Plos ONE: IL-26 spodbuja proliferacijo in preživetje človeške želodčne raka celic z uravnavanjem ravnovesja STAT1 in stat3 aktiviranje

Povzetek

interlevkin-26 (IL-26), je eden izmed citokinov, ki jih Th17 celice, katerih vloga v človeških tumorjev ostaja neznan izločajo. Tukaj smo raziskovali izražanje in potencialno vlogo IL-26 v človeškega raka želodca (GC). Izražanje IL-26 in sorodnih molekul, kot so IL-20R1, STAT1 in stat3 bile pregledane z PCR v realnem času in immunohistochemisty. Učinki IL-26 na celično proliferacijo in-cisplatinom inducirane apoptoze smo analizirali s BrdU testom sodelovanja in PI-aneksin V sodelovanju barvanjem oz. Lentivirusni posredovana siRNA je bila uporabljena za raziskovanje njegov mehanizem delovanja, in s tem povezano 26-IL signalizacija je bila analizirana z zahodne blot. Človeški GC tkiva je pokazala povečana raven IL-26 in z njim povezanih molekul in aktiviranje stat3 signalizacijo, medtem ko aktivacija STAT1 bistveno ne razlikuje med GC in normalnih želodca tkiva. Poleg tega je IL-26 proizvaja predvsem Th17 in NK celic. IL-26 spodbuja širjenje in preživetje MKN45 in SGC-7901 želodčnih rakavih celic na način, ki je odvisen od odmerka. Poleg tega so IL-20R2 in IL-10R1, ki sta bistvena receptorji za IL-26 signalizacijo, izraženo v obeh celičnih linijah. IL-26 aktivira STAT1 in stat3 signalizacijo; Vendar pa Povecanje ekspresije Bcl-2, Bcl-XL in c-myc je pokazala, da je učinek IL-26, posredovano z aktivacijo stat3. Rasklapanje od STAT1 in stat3 izražanja predlagal, da se proliferativnih in anti-apoptotske učinke IL-26, posredovano z modulacijo STAT1 aktivacije /stat3. Če povzamemo, povišane ravni IL-26 v človeški GC spodbuja proliferacijo in preživetje s spreminjanjem STAT1 /stat3 signalizacijo

Navedba. Ti W, Tang Q, Zhang C, Wu J, Gu C, Wu Z, et al. (2013) IL-26 spodbuja proliferacijo in preživetje človeške želodčne rakavih celic z uravnavanjem ravnovesja STAT1 in stat3 aktiviranje. PLoS ONE 8 (5): e63588. doi: 10,1371 /journal.pone.0063588

Urednik: Salvatore V. Pizzo, Duke University Medical Center, Združene države Amerike

Prejeto: 11. oktober 2012; Sprejeto: 2. april 2013; Objavljeno: 21. maj 2013

Copyright: © 2013 ste et al. To je odprtega dostopa članek razširja pod pogoji Creative Commons Attribution License, ki omogoča neomejeno uporabo, distribucijo in razmnoževanje v katerem koli mediju, pod pogojem, da prvotni avtor in vir knjižijo

Financiranje:. To delo je podprta s sredstvi iz državnega Natural Science Foundation (81170415 za XC) in provinci Jiangsu je ključ deželne talente programom (RC2011079 za QT in RC2007056 za XC). Med financerji imel nobene vloge pri oblikovanju študije, zbiranje in analizo podatkov, sklep, da se objavi, ali pripravi rokopisa

nasprotujočimi si interesi.. Avtorji so izjavili, da ne obstajajo konkurenčni interesi

Uvod

rak želodca (GC) je drugi najpogostejši vzrok smrti zaradi raka na svetu. GC je težko celo zdraviti v zahodnih državah, saj se pogosto ne zazna še naprednih fazah bolezni [1]. Čeprav so številni dejavniki, povezane z razvojem in napredovanje GC, povezavo med kronično vnetje želodca, kot je atrofični gastritis s Helicobacter pylori in tveganja GC povzroča postalo jasno v zadnjih letih [2]. Kronično vnetje vodi do GC je dolg in zapleten proces, ki se odvija že več let in je značilna vnetne poškodbe želodčne sluznice,-citokinov povzroča DNA sinteze in celično proliferacijo, hiperplazijo in kancerogenosti [3].

