signalizacija receptora leptina je potreban za visoke masnoće dijeta-inducirana atrofični gastritis u mice

receptora leptina signalizacije je potreban za visoke masnoće dijeta-inducirana atrofični gastritis kod miševa
Sažetak
Pozadina
Pretilost povećava rizik za malignih bolesti u raznih tkiva, uključujući želuca. Atrofični gastritis s prekanceroznih lezija je bolest pretilost povezana s; Međutim, mehanizmi koji su temelj razvoja pretilosti povezan s atrofični gastritis su nepoznati. Leptin je hormon izveden iz želuca, kao i masnog tkiva i želučanom leptin je uključen u razvoj raka želuca. Cilj ovoga rada je istražiti uključenost signalizaciju leptin receptora u razvoju atrofični gastritis tijekom dijetom inducirane pretilosti. Pregled metoda
Muški C57BL /6, ob /ob pregled i db /db
miševi su hranjeni hranom s visokim udjelom masnoće (HFD) ili kontrolnom dijetom (CD) od 1 tjedna do 5 mjeseci. Patološke promjene u sluznicu želuca i ekspresije molekula povezanih s atrofičnog gastritisa su ispitani u tim miševima. Pregled Rezultati
HFD hranjenja induciranog želučanog sluznice hiperplazije povećane ekspresije leptina želuca. Mukozne hiperplazije bilo je popraćeno većom učestalošću Ki67-pozitivnih proliferacijom stanica i atrofija želučane žlijezde u prisutnosti upale, što je povećalo sljedeće HFD hranjenja. Aktivacija OBR molekula signalne povezana kao OBR, STAT3, Akt i ERK je otkriven u sluznici želuca u miševa hranjenih HFD 1 tjedan. Morfološke promjene povezane s želučanom mukozne atrofije i ekspresije Muc2 i CdX2 nalikuju one povezane s ljudskim intestinalne metaplazije. Za razliku od miševa divljeg tipa, leptin deficijentnih ob /ob miševa i pregled receptora leptina mutirane db /db miševi pregled ne pokazuju povećanu ekspresiju CdX2 odgovor na HFD hranjenja. Pregled Zaključak
zajedno ovi rezultati ukazuju na to da je potrebna aktivacija leptin signalnog puta u želucu za razvoj pretilosti povezane atrofičnog gastritisa. pregled Ključne riječi pregled leptin atrofičnog gastritisa visoke masnoće dijeta pretilosti Pozadina
karcinom želuca (GC) obično javlja na pozadini atrofični gastritis, crijevne metaplazije i displazije želučane sluznice, te je drugi vodeći uzrok smrti od raka povezanih svijetu [1]. Pretilost povećava rizik od visokog raširenosti gastritis [2, 3], atrofični gastritis [4-6], i želučanog cardia adenokarcinom [7-9]. Infekcije s Helicobacter pylori
, bakterija koja inficira ljude i kolonizira želuca, je glavni uzrok prekanceroznih lezija sluznice želuca [10]. Iako je H. pylori pregled infekcija nije ograničena na morbidno pretilo pacijenata, pretilost povećava učestalost kroničnog gastritisa i GC [2]. Osim toga, pretilost nije samo faktor rizika za određene vrste tumora, ali je također povezan s povećanom stopom smrtnosti [11]. Tako, debljina potencijalno utjecati na razvoj gastritisa u želučane tumorogenezom. Dakle, to je imperativ da se identificiraju signalnih molekula koje su povezane sa pretilošću i prekanceroznih lezija za pomoć u upravljanju visokim rizikom.
