A leptin receptor jelátvitel elengedhetetlen a magas zsírtartalmú étrend által kiváltott atrófiás gastritis a mice

leptin receptor jelátvitel elengedhetetlen a magas zsírtartalmú diéta okozta sorvadásos gyomorhurut egerekben katalógusa Abstract Background katalógusa katalógusa Az elhízás növeli a kockázatot a rosszindulatú daganatok különböző szövetekben, beleértve a gyomrot. Atrófiás gastritis rákmegelőző elváltozások egy elhízás-asszociált betegség; Azonban azok a mechanizmusok, amelyek hátterében a fejlesztési elhízás-asszociált atrófiás gasztritisz ismeretlen. A leptin egy hormon származó gyomor valamint a zsírszövet és a gyomor leptin részt vesz a gyomorrák kialakulásával. A cél a jelenlegi tanulmány célja, hogy vizsgálja meg a részvételét a leptin receptor jelátvitel a fejlesztés során atrophiás gastritis étrend okozta elhízás. Katalógusa módszerek katalógusa Hím C57BL /6, ob /ob katalógusa és db /db
egereket magas zsírtartalmú diéta (HFD) vagy egy kontroll étrendet (CD) 1 héttől 5 hónap. Kóros elváltozásai a gyomornyálkahártya és a kifejezés a molekulák társított sorvadásos gyomorhurut értékeltük ezekben az egerekben.
Eredménye
HFD etetés indukált gyomornyálkahártya hiperplázia megnövekedett gyomor leptin kifejezést. Nyálkahártya-hyperplasia kísérte nagyobb gyakorisággal Ki67 szaporodó sejtek és sorvadás a gyomor mirigyek a gyulladás, ami növelte következő HFD etetés. Aktiválása OBR jelzési-asszociált molekulák, például OBR, STAT3, Akt és ERK kimutatható volt a gyomor nyálkahártyáján egerekben a HFD 1 hétig. A morfológiai elváltozások társított gyomornyálkahártya-sorvadás és kifejezése MUC2 és Cdx2 hasonlítanak kapcsolódó humán intestinalis metaplasia. Ezzel szemben a vad típusú egerekben, leptin-hiányos ob /ob
egerek és a leptin-receptor-mutáns db /db
egerek nem mutatnak fokozott Cdx2 expressziót válaszul HFD etetés.
Következtetés
Együtt ezek az eredmények arra utalnak, hogy aktiválja a leptin jelátviteli a gyomorban van szükség, hogy fejlesszék az elhízással összefüggő sorvadásos gyomorhurut. katalógusa Kulcsszavak katalógusa leptin sorvadásos gyomorhurut magas zsírtartalmú étrend elhízás háttere katalógusa gyomorrák (GC) jellemzően akkor a háttérben az atrophiás gastritis, intestinalis metaplasia, és diszplázia a gyomor nyálkahártyáját, és a második vezető oka a rák összefüggő halálesetek világszerte [1]. Az elhízás növeli a kockázatot a magasabb prevalenciája gastritis [2, 3], sorvadásos gyomorhurut [4-6] és cardia adenocarcinoma [7-9]. Helicobacter pylori katalógusa, egy baktérium, amely megfertőzi az emberek és colonizes a gyomor, a domináns oka a rákot megelőző elváltozások a nyálkahártya bélés a gyomor [10]. Bár a H. pylori fertőzés katalógusa nem korlátozódik a kórosan elhízott betegeknél, elhízás növeli a gyakori krónikus gyomorhurut és GC [2]. Továbbá, az elhízás nem csak egy kockázati tényező a bizonyos tumorok, hanem az is jár fokozott halálozási arány [11]. Így az elhízás potenciálisan befolyásolja a fejlesztés a gastritis be gyomor tumorigenezis. Ezért rendkívül fontos, hogy azonosítani jelző molekulák egyaránt jár az elhízás és a rákmegelőző elváltozások, hogy segítse a menedzsment a magas kockázatú egyének.