The povezava med kroničnim vnetjem in imunskega sistema je bilo dobro raziskano in limfociti so glavne mediatorji-vnetje napredoval karcinogenezo [4]. Th17 celice so vrsta nov limfocitov T, ki izražajo RORγT in izločajo različne citokine, kot so IL-17A, IL-17F, IL-21, IL-22 in IL-26. Diferenciacija Th17 celic ureja več citokinov, vključno z IL-1β, IL-6, IL-23, tumorske nekroze faktor alfa (TNF-alfa) in preoblikuje rastnega faktorja beta (TGF-P) [5], [6] . Nedavne klinične študije so pokazale, da se Th17 celice lahko tesno povezana s H. pylori, povezane patologije in karcinogenezo GC [7], [8], [9], [10]. Čeprav so bile številne povezane Th17 citokini raziskano, je malo znanega o interlevkin-26 (IL-26) v odnosu do želodčnih tumorjev.

IL-26 je izločen protein, ki deluje bodisi kot monomera ali homodimer. To je bila prvotno opisal Knappe et al. [11] pod imenom AK155. IL-26 ima šibko vendar znatno sekvenčno homologijo za IL-10, in njegov kodirani protein torej član družine IL-10 citokinov, ki večinoma sodijo v citokinov družine razreda 2. IL-26 lahko izločajo primarnih celic T, NK celic in T celičnih klonov ter običajno sodeluje izražena z drugimi pomembnimi IL-povezane 10 citokinov, kot so IL-22 [12], [13]. IL-26 veže na kompleks izrazito receptorja celično površino, ki jo sestavljajo IL-20R1 in IL-10R2 verig in njene funkcionalne dejavnosti so drugačni od tistih, posredovano z IL-10. IL-20R1 deluje kot posebni ligandom za vezavo verige za IL-26 in IL-10R2 je bistven druga veriga dokončati sklop kompleksa aktivne receptorja. Nevtralizirajočih protiteles proti bodisi IL-20R1 ali IL-10R2 verigah lahko blokira indukcijo IL-26 signalizacijo [12]. Ko je v celoti sestavljen, kompleks receptor opravi prilagoditveno spremembo (-e), ki povzroča aktivacijo receptorjev povezana Janus tirozin kinaz, JAK1 in TYK2, in poznejše prehodno docking in fosforilacije stat proteinov, STAT1 in stat3 [14], [15 ].

Kot v zvezi Th17 citokinov, ni bila raziskana vloga IL-26 v tumorjih. Tukaj smo opisali morebitno vpletenost IL-26 v človeški GC prvič in raziskati svojo pro-preživetje in proliferacije učinke in vitro
.

Materiali in metode

Bolniki

To študijo je bilo vključenih 60 bolnikov z GC, ki so bili operirani od leta 2006 do 2009 na prvi odvisnimi bolnišnici Nanjing Medical University, Nanjing, provinci Jiangsu (tabela 1). Vsi poskusi so bili izvedeni v skladu z načeli, izraženimi v Helsinški deklaraciji. Pisnih obvestil soglasij za izražanje genov analiz so tkiva pridobljeni iz vseh bolnikih pred operacijo ali endoskopsko pregleda. Po protokolu in soglasje postopki študija so bili potrjeni na etiko prve odvisnimi bolnišnici Nanjing Medical University. Diagnoza in uprizoritev rakom želodca je bila izvedena v skladu z AJCC (TNM) izvajalno sistema.

