reagirajo z obema izo IIIb in IIIc vsakega receptorja. IIIb izoforma se običajno izraža v epitela ker IIIc izooblika tipično izražena v mesenchyme. Oba FGFR1 in FGFR2 (slika 1C in 1D, v tem zaporedju) so bile ugotovljene z močnim imunskim barvanjem v želodčni epitela in šibkejšo obarvanje v mesenchyme. Naši negativne kontrole niso pokazali nobenega posebnega madež (slika 1F, 1G). Prisotnost Fgf10
in njegove receptorje v želodcu odraslih miške kaže na vlogo FGF10 v želodcu homeostaze. Zato domnevajo, da FGF10-FGFR2b signalizacijo v odrasli žleznega homeostaze, podobno kot v preteklih študij, je verjetno mezenhimske za epitelijskega signala.
Fgf10
prekomerno med homeostaze spremeni histologijo želodca žleze in povečuje epitelijskih orožja v žleznega želodca
( R26 rtTA /+; tet (O) Fgf10 /+
v nadaljevanju). Čezmerno Fgf10
bila povzročena z dovajanjem doksiciklin za odrasle (4 teden star) mutant miši in krmilni gnezda za 10 dni pred žrtvovali. Prevelike količine Fgf10
je potrdil QRT-PCR in mutantov je pokazala znatno povečanje izražanju Fgf10
primerjavi s kontrolno gnezda (slika 2c). Mutant miši običajno razvije videz mokre lase in očitno širjenje kožne epitela, vključno z otekanjem vek in neobičajno razširjene jezika.
povečano izražen mutant miših (slika 2B). Tam je bil viden padec v populaciji parietalnih celic, s povečanjem-sluz, ki izločajo celice in povezovanjem teh celic bližje dnu žleze (črne puščice).
želodca epitelijskega razlikovanje je pomembno spremenila Fgf10
prekomerno med homeostaze
prekomerno povzročilo primerjavi za nadzor gnezda (slika 3A) (14,4 ± 1,7% v primerjavi z 7,8 ± povečanje 85% odstotka sluznice vratu celic v želodčni epitela mutirane miši (slika 3B) 0,5%, p = 0,003, n = 5 za vsak genotip) (slika 3C). Poleg tega so bile pozitivne celice GS-II nahaja bližje dnu žlez v mutiranih miši v primerjavi s kontrolno skupino. To potrjuje naše histološke podatke, in kaže, da se lahko FGF10 spodbuja diferenciacijo sluznici vratu celične linije. Bistvene faktor (IF) imunoreaktivnosti načelnik celice v spodnjem delu želodca žlez. Čeprav je IF proizvaja in parietalnih celicah sprosti pri ljudeh, je uveljavljena označevalec glavnih celic pri glodalcih [21] [28] [29]. Naši rezultati so pokazali znatno zmanjšanje glavnih celic v želodcu epitela mutantov (Slika 3E) v primerjavi s kontrolo gnezda (slika 3D) (5,2 ± 1,4% v primerjavi s 12,4 ± 1,7%, p = 0,006, n = 5 za vsak genotip ) (Slika 3F). Chromogranin A je kislinska glikoprotein izražena v različnih vrst nevroendokrinih celic v celotnem gastrointestinalnega trakta, vključno z želodcem [11], [21], [30], [31]. V želodcu, chromogranin Izrazita majhno število epitelnih celic raztresene po vsej želodčnih žlez. Ugotovili smo, da ni značilnih razlik v odstotku endokrinih celic v želodcu epitela med mutanti (Slika 3 ure) in kontrole (Slika 3G) (1,0 ± 0,5% v primerjavi z 1,7 ± 0,3%, p = 0,11, n = 5 za vsak genotip ) (slika 3I). Številke 3J-K dokazati H /K ATPaze imunskim barvanjem parietalnih celicah v želodčni žleze. Je opazno zmanjšanje celične linije parietalnih (35% znižanje) v mutant (slika 3K) v primerjavi s kontrolno skupino (slika 3J), kot je prikazano na sliki 3L (23,2 ± 4,6% v primerjavi z 35,5 ± 4,3%, p = 0,044 n = 5 za vsak genotip). Ti podatki kažejo, da ima FGF10 vlogo pri diferenciaciji želodčnega epitela sluznične celice vratu, glavne celice, in parietalnih linij celic med odraslo žleznega želodca homeostaze. Fgf10
prekomerno ne le znatno spreminja število teh diferenciranih epitelnih celic vrste, kot je opisano zgoraj, pa tudi spremeni lokacijo sluzničnih vratu celic iz vratu na dnu želodca žleze.