Leptin, a termék az elhízott (ob katalógusa) gén, elsősorban elő adipociták és jár receptora (OBR) a hipotalamusz, hogy elnyomja a táplálékfelvételt és növeli az energia kiadások [12]. OBR tartozik a I. osztályú citokinreceptor-család, szerkezete nagymértékben homológ az, hogy a gp130, a közös szignáltranszdukciós receptora az interleukin-6 (IL-6) a citokinek családjába [13]. A hat alternatív splice variánsait OBR, csak a hosszú izoforma, ObRb, átalakítja egy jelet kaszkád, amely aktiválja a downstream Janus kináz 2 és jelátvivő és transzkripciós aktivátor 3 (JAK2-STAT3), foszfoinozitid-3-kináz (PI3K), és az extracelluláris szignál által szabályozott kináz 1/2 (ERK1 /2) [14]. Amellett, hogy a szerepe az energia homeosztázis, leptin fejt pleiotróp hatások angiogenezis, vérképzés, és immunitást is [14]. A leptin és OBR is expresszálódnak, a különböző szövetekben, beleértve a gyomor-bél traktusban [15]. Továbbá, a gyomor spontán kifejezni a leptin és OBR, ami a dúsítás leptin receptor jelátvitel a gyomorban során GC fejlesztés [16-18]. Korábban már kimutatták, a jelentősége a leptin jelzés a gyomorban és annak szerepe a fejlesztés a bél típusú gyomor tumor murin modell [19]. Diszfunkciója központi szimpatikus szabályozása leptin jelzés segíti a leptin rezisztencia. Annak ellenére, hogy a magas szintű keringő plazma leptin, elhízott egyének nem reagálnak az étvágycsökkentő hatást, jelezve azok a leptin rezisztencia [20]. Mivel a leptin fontos szerepet játszanak a gasztrointesztinális daganatok és kapcsolatot teremt az elhízás és tumorgenézisre [17], egy jobb megértéséhez a zavara gyomor leptin jelzés és szerepe az elhízás okozta gyomorfekély patológia szükséges. Katalógusa Módszerek
Állatok és étrendek
Hím C57BL /6J (vad típus: wt), ob /ob katalógusa, és db /db
egereket (CLEA Japán, Tokió, Japán) vizsgáltuk 7 hetes korban. Az állatokat egyenként helyezzük el műanyag ketrecekben, 24 ° C ± 1 ° C-fények 0600-1800 órán át. Az egereket ellátva vagy egy kontroll-diéta (CD, 10% -a zsírból származó kalóriát, D12450J), vagy magas zsírtartalmú diéta (HFD, 60% -a zsírból származó kalóriát, D12492) (Research Diets Inc., New Brunswick, NJ ) és vizet ad libitum katalógusa. Az etikai bizottság az állatkísérletek, a National Institute fiziológiai Sciences jóváhagyott minden állatkísérletekben.
Hisztopatológiai elemzése a gyomornyálkahártya
paraffinba ágyazott gyomor szakaszai 10% -os formalin-fixált szöveteket nyert HFD- és CD -fed egerek és megfestjük hematoxilinnel és eozinnal (H &E), és értékeljük változások a gyomor nyálkahártyáját. Az értékelés a nyálkahártya elváltozások a gyomorban alapult összegzése pontszámok hyperplasia (0, nem jelentős változtatás; 1, alacsony, 2, mérsékelt, 3, magas), sejtes beszűrődés (0, nem jelentős változása 1, alacsony, 2, mérsékelt, 3, magas), elvesztése gyomor mirigyes sejtek (0, nem lényeges változtatás, 4, alacsony, 5, közepes, 6, magas), alcián kék festéssel (0, nem lényeges változtatás, 4, fokális, 5, diffúz, 6, nagyon erős diffúz), és diszplázia (0, nem lényeges változtatás, 7, alacsony). Minden egyes kritérium volt függetlenül vak pontozással két magánszemély kritériumok, amelyeket korábban meghatározott [19]. Katalógusa Intragasztrikus pH mérés katalógusa gyomor pH-ja szerint mértük közzétett módszer [21]. Röviden, az egereket leöltük, miután érzéstelenítés által a szén-dioxid belégzéssel. Miután gyomor eltávolítása, a gyomor lumene eltávolítjuk, és mossuk, 0,5 ml fiziológiás sóoldattal (150 mM, pH = 7,0), és a pH az összegyűjtött gyomornedv mértük pH-mérő (Mettler, Toledo, OH).