Kvantitativna Real-time PCR

Povratne prepisu reakcije so bile izvedene z uporabo eksponent Prva sinteza traku sistem ( Invitrogen, CA) po obdelavi RNA predloge z DNaze I, da se prepreči onesnaženje genomsko DNA. Za določitev relativne ravni cDNA v obratnem prepisovati vzorcev je PCR v realnem času izvede z Roche LightCycler480 (Roche Diagnostics IN, ZDA), ki uporabljajo Temeljni premazi za IL-26, kot sledi: naprej, AAGCAACGATTCCAGAAGACC in nazaj, AAGTCCTCCACAAAGCGTATTTT z amplifier dolžina 175 bp. GAPDH smo uporabili kot kontrolo z naslednjimi primerji: naprej, AAGGTGAAGGTCGGAGTCAAC; nazaj, GGGGTCATTGATGGCAACAATA; ojačeno dolžina 102 bp. PCR reakcijo v realnem času je bila izvedena v skladu z navodili, vključenih v kompletu SYBR® krmil Ex Taq ™ (Takara, Japonska). Podatke smo normalizirali na ravni GAPDH v vzorcih.

ELISA

IL-26 koncentracija v serumu GC bolnikov in zdravih kontrolah smo merili z uporabo komercialno dostopnih sendvič ELISA seta (Biotang Inc., MA).

Western blot Analiza

Proteini so bili pridobljeni iz MKN45, SGC7901 in njihovo STAT1 in stat3 siRNA spremenjen celičnih linij in količinsko, z uporabo testa beljakovin (Bio-Rad Laboratories, CA). Vzorci beljakovinski (30 ug) frak s SDS-PAGE in prenesli na nitrocelulozno membrano. Imunoblot je bila izvedena s pomočjo protiteles proti IL-26, IL-20R1, IL-10R2, p-stat3 (S727), stat3, p-STAT1 (Y701), STAT1, Bcl-2, Bcl-XL, c-myc in a- tubulin (vsa kupljena od Abcam, MN). Rezultate smo prikazali z kemiluminescenčni sistem za zaznavanje (Pierce ECL Podlaga Western sistema za odkrivanje blot, Thermo Scientific, IL) in izpostavljenosti avtoradiografija filma (Kodak XAR film).

Imunohistokemija (IHC)

tkiva so bili zbrani in določeni v 4% paraformaldehid čez noč pri 4 ° C, obdelujejo, in narežemo na 5 mikrometrov debelih presekih. Imunohistokemijsko prekatov smo izvedli s protitelesi proti IL-26, IL-20R1, tehnike p-stat3 (S727) in p-STAT1 (Y701) s pomočjo prej opisane [16].

BrdU Cell Proliferation Vsebnost

kultivirane celice zasadimo na gostoto 1 x 10 ^{4 celic /vdolbino v 96-vdolbinami. Proliferacijo celic pri 0, 12, 24, 48, 60 in 72 h je bila ocenjena s pomočjo Preskusno proliferacije kompleta BrdU celic. Raztopina BrdU (Cell signalnih Technology, MA) smo dodali v vsako vdolbino v skladu z navodili proizvajalca za 12 h. Stopnja proliferacijo celic smo določili z merjenjem absorbance pri 450 nm z računalniškim nadzorom mikroplošči-bralnik.}

Izolacija in kulture človekovih GC prepojena levkocitov

Sveže tumorskih tkivih speremo dvakrat v RPMI 1640 . maščobne, smo odstranili veznega in nekrotične tkiva. Tkiva smo sesekljamo na 1-2 mm kosov v RPMI 1640, prenese v 15 ali 50 ml konične epruvete in inkubiranih pri trojni encim prebave medij, ki vsebuje DNaze (30 U /ml), hialuronidazo (0,1 mg /ml) in kolagenaze (1 mg /ml) 2 uri pri sobni temperaturi z blagim stresanjem. Tkiva smo ponovno suspendirali v 10 ml RPMI 1640 in filtrirali skozi celično cedilo 70-im (BD Pharmigen). Celice, ki jih cedilo ujeti damo v posamezne vdolbinice, ki vsebujejo 1 ml rastnega T-celičnega medija v 24 vdolbinicami za nadaljnji detekcijo citometrije toka.