Fgf10
prekomerno med homeostaze ne povzroča metaplazija želodčne epitela
čezmernim lahko povzroči metaplazijo. Da bi lahko potrdili, če je bil prisoten v naših mutiranih miši metaplazija, smo izvedli imunskim barvanjem dveh uveljavljenih označevalcev metaplazijo pri miših in ljudeh: CDX2 (IM) [21] in HE4 (IM in SPEM) [6]. Tako mutant (slika 4C) in nadzor littermate želodci (slika 4b) je pokazala zanemarljivo CDX2 madež v želodcu epitela (n = 3 za vsak genotip). Kolona služi kot pozitivno kontrolo in pokazali ustrezno jedrske obarvanje za CDX2 (slika 4A). Prav tako ni bilo mogoče zaznati HE4 obarvanje opazili v želodčni epitela mutantov (slika 4f) in kontrolami littermate (slika 4E) (n = 3 za vsako genotip). Človeški Obmodek služil kot pozitivno kontrolo in je viden citoplazemske barvanje za HE4 (Slika 4D). Ti rezultati kažejo, da je v želodcu epitelij čeprav je Fgf10
čezmernim lahko povzroči SPEM podobno fenotipa ne metaplastic.
FGF10-FGFR2b posredovano signalizacija ni potrebna za želodčne epitela proliferacijo in diferenciacijo med homeostaza
( R26 rtTA /+; tet (O) sFgfr2b /+
v nadaljevanju). Izražanje sFgfr2b
bila povzročena s hranjenjem doksiciklin za odrasle (4 tednov stari) mutiranih miši in kontrolnih littermates 1 mesec pred žrtvovati. Izraz sFgfr2b
v mutant miših je potrdil QRT-PCR. Kontrole so imeli skoraj nezaznavne količine sFgfr2b
, medtem ko so mutanti imeli spremenljivo, a trden izraz (slika 5C). Izražanje sFgfr2b
deluje v prevladujočem negativnem način z vezavo vse FGFR2b ligande (FGF-1, -3, -7, -10, -20, -22) in preprečevanje njihovega delovanja. To je bilo že potrjen v našem laboratoriju, kjer smo pokazali, da inducibilna izraz sFgfr2b
času razvoja zarodka phenocopied Fgfr2b - /-
zarodki [34], medtem ko z enim transgenih zarodkov, ki so izpostavljeni DOx in dvojno transgenih zarodki niso izpostavljeni DOx so enake zarodkov divjega tipa [35]. V nasprotju s hujšo obliko fenotipa, ko je FGFR2b inaktivirano med embriogenezo je poporodni izraz sFgfr2b
rezultati le v manjših napak, vključno z napako sekalcev, daljše kremplji in zmanjšana belega maščobnega tkiva [36].
mutant miši in nadzor gnezda so imunoreaktivnosti z oznakami za različne želodčne epitelijskih celic. Ni bilo nobene razlike v odstotku sluznice vratu celic (7,5 ± 0,8% v primerjavi z 8,0 ± 0,8%, p = 0,35, n = 5 za vsak genotip) (sliki 6A-C), glavnih celic (11,3 ± 1,6% v primerjavi z 12,2 ± 1,5%, p = 0,35, n = 5 za vsak genotip) (sliki 6D-F), endokrine celice (1,9 ± 0,3% v primerjavi s 2,4 ± 0,4%, p = 0,22, n = 5 za vsak genotip) (sliki 6G-I) ali parietalnih celicah v želodčni epitela (36,4 ± 2,7% v primerjavi z 37,7 ± 3,5%, p = 0,38, n = 5 za vsak genotip) (sliki 6J-K), med nadzorom littermate in mutant želodcev . Če povzamemo, ti rezultati kažejo, da se FGFR2b signalizacija ni potrebna za želodčne epitela proliferacijo in diferenciacijo med homeostaze.