Immunhisztokémiai analízis
paraffinba ágyazott 10% formalin-fixált szöveteket festettünk akár H &E, vagy periodikus-sav Schiff (PAS) és Alcian kék. Az antigén-visszanyerés, paraffint és rehidratált mintákat kezeltük 3% -os hidrogén-peroxid-metanolos, hogy blokkolja az endogén peroxidáz aktivitást, majd melegítjük, egy mikrohullámú alkalmazásával Retrievagen készlet (BD Biosciences, San Jose, CA), majd éjszakán át inkubáljuk a primer antitestek (ABS), 4 ° C-on felsorolt ​​kiegészítő fájl 1: táblázat S1. Ezt követően, a metszeteket megfestettük egy biotinilezett anti-nyúl-IgG vagy anti-kecske IgG Ab és sztreptavidin-jelzett peroxidáz segítségével Histofine SAB-PO készlet (Nichirei Biosciences Inc., Tokió, Japán) és a fejlett elő 3, 3'-diamino-benzidin (DAB) oldatot (ImmPact TM DAB, Vector Laboratories, Burlingame, CA) alkalmazásával a gyártó protokollja, majd hematoxilin counterstaining. Immunfluoreszcens festésének, a lemezeket inkubáltuk a primer ABS (Kiegészítő fájl 1: Táblázat S1), és ezután reagáltatjuk Alexa 488-konjugált nyúl vagy egér-IgG Ab vagy Alexa 556-konjugált kecske IgG Ab, értelemszerűen. A megfestett metszeteket szerelt alkalmazásával ProLong Arany Antifade reagenst 4 ', 6-diamino-2-fenil-(DAPI) (Life Technologies, Carlsbad, CA) kimutatására fluoreszcens mikroszkóppal (Olympus, Tokió, Japán).
Western blot analízis
gyomornyálkahártya sejteket izoláltunk, és elkészített egy módosítása szerint egy korábban publikált módszer [22]. Boncolt kis szegmense a gyomor kevertük szobahőmérsékleten 10 percig, egy Hank-féle kiegyensúlyozott sóoldat (HBSS) (Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA, USA) tápközegben, amely 1 mM DTT-t. Eltávolítása után a felülúszót, a szöveteket kevertük 37 ° C-on 10 percig HBSS, amely 10 mM EDTA-t. Eltávolítása után a felülúszót, a szövet szuszpenziót átengedjük egy nylon háló eltávolítására törmeléket és centrifugáljuk egy 25/40% nem folytonos Percoll (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO), gradiens 600 × g katalógusa 20 ° C-on 20 percig. A sejteket összegyűjtöttük a felület a 25/40% -a volt az epiteliális sejteket. Lizátumokat készítünk a szövetek és sejtek és analizáltuk Western-blot szerint a korábban közzétett módszer [23]. Az Abs használt Western blot -ról Kiegészítő fájl 1: Táblázat S1.
Laser-capture mikrodisszekció katalógusa A fent leírt paraffinba ágyazott gyomor szöveteket vágtuk 6-um vastag metszeteket és szereltek membrán csúszdák ( MembraneSlide 1.0 PEN, Carl Zeiss Mikroszkóp, LLC, Thornwood, NY). Paraffin eltávolítjuk öblítéssel a metszeteket xilollal, ami után a metszeteket merítjük egy sor 100% -ról 70% etanolt fürdők és levegőn szárítjuk. Nyálkahártyametszeteket gyomor- hámban vágtunk és gyűjtött rá AdhesiveCaps (tenyér, MICROLASER Technologies, Bernried, Németország) által a lézer-capture mikrodisszekcióban (LMD) rendszer (PALM MB-III, MICROLASER Technologies). Katalógusa kvantitatív reverz transzkripciós polimeráz lánc reakció (qRT-PCR)
az összes RNS-t a LMD mintákat és rágcsáló gyomornyálkahártya kivontuk AllPrep FFPE DNS /RNS és RNeasy Mini készlet (Qiagen, Valencia, CA), illetve szerint a gyártó protokollja szerint. cDNS-t szintetizáltunk körülbelül 100-200 ng RNS-t a LMD szakaszok vagy 1-2 ug RNS gyomornyálkahártya sejtek felhasználásával ReverTra Ace ® qPCR RT készlet (TOYOBO, Co., Ltd., Osaka, Japán) szerint a gyártó utasításai szerint. QRT-PCR-t végeztünk a Power SYBR Green PCR Master Mix (Life Technologies, Carlsbad, CA) specifikus primer készletek (400 nM, a végső koncentráció, További fájl 2: táblázat S2) szerint a gyártói protokoll. Relatív változása génexpresszió alkalmazásával számoltuk a ΔΔCt módszer, és a 18S rRNS gén használták normalizálás.
Mennyiségi elemzése immunhisztokémiai festéssel katalógusa mikroszkópos mérések, leptin-festett gyomornyálkahártya mintákat fényképezett segítségével mikroszkóp (Olympus ), és a mennyiségi analízist ImageJ szoftver (http: //RSB. info. NIH. gov /ij /index. html). Nyálkahártya magasság mértük között az alapja a gyomor mirigyek és a nyak zóna.