Th17 in NK celice osamitev, Stimulacija in analizo toka citometrijo

Th17 celice smo dobili s vitro
stimulacija CD4 pozitivnih periferne krvi mononuklearnih celic (PBMC), ki so izolirali s pretočno citometrijo pod pogoji (20 ng /ml IL-1β, 20 ng /ml IL-6, 20 ng /ml IL-23, 5 ng /ml TGF-β, 5 ug /ml anti-IL-12 in 5 ug /ml anti-IL-4) je prej opisano [17]. NK celice so bili pridobljeni s pomočjo NK celic izolacijski komplet kupili od Miltenyi Biotec (Cat. 130-092-657). so se ohranili Th17 in NK celice in vitro
in spodbujena z 100 ng /ml LPS in H. pylori
lizati, v tem zaporedju, in analiziramo z intracelularno citokinov obarvanjem.

znotrajcelične citokinov obarvanjem, celice smo stimulirali pri 37 ° C 5 h z levkocitov aktivacijskim Cocktail a (BD Pharmingen). Celice smo nato obarvali z površinskih označevalcev, fiksni in permeabiliziramo z IntraPre Reagent (Beckman Coulter), in na koncu obarvali z znotrajceličnih označevalcev. Podatki so bili pridobljeni na FACSVantage SE in analizirali z Cellquest. Fluorokromom konjugiranih mAb proti IL-26, CD3, CD4, CD8, CD16, CD56 in RORγT so iz BD Pharmingen kupili.

Cisplatin povzročena Apoptoza in Flow citometrijo analiza

Analizirani celice smo gojili v kompletnem mediju z 1 ug /ml cisplatin 24 h. Celice so še dodatno analizirali s pretočno citometrijo (FACSCalibur ™, BD Biosciences, NJ). S pomočjo PI /aneksin obarvanje komplet (BD Biosciences)

siRNA Design in lentivirusom proizvodnje in pretvorniškim

siRNAs ciljanje STAT1 in stat3 so bili zasnovani in sintetizirali Genscript Co (Nanjing, Kitajska), kot sledi: siRNA ciljanje STAT1, GGACAAGGTTATGTGTATA; in siRNA ciljanje stat3, GGACATCAGCGGTAAGACC. V sintetiziranih siRNAs subkloniramo v lentivirusni vektor pLL3.7 s HAPI
in Xhol
(New England Biolab, Združeno kraljestvo), skupaj s kontrolnimi siRNA in imenovanih pLL3.7-cs, pLL3. 7-STAT1-SiRNA in pLL3.7-stat3-SiRNA. Rekombinantni lentivirusni smo ustvarili s 293T celic [16]. celične linije humanega GC MKN45 in SGC7901 smo nabavili pri Kaiji Biotech Co (Nanjing, Kitajska) in gojimo v Dulbeccovem modificiranem mediju Eagle stranke (DMEM), dopolnjenem z 10% fetalnega telečjega seruma, 100 U /ml penicilina in 100 U /ml streptomicina (Gibco , CA), ter transduciramo z lentivirusni uporabo polybrene (8 ug /ml).

