Plos ONE: Izražanje družine ESPG želodčnega raka: downregulation za HER4 in njenega Aktiviranje ligand NRG4

Povzetek

rakom želodca je glavni vzrok smrti zaradi raka pri moških in ženskah. faktor receptorje za epidermalni rastni so EGFR, HER2, HER3 in HER4. Štirih receptorji epidermalnega rastnega faktorja, EGFR in HER2 so dobro znani onkogeni sodelujejo pri raku želodca. Malo pa je znano o vlogi HER3 in HER4 imela v tej bolezni. Dobili smo združili vzorcev iz tumorja in sosednjih zdravih tkivih iz istega operacijo pacientu, pri katerem za rakom želodca. Uporabi RT-qPCR smo količinsko mRNA ekspresije štirih receptorjev, vključno s spajanje izoobliki HER4 in vse ligande aktiviranja teh receptorjev. Uporabi imunohistokemično je količinsko tudi protein izražanje HER4. Ugotovili smo, da je HER2 mRNA ekspresijo molekul v tumorskem tkivu primerjavi z ujemajočo normalnega tkiva (p = 0.0520). Vse ligande z afiniteto za EGFR so molekul, medtem ko je izraz EGFR nespremenjena. Zanimivo je, da smo našli mRNA ekspresije HER4 (p = 0,0002) in njegov ligand NRG4 (p = 0,0009), ki se navzdol reguliranih v tumorskem tkivu primerjavi z ujemajočo normalnega tkiva. HER4 downregulation je bila dokazana za vse izmenično spojeni izooblike tega receptorja. Ti rezultati podpirajo sodelovanje EGFR in HER2 pri raku želodca in kažejo zanimivo združenje zmanjšana ekspresija HER4 z razvojem raka želodca

Navedba. Nielsen TO, Friis-Hansen L, Poulsen SS, Federspiel B, Sorensen BS (2014) Izražanje družine ESPG želodčnega raka: downregulation za HER4 in njenega Aktiviranje Ligand NRG4. PLoS ONE 9 (4): e94606. doi: 10,1371 /journal.pone.0094606

Urednik: Rupesh Chaturvedi, Vanderbilt University School of Medicine, Združene države Amerike

Prejeto: 8. julij 2013; Sprejeto: 19. marec 2014; Objavljeno: 11. april 2014

Copyright: © 2014 Nielsen et al. To je odprtega dostopa članek razširja pod pogoji Creative Commons Attribution License, ki omogoča neomejeno uporabo, distribucijo in razmnoževanje v katerem koli mediju, pod pogojem, da prvotni avtor in vir knjižijo

Financiranje:. Danski raka društvo # R2-A247-09-S2, danski MRC #FSS 09072153. v financerji imel nobene vloge pri oblikovanju študije, zbiranje in analizo podatkov, sklep, da se objavi, ali pripravi rokopisa

nasprotujočimi si interesi. avtorji so izjavili, da ne obstajajo konkurenčni interesi.

Uvod

rak želodca je tretji najpogostejši vzrok smrti zaradi raka pri moških in peti glavni vzrok pri ženskah. Rak želodca je znašal približno 990.000 novih registriranih primerov in 738,000 smrti po vsem svetu v letu 2008 [1]. Okužba z Helicobacter pylori
, prehrana, kajenje in uživanje alkohola, so pomembni dejavniki, ki vplivajo na tveganje za raka želodca [2], [3].

faktor epidermalni rastni (ESPG) družina kompleksna mreža tirozin kinaze receptorjev in ligandi v stiku za sprožanje različnih signalnih kaskad. Družina vključuje štiri receptorjev EGFR (HER1), HER2 (ErbB2), HER3 (erbB3), in HER4 (erbB4) [4]. Alternativna spajanja je HER4 izražena v več izoform. V juxtamembraneous območju HER4, vključitev bodisi ekson 15b ali ekson 16 rezultatov v izoobliki Affairs ali JMB oziroma [5] - [7]. JMA izoforma in ne JMB izooblika se lahko obdelujejo za sprostitev topnih HER4 znotrajcelično domeno (ICD), ki lokalizira v citoplazmi, jedro in mitohondriji [8], [9]. Alternativni preplete v citoplazemske regiji HER4 povzroča izo CYT1 in CYT2. Preskoči eksona 26 rezultatov v receptorju (CYT2) manjkajočih 16 aminokislin receptorja polne dolžine (CYT1) [10].