Leptin, proizvoda od pretilih (ob
) gena, prvenstveno proizvodi adipocite i djeluje na njegov receptor (Bra) u hipotalamusu potisnuti unos hrane i povećati potrošnju energije [12]. OBR pripada klasi I citokin obitelji receptora, a njegova struktura je visoko homologna za onom gp130, uobičajeni signala za receptor za interleukin-6 (IL-6) obitelji citokina [13]. Od šest alternativne varijante splice u Bra, samo duge izoforme, ObRb, prenosi signal kaskadu koja aktivira nizvodno Janus kinaze 2 i signal sondu i aktivator transkripcije 3 (JAK2-STAT3), fosfoinozitid 3-kinaze (PI3K) i ekstracelularnog kinaze signala regulirano 1/2 (ERK1 /2) [14]. Osim njene uloge u homeostazi energije leptin pokazuje pleiotropskim efektima na angiogenezu, hematopoeze, i otpornosti, kao i [14]. Leptin i Bra također su izraženi u različitim tkivima, uključujući probavni trakt [15]. Osim toga, želudac se spontano izraziti leptin i OBR, što dovodi do povećanja u signalizacije receptora leptina u želucu tijekom razvoja GC [16-18]. Mi smo ranije pokazali značaj leptina signalizaciju u želucu i njegovu ulogu u razvoju crijevni tipa želučani tumor pomoću mišji model [19]. Disfunkcije središnjeg simpatikusa regulaciju leptina signalizacije promiče otpornosti na leptin. Unatoč visokim razinama kruži leptina u plazmi, pretile osobe ne reagiraju na njegove učinke suzbija, što ukazuje na njihovu otpornost na leptin [20]. Budući da leptin je presudno za razvoj gastrointestinalnih zloćudnih bolesti i osigurava vezu između pretilosti i torn smjeru [17], bolje razumijevanje poremećajem regulacije želučane leptina signalizacije i njegova uloga u pretilosti inducirane želučane patologije je potrebno.
Metode
Životinje i dijeta
Muški C57BL /6J (divlji tip: WT), ob /ob pregled i db /db miševa pregled (CLEA Japan, Tokyo, Japan) ispitivani su na 7 tjedana starosti. Životinje su smještene pojedinačno u plastične kaveze na 24 ° C ± 1 ° C sa svjetlima od 0600 do 1800 sati. Miševi su dobili obje kontrole prehrani (CD, 10% kalorija iz masti, D12450J) ili s visokim udjelom masnoće dijeta (HFD, 60% kalorija iz masti, D12492) (Research Diets Inc., New Brunswick, NJ ) i voda ad libitum pregled. Etičko povjerenstvo za pokuse na životinjama iz Nacionalnog instituta za fiziološke znanosti odobrio sve pokuse na životinjama.
Histološki analizirati želučane sluznice pregled parafin-ugrađen želučani dijelova 10% formalinom fiksne tkiva dobiveni su iz HFD- i CD -fed miševa i obojene su s hematoksilinom i eozinom (H &E) i određuje se promjena u sluznicu želuca. Procjena sluznice promjena u želucu se temelji na zbrajanju bodova za hiperplazije (0, bez znatne promjene; ​​1, niska, 2, umjerena, 3, Visoko), stanične infiltracije (0, bez znatnog mijenjanja 1, niska; 2, umjerena; 3, visoka), gubitak želučanih žljezdane stanice (0, non-promena 4, niska 5, umjerena, 6, visoka), Alcian blue bojom (0, non-promena 4, žarišna 5, difuzna, 6, vrlo jaka difuzna) i displazija (0, non-znatna promjena, 7, niska). Svaki kriterij bio nezavisno slijepe zabio dva čovjeka koje koriste kriterije koji su prethodno definirane [19]. Pregled mjerenja unutaržclučanom pH
želučani pH se mjeri u skladu s objavljenim postupkom [21]. Ukratko, miševi su žrtvovani poslije anestezija inhalacijom ugljičnog dioksida. Nakon uklanjanja želuca, želučani lumen je uklonjen i ispran sa 0.5 ml otopine soli (150 mM, pH 7,0), a pH prikupljenih želučanu tekućinu je mjerena koristeći pH metar (Mettler Toledo, OH).
Imunohistokemijsku analizu pregled paraffin-embedded sekcije 10% formalinom fiksne tkiva su obojene ili sa H &E ili s povremenim kiselina Schiff (PAS) i Alcian blue. Za dohvat antigena deparafmizirani i rehidrirane uzorci su tretirane s 3% -tnim vodikovim peroksidom u metanolu radi blokiranja endogene peroksidaze, a zatim se grije u mikrovalnom upotrebom Retrievagen Komplet (BD Biosciences, San Jose, CA), nakon čega slijedi inkubiranje preko noći s primarnim antitijela (ABS) na 4 ° C, kao što je navedeno u dodatne datoteke 1: Tablica S1. Nakon toga, stakalca su obojene s biotiniliranim anti-zečjim IgG ili anti-kozjim IgG, i streptavidinom obilježenim peroksidazom pomoću Histofine SAB-PO kit (Nichirei Biosciences Inc., Tokyo, Japan) i razvijeni korištenjem 3, 3'-diaminobenzidin (DAB) otopine (ImmPact TM DAB, Vector Laboratories, Burlingame, CA) u skladu s uputama proizvođača, a potom hematoksilin counterstaining. Za imunofluorescencije bojanja, slajdovi su inkubirani s primarnim Abs (dodatne datotečne 1: Tablica S1), a zatim reagira s Alexa 488-konjugirane zeca ili mišjim IgG AB ili Alexa 556-kozji IgG Ab, prema potrebi. Obojeni stakalca su montirana pomoću produžiti Gold izbljeđivanja reagensa s 4 ', 6-diamidino-2-fenilindolom (DAPI) (Life Technologies, Carlsbad, CA) za detekciju pomoću fluorescencijskog mikroskopa (Olympus, Tokyo, Japan).