Statistična analiza

Rezultati so izraženi kot povprečje ± SD v višini treh neodvisnih eksperimentov. Primerjave med skupinami so bile izvedene s testom Mann-Whitney U. Korelacija IL-26 izražanja in različnih kliničnih značilnosti smo analizirali s pomočjo Chi-kvadrat test. P vrednosti < 0,05 veljale za statistično značilne

Rezultati

1.. Povečana Aktiviranje IL-26 in sorodnih stat3 signaliziranje v humani Rak želodca

IL-26 izraz v človeškega raka želodca je bila preučena v 60 svežih tumorskih tkiv in seznanjenih sosednjih normalnih želodčne tkiv od 60 bolnikov GC. PCR v realnem času analiza pokazala pomembno prekomerno ekspresijo IL-26 mRNA v človeškem GC primerjavi z običajnimi želodčnega tkiva (P = 0,004 z Mann-Whitney testom U) (slika 1A). Serumu IL-26 nivoji so bili tudi pri bolnikih GC bistveno višja kot pri zdravih kontrolah (P = 0,0064 z Mann-Whitney testom U) (slika 1B). Poleg tega je analiza IL-26 proteinske ekspresije v 60 parafinski vdelana vzorcev tkiva pokazala pozitivno ekspresijo v 47 GC vzorcih in šibko pozitivni (n = 14) ali negativno (n = 46) izražanje v sosednjih normalnih tkivih. Pozitivni celice IL-26 so se v glavnem nahajajo v non-parenhimskih tkiv, ki so lahko sestavljene iz imunskih celic, ki obdajajo in razraščati v raka ali pri želodčnih tkiva. Poleg tega je količinska rezultatov IHC barvanje z Image-Pro Plus (ver 5.0) v petih naključno izbranih poljih na preparatu je pokazala, da je IL-26 izraz v GC tkivih bistveno višja kot v sosednjih normalnih tkivih (P = 0,0087 z Mann-Whitney U test). Zaznavanje in količinsko izražanje IL-20R1, receptor IL-26, je pokazala, da se je izrazil na precej višji ravni v človeški GC kot v normalnih tkivih (P = 0,0041, s testom Mann-Whitney U). Status aktivacija STAT1 in stat3, ki so pomembni za signalizacijo dejavniki IL-26 v smeri toka, smo raziskali z imunohistokemijo, z uporabo specifičnih protiteles proti fosforiliranih ostankov. Znatno povečanje p-stat3 (S727) je bila odkrita v GC tkiva, medtem ko ni bilo zaznati statistično značilne razlike pri p-STAT1 ravni (Y701) med človeškimi GC tkiv in normalnih tkivih (P = 0,0094 za stat3 in P = 0.392 za STAT1 z Mann-Whitney U test) (slika 1C, D).

Analiza korelacije med IL-26 izražanja in clinicopathological funkcije je pokazala statistično pomembne povezave med IL-26 izražanja in velikost tumorja in H . pylori
okužba (tabela 1).

2. Th17 in NK celice so glavni Cellular Viri IL-26 v humani Rak želodca

Celični viri IL-26, so primarne celice T, naravne morilec (NK celice) in T celic kloni po stimulaciji s specifičnimi antigeni ali mitogenih lektini [14]. Zato, da se opredeli vir IL-26 v človeškem GC, tumorske infiltracije levkocitov (TILS) smo izolirali iz 20 svežih vzorcev človeške GC tkiv in sodeluje obarvamo z različnimi oznakami. IL-26 ekspresija bil CD3 pozitivne celice (T celice) iz človeških GC TILS bistveno višja kot pri celicah T, ki izhajajo iz mono-jedrskega celice periferni krvi (PBMC) (16.52 ± 9,32% za T-TILS vs. 3,78 ± 2,91% pri T-PBMC, P < 0,0001), kar je v skladu z rezultati PCR v realnem času in IHC (slika 2A1, a2). Med celotnim številom celic T, 13,5 ± 3,71% CD4 pozitivnih T celic, izražene IL-26, medtem ko je bilo le 3,21 ± 2,61% od CD8 T celic pozitiven za IL-26 (Slika 2a3, a4). Poleg tega, co-obarvanje IL-26 s CD4 in RORγt, označevalec Th17 celic, so opazili, z 53,21 ± 16,82% od Th17 celic, ki izražajo IL-26 v človeške želodčne vzorcih raka (Slika 2a5, a6). Izražanje IL-26 v NK celicah, drugi pogosto poročali celično vir IL-26, smo analizirali z merjenjem števila CD3-, CD16 +, CD56 + celice sočasno barvanjem z IL-26, ki so pokazali, da 43.81 ± 19,44% od skupni NK celice izločajo IL-26 (Slika 2a7, A8). Skupaj, naši rezultati so pokazali, da so bili glavni celični viri IL-26 v človeški GC Th17 in NK celic in odstotek vsake komponente so povzeti v obliki diagrama (Slika 2a9 in a10).