Plazma assay
szérumot összegyűjtöttük vérből nyert cardiocentesis alatt érzéstelenítés és -80 ° C-on. Inzulin (Mouse inzulin ELISA készlet, Shibayagi, Gunma, Japán), leptin (leptin ELISA, Millipore, St. Charles, MO), glükózt (glükóz CII-teszter, Wako, Osaka, Japán), és a nem-észterezett zsírsav (NEFA ) (NEFA C-teszt, Wako) szintje a szérumban mértük szerint a gyártók protokollokat.
Statisztikai analízis
a Mann-Whitney U
teszt és a Kruskal-Wallis tesztet használtunk annak meghatározására, jelentős különbségek. Egy p
-értéke kisebb, mint 0,05 értéket tekintettük szignifikánsnak. Statisztikai elemzéseket végeztünk Prism szoftverrel 6-os verzió (GraphPad, San Diego, CA, USA).
Eredmények
HFD táplált egerek fejleszteni atrófiás gasztritisz
Annak meghatározására, hogy milyen étrend indukálta elhízást befolyásolja a patogenezisében gyomornyálkahártya , C57BL /6 egereket vagy HFD (60% kalória zsírból) vagy CD (10% kalória zsírból), és a szövettani változások a gyomornyálkahártya vizsgáltuk idő-függő módon. Összehasonlítva a CD-táplált egerek, a HFD táplált egerek gyors súlygyarapodás ütemben > 2 g hetente az első 12 hétben. Ezt követően, egy mérsékelt növekedés 1 g hetente figyeltük meg 12-20 hetes (1A.). A szívizom nyálkahártya megmutatta hyperplasia 1 hetes, mielőtt bármilyen szignifikáns különbség a testsúlynövekedés a CD- és HFD táplált csoportban (1,5 ± 0,29 vs CD katalógusa. 1,8 ± 0,4 HFD, p katalógusa > 0,05) (1A. és 1b). 3 hetes, csökkentett parietális sejtek száma és morfológiai változások a foveola a gyomorban észleltek, majd mirigyes metaplázia és a teljes veszteség a zimogén és parietalis sejtek követő 12. héten megindítását HFD etetés (ábra. 1b). Bár a hyperplasiás változás a gyomor foveolar hám volt látható 1 héttel a HFD táplált egerek, kevés CD45 + beszivárgott sejtek voltak jelen HFD etetett egerek (ábra. 1b és 1d). Azonban 3 hét után az etetés, jelentős mennyiségű beszivárgott sejteket láthatóan megszállták a interglandular és bazális terek szerint a fejlesztés hyperplasia (ábra. 1b és 1d). Az antrum, enyhe nyálkahártya-hyperplasia volt kimutatható olyan HFD táplált egerek után 1 héttel diéta megindítását. Mind a cardia és antrum megjelenik egy helyettesítő normál mirigyes sejtek, például a parietális és a G-sejtek atípusos és szabálytalan sejtek 3 hét után a HFD etetés (ábra. 1b). Továbbá, enyhén diszpláziás hámban, a mutató sejtek kibővült atommagok nukleáris pseudostratification, és különálló nucleolusok, nyilvánvalóvá vált a hyperplasiás elváltozások HFD táplált egerek 12 hetes etetés után (ábra. 1c). Nagy gyakorisággal Ki67-pozitív proliferáló sejtek volt megfigyelhető a hiperpláziás és a diszpláziás gyomor elváltozások a HFD táplált egerek, mivel ezek a sejtek bemutatott egy meghatározott proliferáló zóna a CD-táplált egerek (ábra. 1E). Ezek a változások gyorsan fejlődött 8 hetes etetés (ábra. 2c). 20 hetes etetés, a redők a fényes gyomornyálkahártya lapos halvány megjelenés, és polip-szerű léziók figyeltünk meg a cardia és fundus régiói HFD táplált egerek (nyilak ábra. 2A). Ezen a ponton, a sejt infiltráció teljes volt, és a rendes gyomor mirigyek váltották bél kripta-szerű szerkezetek a kardiális bazális nyálkahártyáján HFD táplált egerek (ábra. 2b). Ezek az eredmények azt jelzik, hogy HFD-etetés megváltoztatja gyomornyálkahártya integritása még a korai fázisában a táplálkozási és azt sugallják, hogy az esemény a nyálkahártya-hiperplázia a gyomorban kezdeményezte gyulladás-független események. Ábra. 1 kóros elváltozásai gyomornyálkahártya miatt HFD-etetés. a megváltoztatása nyereség testtömegét C57BL /6 J egereknél CD (n katalógusa = 10) vagy HFD (n = 10 katalógusa) 20 héten keresztül. B reprezentatív H &E-szakaszok a cardia és antrum egerekből származó táplált CD vagy HFD 1, 3, és 12 héten keresztül. c kinagyított kép a gyomor antrum az egereknél CD és HFD látható. 