ligandov družine ESPG so epidermalni rastni faktor (EGF), preoblikovanje rastnega faktorja-a (TGF-a) in amphiregulina (AR), ki so specifični za EGFR; heparin-vezavo EGF podobnega rastnega faktorja (HB-EGF), betacelulina (BTC), in epiregulin (EPR), ki se veže tako EGFR in HER4; nevregulina 1 (NRG1) in NRG2, ki veže tako HER3 in HER4; in končno NRG3 in NRG4, ki so specifični za HER4 [11]. Pri povezovanju aktivacijske ligand, receptorji da homo- in hetero-dimere. Sestava dimerizacijo partnerjev in aktiviranja ligandov določa signal, ki transducirajo znotraj celic [12], [13]. Družina EGFR igra različne vloge pri rasti in vzdrževanju številnih tkiv, med drugim z regulacijo celične delitve, apoptozo, diferenciacije in migracije. Deregulacija signalizacijo iz tega sistema je povezano z razvojem in rastjo raka [14] - [17]

EGFR in HER2 so dobro znani onkogeni pri raku želodca [18], [19].. HER2 inhibicijo trastuzumab protitelesa uspešno izboljša prognozo, kadar so dodani kemoterapije pri bolnikih z naprednimi želodca raka HER2-pozitivnega [20]. Število kliničnih preskušanj so opravili tudi testiranje uporabnosti zaviralcev EGFR rakom želodca [21], [22]. HER3 in HER4 bi lahko pomembna tudi pri etiologiji raka želodca; Vendar pa informacije o njihovih vlogah pri tej bolezni je malo. Dejansko je malo znanega o ekspresijskega vzorca celotnega sistema ESPG. Zaradi interaktivne narave receptorjev in ligandi ESPG, razjasnitev mehanizmov za regulacijo ESPG družinskih članov zahtev upoštevajoč vse receptorje in njihovih ligandov skupaj.

Da bi raziskali izraz vzorec receptorje ESPG in ligandi raka želodca, smo pridobili tkivo iz tumorja in sosednjih zdravih tkivih iz istega operacijo pacientu, pri katerem za rakom želodca. Uporabili smo seznanjeni vzorcev tkiva, da se zagotovi proti razlikam med posamezniki, ki obstaja v osnovnem izrazu sistema ESPG. Z uporabo RT-qPCR smo količinsko mRNA izražanje štirih ESPG receptorjev, vključno s spajanje izooblike HER4 in ligandov aktiviranja teh receptorjev.

Materiali in metode

Bolnik odbira in odvzem biopsije

v tej študiji kohorte, 38 bolnikih po operaciji za adenokarcinom želodca, požiralnika ali gastroezofagealnem prehodu so zaporedoma vključena od julija 2008 do novembra 2009. Vsi posamezniki, če je obveščen pisno soglasje. Zbiranje biopsije je bil odobren s strani regionalnih znanstvenih odborov za etiko Zelandija, Danska (število revij H-B-2008-049), in vzpostavitev BIOBANK je odobril danska Agencija za varstvo podatkov (številka revije 2008-41-2138). Biopsije so bili odvzeti iz obeh tumorskega tkiva in sosednje normalnega tkiva. Vse biopsije vzorci so bili pregledani z izkušeno patolog za potrditev diagnoze. Vnaprej opredeljeni klinični podatki so bili pridobljeni iz medicinskih kart in poročil patologije. Klinične značilnosti bolnikov so podane v tabeli 1.

RNA ekstrakcija

biopsije so bili dani v RNA kasneje
(Life Technologies, Carlsbad, CA, ZDA), takoj po odstranitev. RNA kasneje
je bil odstranjen pred izolacije RNA in dodali Trizol (Life Technologies, Carlsbad, CA, ZDA). Vzorci tkiva smo homogenizirali na Tissuelyser (Qiagen, Chatsworthu, CA, ZDA). RNA iz tkiva smo izolirali po protokolu za proizvodnjo za Trizol izolacije RNA (Life Technologies, Carlsbad, CA, ZDA). koncentracije RNA smo izmerili na NanoDrop ND-1000 spektrometra. Kakovost RNA je bila testirana na 2100 Bioanalyzer (Agilent Technologies, Santa Clara, CA, ZDA) v skladu s protokolom izdelavi je.