nadaljnji preiskavi izločanje IL-26 v Th17 in NK celic, so PBMC zbrani iz 20 zdravih prostovoljcev in spodbudila pod Th17 polarizacijskih pogoji. Drugi glavni vir IL-26, NK celice smo dobili iz PBMC z uporabo komercialne izolacijsko kit človeškega NK. Značilnosti povzročene ali izoliranih Th17 in NK celic so bili preverjeni s znotrajceličnih citokinov barvanjem in dodatno analizirali z citometrije toka (Slika 2B1, b2). Spodbujanje Th17 in NK celic z LPS in H. pylori
lizati povzročilo znatno povečanje izločanje IL-26, kar kaže, da je IL-26 pomemben odziv citokinov pri raku želodca (slika 2C).

3. In vitro
Proliferacijsko in antiapoptozne Učinki IL-26

Učinek IL-26 je dodatno preiskali z nizom in vitro
študij izvaja v dveh človeških celične linije GC, MKN45 in SGC-7901. Učinek IL-26 na proliferacijo celic smo ocenili s BrdU incooperation testu v celicah, obdelanih z različnimi koncentracijami IL-26 (1, 10 in 50 ng /ml). ni bilo zaznati bistvenih razlik v celične proliferacije med neobdelanih celic in pri bolnikih, zdravljenih z 1 ng /ml IL-26. Vendar pa je stopnja celične proliferacije pri odzivu znatno poveča do 10 in 50 ng /ml IL-26 v primerjavi s tem v nezdravljenimi celicami (slika 3A). Poleg tega so ocene anti-apoptotske učinek IL-26, ki ga PI-AnnexinV sočasno obarvanje v celicah, obdelanih s cisplatinom s kemoterapijo drog za različnih časovnih vložki so pokazali, da je IL-26 močno anti-apoptotske učinek tudi pri dozi 1 ng /ml. Anti-apoptotični učinek poveča s povečanjem koncentracije IL-26 do 10 in 50 ng /ml (slika 3b1, B2). Ti rezultati so pokazali, da je IL-26 proliferacije in anti-apoptotične učinke na ljudi GC celičnih linij, kar delno pojasnjuje povezavo med IL-26 izražanja in v kliničnih študijah različnih kliničnih značilnosti. Vendar je treba osnovni molekularni mehanizem, ki jih je treba dodatno analizirati.