Zapadne analiza blot pregled želučanog epitela su izolirani i pripraviti u skladu s modifikacijom prije objavljenim postupkom [22]. Uklonjene male segmenti želudac se miješaju na sobnoj temperaturi 10 min u Hank-ovom uravnoteženoj otopini soli (HBSS) (Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA) mediju koji sadrži 1 mM DTT. Nakon odstranjivanja supernatanta, tkiva se miješa na 37 ° C tijekom 10 minuta u HBSS koji sadrži 10 mM EDTA. Nakon odstranjivanja supernatanta, suspenzija tkivo je propušten kroz najlonsko sito za uklanjanje otpada i centrifugira kroz diskontinuirano Percoll (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) gradijent 25/40% na 600 × g pregled na 20 ° C 20 min. Stanice se prikupljaju iz sučelje 25/40% su epitelne stanice. Lizati pripremljeni su iz tkiva i stanica i analizirani western blot analizom, prema ranije objavljenom metodom [23]. ABS koriste u zapadnoj upijajući sažeti su u dodatne datoteke 1: Tablica S1 pregled Laser-snimci Mikrodisek pregled od gore opisanih parafin-ugrađen želučani tkiva su izrezati na 6-um-debljim dijelovima i montira membranskih slajdove (. MembraneSlide 1,0 PEN, Carl Zeiss mikroskopija, LLC, thornwood, NY). Parafin je uklonjen ispiranjem odjeljke s ksilenom, a nakon toga su sekcije su uronjene u nizu od 100% do 70% etanol kupelji i suši na zraku. Sluznica dijelovi želučane sluznice su izrezali i uzima na AdhesiveCaps (Palm, Microlaser Technologies, Bernried Njemačka) laserskim-capture mikrodisekcijom (LMD) sustav (PALM MB-III, Microlaser Technologies). Pregled Kvantitativna reverzna transkripcija-lanca polimeraze reakcija (QRT-PCR) pregled Ukupna RNA iz uzoraka LMD i iz mišjeg želučanoj sluznici ekstrahira AllPrep FFPE DNA /RNA te RNeasy Mini kitova (Qiagen, Valencia, CA), odnosno, u skladu s protokolima proizvođača. cDNA sintetiziran je iz približno 100-200 ng RNA iz LMD odjeljaka ili 1-2 ug RNA iz želuca mukoznih stanica korištenjem ReverTra Ace ® qPCR RT Kit (Toyobo, Co., Ltd., Osaka, Japan) u skladu proizvođača protokol. QRT-PCR je provedena korištenjem Power SYBR Green PCR Master Mix (Life Technologies, Carlsbad, CA) s određenim primer setovima (400 Nm pri konačnoj koncentraciji, Dodatna datoteka 2: Tablica S2) prema protokolu proizvođača. Relativne promjene u ekspresiji gena izračunate su pomoću ΔΔCt metode i 18S rRNA gena se koristi za normalizaciju.