z dovajanjem doksiciklin za odrasle (4 tednov stari) mutiranih miši in kontrolnih littermates 3 mesece pred žrtvovati. Izraz sFgfr2b
v mutant miših je bila bistveno višja od kontrol, kot je razvidno iz QRT-PCR (slika 7c). Hematoxylin in eozin obarvanje oddelkov kontrolne littermate (slika 7A) in mutiranih (Slika 7B) odraslih žleznega želodcev je pokazala normalno histologijo z vidnimi parietalnih celic. Ni bilo nobene razlike v odstotkih parietalnih celicah v želodčni epitela mutantov (slika 7e) v primerjavi s kontrolno skupino (slika 7a), kot je razvidno s H /K ATPaze imunskim barvanjem (37,9 ± 4,4% v primerjavi z 34,8 ± 1,9%, p- vrednost = 0,277, n = 3 za vsako genotip) (slika 7F). Ti rezultati potrjujejo, da je FGF10-FGFR2b posredovano signalizacija ni potrebna za razlikovanje parietalnih celic pri odraslih žleznega želodca homeostaze.
Pogovor
, prikazane povečala epitelne širjenja in bistveno spremenila razlikovanje treh od štirih epitelnih linije celic v želodcu. Vendar pa dvojno transgenih miših s prekomerno ekspresijo topno obliko Fgfr2b, glavnega receptorja FGF10 je, je pokazala, da je FGF10-FGFR2b signalizacija ni potrebna za epitela proliferacijo in diferenciacijo.
, njegove receptorje Fgfr1b
in Fgfr2b
, in večina drugih FGFR2b ligande ( FGF-1, -7, -22
), so bili prisotni v želodcu odraslih. Ti rezultati podpirajo izražanje teh genov v želodcu organogenezo pri miših [11] in piščančjih zarodkov [12], [23]. Kljub nekaterim razlikam v izražanju med miško in piščančjih zarodkov, želodčni izraz Fgf10
in njen glavni receptor Fgfr2b
še vedno ohranja med vrstami in tako so med razvojem in homeostaze. Glavni receptor za FGF10 je FGFR2b [38], [39] in inaktivacija Fgf10
ali Fgfr2b
in zarodkov miši vodi do izredno podobni fenotipov [34], [40], medtem ko FGF10 veže FGFR1b z nižjo afiniteto [41]. Vendar pa prisotnost obeh Fgfr1b
in Fgfr2b
, kot tudi nekatere od FGFR2b ligandov ( FGF-1, -7, -10,
in -22)
in odraslih želodcu lahko za nekatere resnične odpuščanja v FGF signalizacijo. Zagotovo izraz Fgf10
in njegova receptorja, Fgfr2b
v želodcu odraslih kažejo, da se FGF10-FGFR2b signalizacijo po rojstvu.
[13] [20] [42] in /ali Fgfr2b
- /- [13], [19] miši kot tudi pri transgenih miših, ki izražajo topen Fgfr2b
[35], [36]. Le dva prejšnje študije poročajo dobiček funkcije pristop podoben našemu, raziskuje učinke Fgf10
prekomerno v želodcu organogenezo, pri nasprotujočih si rezultatov [11], [23]. Shin sod. pokazale skromno povečanje žleznega epitelija orožja na piščančjih embrionalnih želodcu z virusno povzročene prekomerno Fgf10
primerjavi neokuženih kontrole [23]. Naši rezultati uskladi s temi rezultati v organogenezo čeprav preučujemo veliko pozneje točko, ko smo dokazati, da ima FGF10 na mitogeno učinek med odraslo želodčne homeostaze.
prekomerno v tem istem obdobju negativen učinek na parietalnih celic z zmanjšanjem 78% na E18. 5 [11]. Zanimivo je, da smo ugotovili, da je FGF10-FGFR2b posredovano signalizacija ni potrebna za razlikovanje parietalnih celic pri odraslih želodcu homeostaze, vendar Fgf10
prekomerno povzročil podobno zmanjšanje celične linije parietalnih ko pride med organogenezo. Tako, FGF10 na visoki ravni navzdol ureja diferenciacijo parietalnih celic tako med razvojem želodcu in homeostaze, ko pa je v želodcu organogeneza končana, se zdi, da je zanemarljiva za diferenciacijo parietalnih celic FGF10-FGFR2b posredovano signalizacijo.