4. Proliferativni in Anti-apoptotske Učinki IL-26 so povezane z stat3 Activation

Prejšnje študije so pokazale, da se lahko veže na IL-26 na njegov receptor kompleksa povzroči hitro aktiviranje stat3 in v manjši meri, STAT1 [ ,,,0],12]. Zato smo najprej določili izraz kompleksa IL-26 receptorjev (IL-20R1 in IL-10R2) v MKN45 in SGC7901 celic in preverila, da sta bila oba receptorji prisotni v celičnih linijah GC za potrditev transdukcijo IL-26 signale bilo mogoče (slika 4A). Nato smo pregledali aktiviranje STAT1 in stat3 signalizacijo in pokazali, da fosforilacija ostanka S727 za stat3 in Y701 z STAT1 odgovor poveča na 10 ng /ml IL-26. IFN-γ (10 ng /ml) in IL-6 (30 ng /ml) so bile uporabljene kot kontrole za vklop STAT1 in stat3, oziroma (slika 4B). Na podlagi predhodnih študij, ki kažejo, da imajo STAT1 in stat3 signalne poti nasprotne učinke na tumorigeneze [18], smo raziskovali na nižji stopnji ciljev STAT1 in stat3 za nadaljnjo razjasnitev mehanizmov, na katerih temeljijo proliferacije in pro-preživetja učinke IL-26, ki jih posredujejo STAT1 in stat3 signalizacijo v celičnih linijah GC. Naši rezultati so pokazali, da IL-26 stimulacija molekul ekspresijo Bcl-2, Bcl-XL in c-myc, kar kaže, da ima IL-26 močnejši vpliv na aktivacijo stat3 kot na STAT1 signalne neposredno ali posredno (slika 4B). Ta rezultat tudi prispeva k našemu razumevanju pro-preživetje in proliferativnega učinka IL-26 v GC humanih celičnih linijah.

5. Tumor Spodbujanje Učinek IL-26 je Odvisno od STAT1 /stat3 Balance

Učinek IL-26 na ravnotežju med STAT1 in aktiviranje stat3 so raziskovali uporabo lentivirusni posredovano siRNA utišanje STAT1 in stat3 v MKN45 in SGC-7901 celice. Ustrezna siRNAs učinkovito navzdol regulirano ekspresijo STAT1 in stat3 v obeh celičnih linijah (slika 5A). Cell orožja je bila ocenjena z BrdU testom sodelovanja v nadzor siRNA transfekciji celic in STAT1 in stat3 siRNA celičnih linij obravnavajo GC gojijo v medijih, ki vsebujejo 10 ng /ml IL-26. Rasklapanje od stat3 izražanja znatno inhibira rast MKN45 in SGC-7901 celic, medtem ko je imel STAT1 razgradljiv nobenega vpliva na celično proliferacijo (slika 5B1, B2). Cisplatin inducirano apoptozo je bila ocenjena s PI-aneksinom V sodelovanju barvanjem v istih celic, vzdrževanih v mediju z 10 ng /ml IL-26, in rezultati so pokazali znatno zmanjšanje učinka pro-preživetja IL-26 v stat3 rasklapanje celicah , ker ni bilo statistično značilnih sprememb v stopnji apoptoze odkriti odgovor na STAT1 utišanje (Slika 5C1, C2). Ti rezultati so pokazali, da je IL-26 pro-preživetje in proliferacije učinke na celičnih linijah človeškega GC vsaj delno posredovanih s STAT1 /stat3 signalizacijo.

Pogovor

Prejšnje študije so pokazale, da je IL-26 co-izražena z drugim pomembnim citokinom povezanih IL-10, IL-22, ki se izloča tudi Th17 celic [19], [20]. Vendar pa izraz in vloga IL-26 v rakom pri ljudeh niso podrobno preiskati. Tukaj smo pregledali prvič ekspresijo IL-26 v humanih GC tkivih in pokazali, da so IL-26 in sorodne molekule, kot so IL-20R1 prekomerno v človeških GC tkivih.