Kvantitativne analize su imunohistokemijski bojenje Netlogu Za mikroskopska mjerenja, leptin-obojenih uzoraka želučane sluznice fotografirana pomoću mikroskopa (Olympus ) i kvantitativna analiza provedena je pomoću ImageJ softver (http:... //RSB info NIH gov /ij /index html).. Mukozna visina je mjerena između osnovice želučanih žlijezda i zone u vratu, pregled Test Plazma pregled serum je sakupljen iz krvi dobivene kardiocentezom pod anestezija i pohranjena na -80 ° C. Inzulin (miš inzulin ELISA kit, Shibayagi, Gunma, Japan), leptin (Leptin ELISA, Millipore, St. Charles, MO), glukoza (glukoza CII-test, Wako, Osaka, Japan), i ne-esterificiranih masnih kiselina (NEFA ) (NEFA C-test, Wako) razina u serumu mjerene su prema protokolu proizvođača. pregled, Statistička analiza pregled Mann-Whitney u pregled, test i Kruskal-Wallis test korišteni su za određivanje značajno Razlike. P-vrijednost pregled manja od 0,05 smatra se značajnim. Statistička analiza je provedena pomoću Prism softver verzije 6 (GraphPad, San Diego, CA, USA). Pregled Rezultati
HFD-hranjeni miševi razvijaju atrofičnog gastritisa
Da biste odredili kako uzrokovane hranom pretilost utječe na patogenezu želučane sluznice , C57BL /6 miševi su hranjeni ili HFD (60% kalorija iz masti) ili CD (10% kalorija iz masti) i histološke promjene u sluznici želuca ispitane su na vremenski ovisan način. U usporedbi s CD-hranjene miševa, HFD-fed miševi izloženi brzo debljanje po stopi od > 2 g tjedno tijekom prvih 12 tjedana. Nakon toga, umjereni porast od 1 g po tjednu zabilježeno je od 12 do 20 tjedana (Sl. 1). Srčane sluznica pokazala hiperplazija na 1 tjedan, prije bilo kakve značajne razlike u tjelesnoj težini između CD-a i HFD-hranjenih grupa (1,5 ± 0,29 u CD vs Netlogu 1,8 ± 0,4 u HFD, str Netlogu >. 0,05) (Sl. 1A i 1B). 3 tjedna, smanjeni broj stanica i tjemeni morfoloških promjena foveola u želucu su promatrane, nakon čega slijedi žljezdanog metaplazijama i potpunim gubitkom zymogenic i parietalnim stanicama nakon 12 tjedana nakon početka HFD hranjenja (Sl. 1b). Iako je bio hiperpla promjena želučane foveolar epitela vidjeti na 1 tjedan u HFD-hranjene miševa, malo CD45 + uvukli stanice su prisutne u HFD-fed miševa (Sl. 1b i 1d). Međutim, nakon 3 tjedna hranjenja, znatnu količinu uvukle stanice su vidjeli da su napali interglandular i bazalnih prostore u skladu s razvojem hiperplazije (Sl. 1b i 1d). U antruma, blagi mukozne hiperplazije zabilježeno je u HFD-hranjene miševa na 1 tjedan nakon početka dijete. Oba kardija i antruma prikazana zamjenu normalnih žljezdane stanice kao što su parijetalni i G stanica s atipičnim i nepravilnih stanicama nakon 3 tjedna HFD hranjenje (Sl. 1b). Nadalje, blago displastični sluznica, sa stanice pokazuje povećani jezgre, nuklearni pseudostratification i različita jezgrama, postalo jasno u Hiperplastične promjene u HFD-hranjene miševa nakon 12 tjedana nakon hranjenja (sl. 1c). Visoka učestalost Ki67 pozitivnih proliferacijom stanica uočeno je u hiperplastičnih i displazije želuca lezije HFD-hranjene miševa, dok te stanice predstavila je definiran razmnožavanje zonu u CD-fed miševa (Sl. 1e). Ove promjene se brzo napredovala od 8 tjedana hranjenja (Sl. 2c). U 20 tjedana hranjenja, naborima sjajnom želučane sluznice su stan s blijedo izgleda, i polipa, kao što su lezije zabilježene su u kardija i fundusnih regijama HFD-hranjene miševa (strelica na Sl. 2a). U ovom trenutku, infiltracije stanica je završena, a normalne želučanih žlijezda zamijenjeni crijevnim kripti poput strukture na srčane bazalnog sluznici HFD-hranjenih miševa (sl. 2b). Ovi rezultati pokazuju da je HFD-hranjenje mijenja želučane epitela integriteta i u ranoj fazi hranjenja i sugeriraju da je pojava sluznice hiperplazije u želucu je inicirana sa upalom neovisna događaja. Sl. 1 Patološke promjene sluznice želuca nizacija HFD-hranjenja. Izmjena dobitaka u tjelesnim težinama C57BL /6 J miševi hranjeni CD (n pregled = 10) ili HFD (n pregled = 10) tijekom 20 tjedana. b predstavnik H &E-dijelovi želuca kardija i antruma od miševa hranjenih CD ili HFD za 1, 3 i 12 tjedana. c uvećani slika želučanog antruma u miševa hranili CD-a i HFD na slici. 