1b követő 12. héten etetés (nagyítás, × 400). A sejt nukleolusszal nukleáris túltengés, dyspolarity és pseudostratification észleltek. d D45 festéssel a gyomornyálkahártya, 1 és 3 hét HFD táplált egerekben. e Ki67-festés a gyomornyálkahártya egerek táplált CD vagy HFD 3 hétig. 5-10 egeret használtunk minden egyes elemzése, és reprezentatív adatokat mutatjuk
ábra. 2. Fejlesztési gyomornyálkahártya sorvadás diétával indukált elhízott egerek. a A gyomor lumen nyitotta végig a külső görbület egereknél CD vagy HFD 20 hétig. Nyilak jelzik a polip-szerű elváltozások a gyomorban a HFD táplált egerekben. B reprezentatív H &E-szakaszok a cardia és antrum egerekből származó táplált CD vagy HFD 20 hétig. c A hisztológiai pontszámok a gyomor egerekben CD vagy HFD (< 3 hét, 4-8 hét, 8-20 hét etetés; 10 egér csoportonként) szerint osztályozzák a diagnosztikai kritériumok leírt módszerek. Eredmények analizáltuk a Kruskal-Wallis-teszt, majd egy Dunn-féle többszörös összehasonlító teszt. * P katalógusa < 0,05, ** p katalógusa < 0,01, NS; nem szignifikáns katalógusa felülszabályozása bél markerek gyomornyálkahártya katalógusa Azt is vizsgálta, hogy a gyomornyálkahártya HFD táplált egerek jellemzői bélnyálkahártyán. Megfigyeltük, hogy a gyakorisága Alcian Blue-val festett kehely sejtek, amelyek a bél nyálka sejtek fokozott ahogy elterjedt a gyomornyálkahártya HFD-táplált egerek (ábra. 3A). MUC2, bél típusú mucin, ben ectopiásan kifejezve a gyomornyálkahártya csak HFD táplált egerek (ábra. 3a), jelezve, hogy a gyomorsav mucin alakítottuk át a bél típusú, mint volt megfigyelhető a legtöbb emberi gyomor karcinóma [24]. Az eredmények a génexpressziós analízis összhangban voltak az immunhisztológiai megállapítások. A mRNS expressziója MUC2
és Tff3
(a peptid együtt expresszálva MUC2) növelte, míg az a gyomor-típusú mucinok, MUC1
, Muc5ac
, és Muc6
maradt változatlan vagy csökkent a gyomor HFD táplált egerek (ábra. 3b). A cardia a HFD táplált egerek is kimutatta, ectopiás expresszióját foszfolipáz A2 (PLA2), vékonybél Paneth sejt marker (3A.). Ezzel ellentétben, a kifejezés a H + K + - ATP-áz, a marker a parietális sejtek szekretálnak gyomorsav, csökkent egyidejű emelkedése gyomor pH-ját a HFD táplált egerek (ábra. 3a és 3c) . Ezen túlmenően, a deregulációja transzkripciós faktor expressziós ülteti be metaplasztikus fenotípus. Ennek megfelelően, az mRNS expressziója Cdx2 katalógusa, bél mester transzkripciós faktor, amely a marker a intestinalis metaplasia, magasabb volt a HFD táplált egerek 1 hét (ábra. 3e). Továbbá Cdx2
mRNS expressziója fokozott volt a gyomor nyálkahártyáján HFD-táplált egerek 12 hét, szemben, hogy a megfigyelt CD-táplált egerek, amelyben állandó volt (ábra. 3D és 3E). Összhangban a méhen kívüli Cdx2
mRNS expressziója, az mRNS Sox2 katalógusa, egy transzkripciós faktor, a gyomor organogenezis [25], jellemzően az downregulált, jelezve a fejlesztési intestinalis metaplasia a gyomornyálkahártya HFD etetett egereket ( ábra. 3e). Együttesen ezek az eredmények arra utalnak, hogy HFD etetés felgyorsítja intestinalis metaplasia. Ábra. 3 megváltoztatása bél jellemzőket a gyomor nyálkahártyáján HFD táplált egerekben. Gyomor festett metszeteken a PAS-alcián kék, MUC2, PLA2, és a H + K + ATP-áz (A), és Cdx2 (D) egerekben táplált CD vagy HFD 20 hétig. Génexpressziójának mucinok (B), és Cdx2