IL-26 je co -expressed z IFN-y in IL-22 v človeških Th1 klonov, vendar ne v Th2 klonov. Poleg tega, IL-26 je co-izražena z IL-17 in IL-22, ki ga Th17 celic, pomembno podskupino CD4 + T-pomagalk celic, ki se razlikuje od Th1 in Th2 celic [12], [21]. V tej študiji je bilo ugotovljeno, IL-26, ki proizvaja predvsem CD4 pozitivnih T pomagalk celic v človeškem GC, med katerimi je skoraj polovica Th17 celice izločajo IL-26. Pregledali smo drugo možno celično vir, NK celice, ki so poročali, da so povezani z obsegom tumorja in razširjanje v človeški GC [22], [23] in je pokazala, da so bile celice NK tudi pomemben vir IL-26 proizvodnje. Naši rezultati podpirajo nedavni študiji, v kateri je bila ugotovljena nova podskupina CD56 + NKp44 + celicah NK co-izraža IL-22 in IL-26, zlasti kot odziv na zdravljenje z IL-23 [24]. Hughes et al
. opisano drugačno podskupino nezrelih NK celic, ki ne izražajo CD56 ali NKp44 vendar izraziti CD117 in CD161 in konstitutivno izrecno IL-22 in IL-26 [25]. Še več, naši rezultati so pokazali, prvič, da je IL-26 spodbuja proliferacijo GC celicami, ki vplivajo na ravnotežje STAT1 in aktivacije stat3, kar omogoča nove dokaze o odnosu med NK celic in volumen tumorja v človeški GC.

IL-26 so poročali, da signala preko kompleksa heterodimernega receptorja, ki ga sestavljajo IL-20R1 in IL-10R2 verig. IL-20R1 deluje kot posebni ligandom za vezavo verige za IL-26 in IL-10R2 funkcije kot bistven druge verige za dokončanje sklop kompleksa aktivne receptorja. Nevtralizacijskih protiteles proti bodisi IL-20R1 ali IL-10R2 verige so ovirati IL-26 signalizacijo. Ko je v celoti sestavljen, kompleks receptor opravi prilagoditveno spremembo (-e), ki povzroča aktivacijo receptorjev povezana Janus tirozin kinaz, JAK1 in TYK2, in posledično prehodno združevanje in fosforilacijo stat proteinov, STAT1 in stat3 [26], [27]. Kot eden izmed signalnih dejavnikov nadaljnjih IL-26, ki je stat3 najbolj pogosto povezana z tumorigeneze in se šteje tudi kot onkogena. Stat3, ki velja za stičišče številnih onkogenih signalnih poti, ki je konstitutivno aktivirana tako v tumorskih celicah in imunskih celic v tumorski mikrookolja [28] [29] [30]. Zlasti je aktivacija stat3 poročali v skoraj 70% trdnih in hematoloških tumorji, vključno z multiplim mielomom, več limfomi in levkemije, raka dojke, raka glave in vratu, raka prostate, raka jajčnikov, melanoma, ledvic karcinom, kolorektalni karcinom in priželjca epitelijskih tumorjev [31]. Stat3 je znano, da spodbujajo celično proliferacijo in angiogenezo in igrajo vlogo pri tumorski imunskem-sili, ampak tudi oslabi invazivnosti in metastatskega potenciala tumorjev. Naši rezultati so pokazali, da je stat3 aktivira v človeških GC tkiv in njegova aktivacija je lahko povezana s prekomerno IL-26 izločanja. Po drugi strani pa ni bilo zaznati bistvenih razlik v drugi podrejeno cilju IL-26, STAT1 med tumorja in sosednje normalnih tkivih. STAT1 in stat3 so mislili, da igrajo nasprotne vloge v tumorigeneze [18]. STAT1 ima zapleten nabor funkcij v obeh tumorskih celic in imunskega sistema in se običajno šteje kot zaviralnih zaradi svoje vloge pri zaviranju rasti in spodbujanju apoptoze [32].

Če povzamemo, smo pokazali, da IL -26 spodbuja rast celic in preprečuje apoptozo človeških želodčnih rakavih celic s spreminjanjem ravnotežje STAT1 /stat3 signalizacije, ki označuje-26 IL je lahko dragocen napovedni kazalec in terapevtski cilj, pri bolnikih z rakom želodca.

• Plos ONE: Kratkoročne Klinične posledice arterije Accessory Levi jeter Pri bolnikih z radikalne želodca za želodca Cancer
• Plos ONE: Enterococcus faecalis okužba povzroči vnetje, Znotrajcelične Oxphos-Independent ROS proizvodnje in DNA poškodbe v humani Rak želodca Cells