1b 12 tjedana nakon hranjenja (uvećanja, × 400). Stanica jezgra je, nuklearna hipertrofija, dyspolarity i pseudostratification su primijećeni. d CD45 bojenje želučane sluznice od 1 i 3 tjedna HFD-hranjene miševa. e Ki67 mrlje u sluznici želuca u miševa dovodi CD ili HFD tijekom 3 tjedna. 5-10 miševa su korištene u svakoj analizi, te su i podaci se prikazuju pregled Sl. 2. Razvoj želučane sluznice atrofije u prehrani izazvanu pretilih miševa. I. lumenu želuca je otvorena duž vanjske zakrivljenosti miševa hranjenih CD ili HFD za 20 tjedana. Strelice označavaju polipa, kao što su lezije u želucu HFD-hranjene miševa. b predstavnik H &E-dijelovi želuca kardija i antruma od miševa hranjenih CD ili HFD za 20 tjedana. c Histološki rezultate iz želucima miševa hranjenih CD ili HFD (< 3 tjedna, 4-8 tjedna, 8-20 tjedana hranjenja, 10 miševa po skupini) su stupnjevane prema dijagnostičkim kriterijima opisanim u Postupcima. Rezultati su analizirani Kruskal-Wallis testa, nakon čega slijedi Dunnov višestruke usporedbe. * P izvoznici < 0,05, ** p izvoznici < 0,01, NS; nije značajan pregled pojačanu regulaciju crijevne markera u želučane sluznice pregled smo dodatno istražiti da li je želučana sluznica u HFD-hranjene miševa izložene značajke crijevne sluznice. Uočili smo da je učestalost Alcian blue-obojeni vrčastih stanica, koje su crijevne sluzi stanice, povećana jer su rasprostranjene želučane sluznice u HFD-hranjene miševa (sl. 3a). Muc2, crijevnog tipa mucina, ektopički izražena u želučanoj sluznici jedinog HFD-hranjenih miševa (Sl. 3a), što ukazuje da želučanoj sluzi se prevede crijevna tipa kao što je uočeno u većini ljudskih želučanim karcinomima [24]. Rezultati analize ekspresije gena bili su u skladu sa nalazima imunohistološkim. Ekspresija mRNA za Muc2 pregled i pregled Tff3 (peptid koekspresiji s Muc2) povećava, dok onaj od želuca tipa mucina, Muc1
, MUC5AC
i Muc6
, ostali nepromijenjen ili smanjen u želucima HFD-hranjene miševa (sl. 3b). Kardija od HFD-hranjene miševa također pokazala izvanmaterničnu izraz fosfolipaza A2 (PLA2), što je marker crijevna Paneth stanica (sl. 3a). Nasuprot tome, ekspresija H + K + - ATPaze, biljega parietalnim stanicama koje izlučuju želučane kiseline, smanjena uz istovremeni elevacije pH želuca u HFD hranjeni miševa (sl. 3a i 3c) , Osim toga, deregulacija faktora transkripcije ekspresije su preuzete u metaplastičnim fenotipom. Prema tome, izraz mRNK CdX2
, crijevne master transkripcijski faktor koji je marker za intestinalne metaplazije, bila je viša u HFD hranjeni miševa na 1 tjedna (Sl. 3e). Nadalje, CdX2 pregled mRNA ekspresija je povećan u želučanoj sluznici HFD hranjene miševa nakon 12 tjedana za razliku od one koja je opažena kod CD hranjeni miševa u kojoj je bila konstantna (Sl. 3d i 3e). U skladu s izvanmaternične CdX2 pregled ekspresije mRNA, mRNA SOX2 Netlogu, transkripcijski faktor za želudac organogeneze [25], skloni da se regulirani, što ukazuje na razvoj crijevne metaplazije u sluznici želuca u HFD-hranjene miševa ( sl. 3e). Uzeti zajedno, ovi rezultati upućuju na to da HFD-hranjenje ubrzava intestinalne metaplazije. Sl. 3. Izmjena crijevnih karakteristike u želučanoj