Čezmerno posledico znatno zatiranje endokrinih celic rodu v [11]. Za razliko od teh razvojnih študijah, nismo upoštevali nobenih sprememb v diferenciaciji endokrinih celic na prekomerno bodisi Fgf10
ali topni Fgfr2b
med želodčne homeostaze.
in Fgfr2b - /-
E18.5 želodcev [13 ] in povečanje glavnih celic v želodcih z zunajmaternične Fgf10
prekomerno [11] v nasprotju s tem, smo opazili precejšnje zmanjšanje glavnih celic na Fgf10
prekomerno pri odraslih žleznega želodca homeostaze. Identificirali smo véliki celice z imunskim barvanjem za notranjo dejavnik in teh predhodnih študijah, obarvanih za pepsinogen [11], [13], vendar sta obe uveljavljeni označevalci glavnih celic pri miših [21], [28], [29], [45 ] in razlike v imunohistokemičnim barvanjem samo zdi malo verjetno, da se upošteva te ugotovitve. Možno je, da je med homeostaze Fgf10
ravni imelo škodljive učinke na glavnih celic, za razliko od razvojnih stopnjah.
in Fgfr2b - /-
zarodki kaže na vlogo FGF10-FGFR2b posredovano signalizacijo pri spodbujanju antralization [13]. Poleg tega čezmernim Fgf10
med razvojem želodcu povzročila SPEM podoben fenotip premik v lokalizacijo TFF2 mRNA pri miših in CSP mRNA v pišče, poleg zmanjšanja števila parietalnih celic pri miših [11], [23]. CSP je označevalec luminalne epitelnih celic v piščanca, analogni na sluzničnih vratu celic miši [8]. Nyeng sod. razmišljal, da bi antralization korpusa v svojem modelu mogoče razložiti z večjo razpoložljivost FGF10 v korpusu v primerjavi z običajnim naklonom Fgf10
izraz, ki je višja v antruma in nižje v korpusu [11] . To bi lahko pojasnilo SPEM podoben fenotip vidimo v homeostaze, pa tudi, ker je Fgf10
povsod prekomerno v našem modelu. Kljub Fgf10
prekomerno posledico SPEM podobno fenotip, uveljavljeni označevalci niso potrdili metaplazijo med homeostaze, kot je bilo podobno poročali med razvojem želodcu [11]. Zato ne moremo izključiti možnosti, da lahko FGF10-FGFR2b signalizacijo igrajo vlogo v želodcu metaplazijo.
Nova metoda računalniškega modeliranja napoveduje, kako se črevesni mikrobi spreminjajo skozi čas
Formula na osnovi kozjega mleka je dobra za zdravje črevesja dojenčkov
Kar jeste, lahko spremeni način, kako antibiotiki vplivajo na črevesje
Ali oznake na komercialnih izdelkih s kefirjem pravilno poročajo o mikrobni ravni?
Strategija pripravljenosti otroškega zdravstva na drugi val pandemije COVID-19
Podroben zemljevid mikrobioma človeškega jezika
Ljudje proti virusom - ali se lahko v bližnji prihodnosti izognemo izumrtju?
Strokovnjak trdi, da lahko spremembe okolja, ki jih povzroči človek, povzročijo nastanek patogenov, ne samo od zunaj, ampak tudi iz našega mikrobioma, ki lahko utira pot obsežnemu uničenju ljudi in ce
Metabarkodiranje DNA bi lahko izboljšalo analizo prehrane ljudi
Nova študija je pokazala, da metabarkodiranje DNA služi kot močno novo orodje za spremljanje človeškega vnosa rastlin, kar bi raziskovalcem lahko pomagalo bolje razumeti, kaj jemo in kako vpliva na čr
Sladkorna bolezen tipa 1 je povezana z črevesnim mikrobiomom in genetskimi dejavniki
Nova študija univerze Lingköping na Švedskem in univerze na Floridi je pokazala, da se črevesni mikrobiom otrok z visokim genetskim tveganjem za razvoj sladkorne bolezni tipa 1 bistveno razlikuje od o