és Sox2
(E) a gyomor nyálkahártyájának az egerek táplált CD vagy HFD 1 12 hétig etetés után. Kihasználtuk 5-10 egér minden elemzés, és reprezentatív adatok jelennek meg. c A gyomor pH-ját a gyomor lumenbe szerint mértük a leírás biztosított az Methods. Az értékek az átlag ± SD-5 egerekben. Az eredményeket elemeztük a Kruskal-Wallis tesztet. * P katalógusa < 0,05
HFD etetés aktiválja korai leptin receptor jelátvitel során gyomor- bél-metaplázia
Mivel a korai morfológiai változások figyelhetők meg a gyomor nyálkahártya, megvizsgáltuk a gén expresszióját gyomor-specifikus hormonok, peptidek és enzimek után 1 héttel HFD etetés . A leptin mRNS expressziója különösen szignifikánsan magasabb volt a gyomorban a HFD táplált egerek; Ezzel szemben, a ghrelin expressziós alacsonyabb volt a HFD táplált egerek (ábra. 4A). A kifejezés más gének, mint például Atp4a
, Atp4b
PGA
, és PGC katalógusa, amely Kódolás H + K + - ATP-áz, pepszinogén A, és pepszinogén C , illetve nem mutatott szignifikáns különbséget CD- és HFD táplált egerek, bár a kifejezés a Atp4a
és Atp4b
csökkenő tendenciát mutatott (4a.). Normális esetben, a leptin expresszálódik vezető és parietális sejtekben [26, 27]; azonban HFD táplált egerek erős leptin kifejezést a hyperplasiás gyomor hámban (ábra. 4b és 4c). Annak ellenére, hogy a szérum leptin koncentráció hasonló volt a CD- és HFD táplált egerek 1 hét etetés után (ábra. 4d), a leptin expresszió a hyperplasiás régióban a gyomor összhangban volt a strukturális változásokat figyeltünk meg H &E festett szekciókban 1 hét (ábra. 1b). A leptin kifejezés tovább nőtt 12 héttel HFD etetés, ami után a kifejezés körülbelül visszanyert a megfigyelt szintet CD-táplált egerek 20 hetes (ábra. 4b és 4c). Egyidejű a magas leptin kifejezés 1 hetes, foszforilációját ObRb, STAT3, Akt, ERK, amelyek kapcsolódó molekulákon leptin receptor jelátvitel, kimutatható volt a gyomor nyálkahártyáján HFD táplált WT egerek (ábra. 5a). Ezek a molekulák maradt aktivált 4 héttel etetés után. Ezzel szemben, a leptin-hiányos ob /ob
és OBR mutált db /db
egerek nem mutatnak foszforilezett ObRb, és csak akkor mutatott enyhén aktivált STAT3, Akt és ERK. Alátámasztására érvényességét ezeket a megállapításokat, izotípus-kontroll Ab nem specifikusan reagálnak, és nem kifejezése p-ObRb mutattunk db /db egerek katalógusa (ábra. 5b és 5c). Ábra. 4 fokozása gyomor leptin kifejezés a korai időszakban a HFD etetés. egy génexpressziós a gyomor-specifikus molekulák 1 hét után, a CD és HFD etetés. b Gyomor festett metszeteken a leptin egerekben táplált CD vagy HFD 1, 12, és 20 hét. c számszerűsítése leptin expresszió (B). Az adatokat, mint a relatív expressziós minden egyes időpontban, hogy az expressziós szintet az antrumban CD-táplált egerek 1 hét után. d szérum leptin koncentráció egereknél CD és HFD 1 hétig. Az értékek olyan eszköz ± SD 5 egér. Az eredményeket analizáltuk a Mann-Whitney U
teszt. * P katalógusa < 0,05, ** p katalógusa < 0,01 katalógusa ábra. 5 felülszabályozása leptin receptor jelátviteli a gyomor nyálkahártyáján HFD táplált WT egerekben. Western-blot analízis a foszforilációját ObRb, STAT3, Akt és ERK1 /2, a gyomornyálkahártya WT, ob /ob
és a db /db
egerekben CD és HFD az 1. és 4. hét. Összesen 3 egereket alkalmaztunk mindegyik diéta csoport jutó kísérletben. Mindegyik kísérletet kétszer megismételjük, és a reprezentatív adatokat mutatjuk be. b Immunhisztokémia és a (C) Western-blot-analízise foszforilációját OBR a gyomornyálkahártya db /db