sluznici HFD-hranjene miševa. Želučani sekcije bojane PAS-Alcian blue, Muc2, PLA2 i H + K + ATPaze (a) i (d) CdX2 kod miševa hranjenih CD ili HFD 20 tjedana. Genska ekspresija mucina (b), te CdX2 pregled i SOX2 pregled (e) u želučanoj sluznici miševa hranjenih CD ili HFD na 1 do 12 tjedana nakon hranjenja. Koristili smo 5-10 miševa u svakoj analizi, a prikazani su i podaci. c pH želuca u lumenu želuca izmjerena je u skladu s opisima koji su dani u Postupcima. Vrijednosti predstavljaju srednju vrijednost ± SD 5 miševa. Rezultati su analizirani Kruskal-Wallis test. * P izvoznici < 0.05 pregled HFD hranjenje aktivira signalizaciju rano receptora leptina u želudac intestinalne metaplazije Netlogu Zbog ranog morfoloških promjena uočenih u sluznici želuca, ispitali smo ekspresiju gena u trbuhu specifičnih hormona, peptide, i enzimi jedan tjedan nakon HFD hranjenja , Leptin mRNA posebno je značajno viša u želucu HFD-hranjene miševa; Nasuprot tome, grelin izraz lica bio je niži u HFD-hranjene miševa (Sl. 4a). Izraz drugih gena, kao što su Atp4a Netlogu, Atp4b Netlogu, PGA Netlogu i PGŽ Netlogu, koji kodiraju za H + K + - ATPaze, pepsinogen A, i pepsinogen C , odnosno, nisu pokazali značajne razlike između CD-a i HFD-hranjeni miševi, iako je izraz Atp4a Netlogu i Atp4b pregled opada (Sl. 4a). Normalno, leptin je izražena u glavnim i parijetalni stanice [26, 27]; Međutim, HFD-hranjeni miševi izloženi jak leptin izraz u hiperplastične želučane sluznice (Sl. 4b i 4c). Iako koncentracija leptina u serumu bila je slična CD-a i HFD hranjene miševa na 1 tjedan nakon hranjenja (slika 4d). Je leptin ekspresija u hiperplastične području želuca je u skladu s strukturne promjene primjećene u H &E obojenim sekcije u 1 tjedan (Sl. 1b). Izraz leptin i dalje u porastu do 12 tjedana poslije HFD hranjenja, nakon čega se izraz približno izvađenih na razinu promatrana u CD-fed miševima 20 tjedana (Sl. 4b i 4c). Istovremeno s visokim leptin ekspresije pri 1 tjedna fosforilacija ObRb, STAT3, Akt i ERK, koji su molekule povezane s signalizaciju receptora leptina, otkrivena je u želučanoj sluznici HFD napajani WT miševa (Sl. 5a). Te molekule ostali aktiviran nakon 4 tjedna, nakon hranjenja. Nasuprot tome, leptin deficijentnih ob /ob pregled i OBR mutirani db /db pregled miševi nisu pokazali fosforilirani ObRb, i samo neznatno izloženih aktiviran STAT3, Akt i ERK. U prilog valjanosti tih nalaza, Izotipski kontrola Ab nije reagirao konkretno i bez izraz p-ObRb je otkriven u db /db miševa pregled (sl. 5b i 5c). Sl. 4. Poboljšanje želučane leptina izražavanja u ranom razdoblju HFD hranjenja. gen ekspresija molekula želučanih specifična na 1 tjedan dana nakon CD-a HFD hranjenja. b Želučani sekcije bojane leptina u miševa hranjeni CD ili HFD za 1, 12 i 20 tjedana. c Kvantifikacija leptin ekspresiju u (b). Podaci su prikazani kao relativna ekspresije za svaku vremensku točku na razinu ekspresije u antrumu CD hranjene miševa nakon 1 tjedan. Koncentracija leptina d serum u miševa hranili CD-a i HFD za 1 tjedan. Vrijednosti predstavljaju srednju vrijednost ± SD 5 miševa. Rezultati su analizirani korištenjem Mann-Whitney U pregled test. * P izvoznici < 0,05, ** p izvoznici < 0.01 pregled slika. 5 ranijim koracima receptora leptina signalizacije u želučanoj sluznici HFD-fed WT miševa. Western blot analiza fosforilaciju STAT3, ObRb, Akt i ERK1 /2 u želučanoj sluznici WT, ob /ob pregled i db /db miševi hranjeni pregled CD i HFD za 1 do 4 tjedna. Ukupno 3 miševa su korištene u svakoj grupi dijeta po jednom eksperimentu. Svaki eksperiment je ponovljen dva puta te su prikazani i podaci. b Imunohistokemija i (c) Western blot analiza fosforilacije OBR u želučanoj sluznici db /db miševa i