egerek és a WT egerekben CD vagy HFD 3 hétig. Kihasználtuk 3 egér minden elemzés, és reprezentatív adatok jelennek meg. A nyilak jelzik a foszforilált OBR-pozitív sejtek katalógusa krónikus gyulladás kiváltó sorvadásos gyomorhurut. Az IL-6 és IL-11, amelyek túlnyomórészt kifejezve a gyomorban, modulálják a gyulladásos válaszokat során daganatos progresszió [28, 29]. Különösen az IL-11 expresszió növekedését atrófiás gasztritisz és intesztinális metaplázia a fundus nyálkahártyából [30]. Hogy a potenciális iniciátorok intesztinális metaplázia, megvizsgáltuk expresszióját a leptin, az IL-6 és IL-11, a gyomor nyálkahártyáját. Mivel a leptin fejezték ki az 1 hét etetés után, az IL-6 katalógusa és Il11 katalógusa mRNS szintje nem emelkedik a cardia a HFD táplált egerek követő 3 héten diéta megindítását (6a.). 12 hét után, az IL-11 expresszió kísért megnövekedett számú CD45 + beszivárgott sejteket (6a. És 6b). Ezek az eredmények arra utalnak, hogy HFD-indukált leptin kifejezés és downstream aktiváció megelőzi az indukciós gyulladásos citokinek során intestinalis metaplasia. Ábra. 6. Késleltetett indukciója proinflammatorikus citokinek a gyomornyálkahártya után HFD-etetés. egy génexpressziós leptin, IL6 katalógusa, és Il11
a gyomor nyálkahártyáján CD- és HFD táplált egerek után 1, 3, és 12 héten keresztül. Az értékek olyan eszköz ± SD 4 egerekben. Az eredményeket elemeztük a Kruskal-Wallis tesztet. * P katalógusa < 0,05, p katalógusa < 0,01. b immunhisztológiai festést a gyomor szakaszok a CD és HFD táplált egerek Abs az IL-11 és CD45 katalógusa hiánya leptin jelzés elnyomja a gyomor-bélrendszerben metaplasia katalógusa HFD etetés aktivált leptin jelzés, ami intestinalis metaplasia WT egerekben . Ezzel szemben, a hiánya leptin jelzés ezért elnyomja HFD-indukált gyomor patológia. Annak vizsgálatára, a szerepe a leptin jelzés a fejlesztés a bél metaplázia, megvizsgáltuk a gyomor nyálkahártya változásai leptin-hiányos ob /ob
egerek és a leptin-receptor-mutáns db /db
egerekben. Az ob /ob
és a db /db
egerekben mutatott magasabb testsúlyt adott, mint tette WT egerek; azonban nincs szignifikáns különbség, ami a testtömeg között került CD- és HFD táplált egerek 1 hét etetés után (Plusz fájl 3: Ábra S1A). Az ob /ob
és a db /db
egerekben a CD 1 hétig mutattak hiperinzulinémia, mivel csak a HFD táplált ob /ob
egerek mutattak emelkedett inzulinszint. HFD táplált db /db
egerek inzulin szint hasonló a CD-Fed db /db
egerekben, mivel ezek az inzulin rezisztencia (Plusz fájl 3: ábra S1B). A db /db egerek katalógusa is kiállításra hyperleptinemia és hypergluconemia. Azonban a nem-észterezett zsírsav (NEFA) koncentráció nem változik között WT, ob /ob katalógusa, és db /db
egerekben akár CD vagy HFD (Plusz fájl 3: ábra S1B). A kórszövettani vizsgálat kimutatta, hogy míg a vad típusú egerek, ob /ob katalógusa és db /db egerek katalógusa hogy túlsúlyos és inzulin- vagy leptin- ellenálló megmutatta néhány morfológiai változások, mint például hyperplasia a gyomor nyálkahártya kardiális után 1 héttel megindítása HFD etetés (ábra. 7a). A nyálkahártya magasság elemzés összhangban volt a szövettani lelet (ábra. 7c). Továbbá immunhisztokémiai vizsgálatok során minden fokozott kolokalizációját Cdx2 és a leptin a gyomornyálkahártya WT egerekben a HFD 1 hétig (ábra. 8a), mivel a db /db
egerek nem mutatnak Cdx2 expressziót leptin-pozitív sejteket. Ezzel szemben az ob /ob
egerek mutattak kevés Cdx2, és nem a leptin kifejezés. Hasonlóképpen, az együttes lokalizációja foszforilált ObRb és Cdx2 volt kimutatható HFD táplált WT egerekben, de nem a HFD táplált ob /ob katalógusa vagy db /db