WT miševa dovodi CD ili HFD 3 tjedna. Koristili smo 3 miševa u svakoj analizi, a prikazani su i podaci. Strelice pokazuju fosforiliran OBR-pozitivnih stanica pregled Kronična upala može pokrenuti atrofičnog gastritisa. IL-6 i IL-11, koji se pretežno eksprimira u želucu, moduliraju upalne reakcije tijekom neoplastične progresije [28, 29]. Osobito je, IL-11 ekspresije povećanja atrofičnog gastritisa i u intestinalnom metaplazije od fundusa sluznice [30]. Za identificiranje potencijalnih inicijatore intestinalne metaplazije, ispitali smo ekspresiju leptina, IL-6 i IL-11 u želučanoj sluznici. Dok leptin je izraženo na 1 tjedan dana nakon hranjenja, IL6 pregled i Il11 pregled razine mRNA nije povećala u želučanoj kardija od HFD-hranjene miševa do 3 tjedna nakon početka dijeta (Sl. 6a). U 12 tjedana, IL-11 ekspresija popraćena povećan broj CD45 + uvukli stanice (Sl. 6a i 6b). Ovi rezultati ukazuju na to da HFD-inducirana leptin izraz i nizvodno aktivaciju prethodi indukciju citokina tijekom intestinalne metaplazije. Sl. 6 Delayed indukciju proupalnih citokina u sluznici želuca nakon HFD hranjenjem. gen izraz leptina, IL6 Netlogu i Il11 Netlogu u želučanoj sluznici CD-a i HFD-hranjene miševa nakon 1, 3 i 12 tjedana. Vrijednosti predstavljaju srednju vrijednost ± SD 4 miševa. Rezultati su analizirani Kruskal-Wallis test. * P izvoznici < 0,05, p izvoznici < 0.01. b Imunohistokemijska bojenje dijelova želuca CD i HFD-hranjene miševa s ABS protiv IL-11 i CD45 pregled Nedostatak leptina signalizacije potiskuje želučane intestinalne metaplazije pregled HFD hranjenje aktivira signalizacija leptina, što dovodi do intestinalne metaplazije u WT miševa , Obrnuto, odsutnost signalizacija leptina stoga treba suzbiti HFD-induciranog želučanog patologije. Da bi istražili ulogu signalizacija leptina u razvoju intestinalne metaplazije, ispitali smo želučane sluznice promjene u leptina s manjkom ob /ob pregled miševi i receptora leptina mutirane db /db miševa pregled. OB /ob pregled i db /db pregled miševi pokazali veću tjelesnu težinu nego što su WT miševa; Međutim, postoji značajna razlika u tjelesnim težinama zabilježena je između CD-a i HFD-hranjene miševa na 1 tjedan nakon hranjenja (Dodatni datoteku 3: Slika S1a). OB /ob pregled i db /db miševa pregled hranjeni CD-a za 1 tjedan izložena hiperinzulinemije, dok je samo HFD-fed ob /ob pregled miševi su pokazali povećanu razinu inzulina. HFD-fed db /db pregled miševi pokazali razinu inzulina slične onima CD-fed db /db miševa pregled, zbog njihove otpornosti na inzulin (dodatne datotečne 3: Slika S1b). Db /db miševa pregled izlagao hyperleptinemia i hypergluconemia. Međutim, ne-esterificirani masne kiseline (NEFA) koncentracija nije razlikuju među WT, ob /ob pregled i db /db miševa pregled hranjeni s bilo CD ili HFD (dodatne datotečne 3: Slika S1b). Patohistološko analiza pokazala je da u odnosu na WT miševa, ob /ob pregled i db /db pregled miševa koji su bili debeli i inzulin ili leptin- otporni su pokazali nekoliko morfoloških promjena kao što su hiperplazija želučane sluznice srčane na 1 tjedan nakon iniciranje HFD hranjenja (sl. 7a). Mukozna analiza visine je u skladu s histološkim nalazima (Sl. 7C). Nadalje, imunohistokemijska analiza pokazuje povećanje povećanu ko-lokaliziranje od CdX2 i leptina u želučanoj sluznici WT miševa hranjenih HFD 1 tjedan (sl. 8a), a db /db pregled miševi nisu pokazali ekspresiju u CdX2 leptina-pozitivne stanice. Za razliku od toga, ob /ob pregled miševi su pokazali malo CdX2 i nema leptin izraz. Slično tome, ko-lokalizaciju fosforiliranog ObRb i CdX2 je otkriven u HFD napajani WT miševa, ali ne i u HFD hranjeni ob /ob pregled ili db /db miševa