egerekben, amely azt mutatta, csak néhány foszforilációja ObRb vagy Cdx2, illetőleg. CD-táplált ob /ob és db /db egerekben mutatott drasztikus növekedése a testtömeg, de csak csekély hiperplázia a gyomor nyálkahártyájának összehasonlítva a WT egerek 3 hetes (ábra. 7b és 7c). Annak ellenére, hogy a magasabb testtömeg, ob /ob katalógusa és db /db egerekben katalógusa a HFD 3 hétig mutattak kevesebb hyperplasia, mint volt a WT egerekben a HFD 20 hétig. 20 hét után a HFD etetés, a WT egerekben bemutatta, szabálytalan olvasztott struktúrát a cardia (ábra. 7b). HFD etetés nem növelte a expresszióját Cdx2 és MUC2 a gyomornyálkahártya ob /ob
és a db /db
egerek (ábra. 8b). Ezek az eredmények azt sugallják, hogy a leptin jelzés a gyomorban egy fontos tényező, hogy vezet metaplasztikus patológia elhízással kapcsolatos gyomorhurut. Ábra. 7 Elnyomott megváltoztatását gyomor morfológia HFD táplált egerek mentes leptin jelzés. Reprezentatív H &E-szakaszok a gyomornyálkahártya WT, ob /ob
és a db /db
egerekben CD vagy HFD 1 (a) és 3 héten át (B). Minden érték a képek jelzi a testsúly, az egér, amelyből a gyomor nyálkahártya kaptuk, és megfestettük H &E-foltot. c mérése nyálkahártya magasság a gyomor fundus WT, ob /ob
és a db /db
egereknek 1 és 3 hét és WT egerek 20 hetes etetés után. Az értékek olyan eszköz ± SD 4 egerekben. Az eredményeket elemeztük a Kruskal-Wallis tesztet. * P katalógusa < 0,05, ** p katalógusa < 0,01 katalógusa ábra. 8 downregulációját bélhámsejtek markerek egerekben mentes leptin jelzés. egy Immunhisztológiai festés a gyomor szakaszok a CD-t és HFD táplált egerek Abs ellen leptin Cdx2, és a p-ObRb. b gén expressziója Cdx2
és a MUC2
a gyomornyálkahártya egerek táplált CD vagy HFD 1 hétig. Az értékek olyan eszköz ± SD 4 egerekben. Az eredményeket elemeztük a Kruskal-Wallis tesztet. * P katalógusa < 0.01 katalógusa Megbeszélés katalógusa Ez a tanulmány bemutatja az első bizonyítékokat az elméletet, hogy HFD-indukált fokozott leptin receptor jelátviteli gyomornyálkahártya okoz sorvadásos gyomorhurut egy rágcsáló modellben. Azt találtuk, hogy HFD etetés kiváltja leptin termelés és az aktiválás a leptin-OBR jelátvitel a gyomornyálkahártya, elősegítve atrófiás gasztritisz és intesztinális metaplázia. Mivel a nagyobb frekvenciájú gastritis elhízott betegeknél [31, 32], az eredmények alátámasztják a szerepe leptin receptor jelátvitel elhízás okozta sorvadásos gyomorhurut. H. pylori
fertőzés tekintik a fő oka a krónikus gastritis és GC [33, 34]; azonban nagyon kevés a H. pylori-fertőzött katalógusa betegnél GC [35]. Továbbá, a frekvencia a gastritis szignifikánsan magasabb a kórosan elhízott betegeknél, míg a gyakorisága a H. pylori katalógusa fertőzés hasonló elhízott és nem elhízott egyének [2]. Így, az elhízás fontos tényező elszámolása a prevalenciája szövettani gyomorhurut és az átalakulás a gyomornyálkahártya sejtek amellett, hogy a H. pylori
fertőzés.
Amellett, hogy a zsírszövet, a méhlepény [36] és emlőmirigyek [ ,,,0],37, 38] is termelnek leptin, amely támogatja a trofoblaszt sejtek szaporodását szabályozni magzat növekedését és fejlődését [39, 40], és a fejlesztés a tőgy, ill. Ezekben a szövetekben, leptin termelődik mind normál, mind a rosszindulatú sejtek, és annak overexpressziója igazolták neoplasztikus sejtekben [36, 41]. Minden szerző elolvasta és jóváhagyta a végleges kéziratot. Katalógusa

• Több elsődleges rosszindulatú daganatok járó primer sporadikus colorectalis rák Japán: előfordulása gyomorrák kolorektális rákban szenvedő betegeknél magasabb lehet, mint a korábban fel…
• A kockázatértékelés a gyomorrák kapcsolatos azbesztózis: egy esetismertetés