, koji su pokazali samo neki fosforilaciju ObRb ili CdX2, odnosno. CD hranjena ob /ob i db /db miševi pokazuju drastično povećanje tjelesne težine, nego samo blagu hiperplaziju u sluznici želuca u odnosu na WT miševa 3 tjedna (Sl. 7b i 7c). Unatoč tome što ima veće tjelesne težine, ob /ob pregled i db /db miševa pregled nahranio HFD za 3 tjedna pokazuju manje hiperplazije poboljšanja nego WT miševa hranjenih HFD za 20 tjedana. Nakon 20 tjedana HFD hranjenja, WT miševi nepravilan i spojenog strukturu u kardija (sl. 7b). HFD hranjenje nije povećavaju ekspresiju CdX2 i Muc2 u želučanoj sluznici ob /ob
i db /db miševa
(Sl. 8b). Ovi rezultati sugeriraju da signalizacija leptina u želucu je važan faktor koji dovodi do metaplastičnim patologije u gastritis vezi s pretilosti. Sl. 7 Potisnut promjena želučane morfologije u HFD-hranjeni miševi lišen leptina signalizaciju. Predstavnik H &E presjeci želučane sluznice iz WT, ob /ob
i db /db miševa hranjenih
CD ili HFD za 1 (a) i 3 tjedna (b). Svaka vrijednost na slikama označava tjelesnu težinu miša od koje je dobivena sluznice želuca i obojeni s H &E-mrlja. c Mjerenje visine sluznice želuca u fundus WT, ob /ob pregled i db /db miševa pregled u 1 i 3 tjedna i WT miševa na 20 tjedana nakon hranjenja. Vrijednosti predstavljaju srednju vrijednost ± SD 4 miševa. Rezultati su analizirani Kruskal-Wallis test. * P izvoznici < 0,05, ** p izvoznici < 0.01 pregled slika. 8 regulacija crijevne epitelne markera u miševa lišenih leptina signalizaciju. Imunohistokemijska bojenje dijelova želuca CD i HFD-hranjene miševa s ABS protiv leptina, CdX2, i p-ObRb. b genske ekspresije CdX2
i Muc2
u sluznici želuca u miševa hranjenih CD ili HFD 1 tjedan. Vrijednosti predstavljaju srednju vrijednost ± SD 4 miševa. Rezultati su analizirani Kruskal-Wallis test. * P izvoznici < 0.01 pregled Rasprava pregled Ova studija predstavlja prvi dokaz koji podupire teoriju da HFD-inducirana pojačan signalizacija receptora leptina u sluznici želuca uzrokuje atrofičnog gastritisa u mišjem modelu. otkrili smo da HFD hranjenje aktivira proizvodnju leptin i aktivaciju leptin-OBR signalizacije na želučane sluznice, promoviranje atrofičnog gastritisa i intestinalne metaplazije. S obzirom na veća učestalost gastritisa kod pretilih pacijenata [31, 32], naši rezultati potkrijepiti ulogu signalizacije receptora leptina u pretilosti inducirane atrofični gastritis. H. pylori pregled, infekcija se smatra jedan od glavnih uzroka kroničnog gastritisa i GC [33, 34]; Međutim, vrlo malo H. pylori pregled -infected bolesnici razviju GC [35]. Osim toga, učestalost gastritis značajno je viša u morbidno pretilih bolesnika, dok je prevalencija H. pylori pregled infekcija je sličan kod gojaznih i ne-pretilih osoba [2]. Dakle, pretilost je važan čimbenik u objašnjavanju prevalencije histološki gastritis i transformacije želučane sluznice stanica pored H. pylori pregled infekcije.
Osim masnog tkiva, posteljica [36] i mliječne žlijezde [ ,,,0],37, 38] također proizvode leptin, koji podržava proliferaciju trofoblast stanica za regulaciju fetalni rast i razvoj [39, 40] i razvoj mliječne žlijezde, respektivno. U tim tkivima, leptin je proizveden u i normalnih i malignih stanica, a pojačana ekspresija je pokazano u neoplastičnim stanicama [36, 41]. Svi autori pročitali i odobrili konačnu rukopis. Pregled

• Više primarne maligne bolesti koje uključuju primarnu sporadično raka debelog crijeva u Japanu: incidencija karcinoma želuca s pacijentima kolorektalnog karcinoma može biti veća od prethodno pri…
• Procjena rizika od raka želuca povezane s azbestoze: prikaz slučaja