Povratne prepisu kvantitativna verižna reakcija s polimerazo (RT-q-PCR)

cDNA smo sintetizirali iz 1 ug celotne RNA s pomočjo visoke zmogljivosti cDNA povratne Transcription Kit (Life Technologies, Carlsbad, CA, ZDA). Končni Reakcijo smo razredčili s skupnim volumnom 200 ul

1 xl cDNA smo uporabili za qPCR uporabo SYBR zeleno Master mix (Roche, Basel, Švica) na Roche LightCycler 480 v. 95 ° C, 10 min; 50 ciklov 95 ° C za 10 sekund, posebno žarilni temperaturi za 10 sekund, 72 ° C za 5 sekund; 99 ° C za 1 sekundo; 59 ° C 15 sekund; 95 ° C za 1 sekundo; ohladitvi na 40 ° C. Primer zaporedja in žarjenje temperature so podane v tabeli 2.

gena je bila določena z uporabo Normfinder algoritem [23] na kvantificiranih koncentracij GAPDH, P-aktina, YWHAZ, SDHA in HMBS najprimernejša za normalizacijo . SDHA izkazalo, da je najboljši od petih. Dva vzorca so bili izključeni iz analize, ker ni odkrivanje mRNA iz katerega koli od referenčnih genov.

imunskim barvanjem

Parafinski-vgrajeni tkiva določen v 4% zastalega paraformaldehid od 13 reprezentativnih bolnikov je raziskala imunohistokemija z uporabo c-erbB-4 /HER-4, zajec poliklonsko protitelo razredčen 1/50 kot primarna protitelesa (RB-9045-P1, Thermo Scientific, Wilmington, DE, ZDA). Za priklic oddelki antigen so kuhali v mikrovalovna pečica v 10 mM citratnega pufra, pH 6,0. Imunoreakcija smo vizualizirali s Biotinilirana kozji anti-rabbit protitelesa razredčenega 1/200 (BA-1000, Vector Laboratories, Burlingame, CA, ZDA), ki mu sledi predoblikovanega avidina in biotiniliranega hrenovo peroksidazo makromolekularnega kompleks (ABC) razredčen 1/100 (Code nr. PK-4000, Vector Laboratories, Burlingame, CA, ZDA). Reakcija je bila razvita z uporabo 3,3 -diaminobenzidine in counterstaining je bila izvedena z Mayer Hemalum. Kot negativno kontrolo, je enak postopek izpeljan brez primarnega protitelesa.

S sliko Pro Plus (MediaCybernetics) intenzivnost obarvanja reprezentativnih slik tumorja v primerjavi bil obdaja sluznica tkivo ocenjena. Dve podobi tumorja vzorca in dve slike okoliških sluznice so bili zbrani iz vsakega vzorca tkiva in povprečje obeh vrednosti je bila izračunana in se uporablja za statistično analizo in ubral. Za nekaj vzorcev, je bila le tumorsko tkivo ali samo normalna sluznica prisotna in ne primerjava HER4 izražanja bilo mogoče teh tkiv. Paru t-test smo uporabili za ugotavljanje, ali je bila intenzivnost tumorskih tkiv razlikuje od intenzivnosti sluznici tkiv.

Rezultati

mRNA izraz receptorje ESPG v želodcu raka

RNA pridobljen iz 38 tumorjev in uskladiti vzorce iz sosednjih zdravih tkivih pri bolnikih, ki so bili operirani za je rak želodca se uporablja za RT-qPCR kvantifikacije. MRNA Izražanje štirih družine ESPG receptorjev EGFR je HER2, HER3 in HER4 je prikazano na sliki 1. Zanimivo je, da je HER4 receptorja podvržemo downregulation v rakavo tkivo v primerjavi z normalno tkivo (p = 0,0004). Za HER2, smo videli uravnavanjem tega receptorja v rakasto tkivo, ki je bil zelo blizu, da se pomembne (p = 0,0520). EGFR in HER3 mRNA izraz je bil un-spremenilo v tumorjih v primerjavi z normalnim tkivom.

HER4 obstaja kot različne alternativno spojene izo. Juxtamembranous regija je lahko sestavljena iz ene Affairs ali JMB in citoplazme regija je lahko sestavljena iz ene CYT1 ali CYT2. Downregulation opažen za celotno HER4 mRNA izražanja v rakasto tkivo, ki se uporablja za vse štiri variante receptorja (slika 2).

Za boljšo ponazoritev velikosti HER4 downregulation v tumorskem tkivu, smo narisane HER4 navzdol ali Povecanje za vsakega posameznega bolnika. HER4 mRNA v tkivu tumorja minus izraza HER4 mRNA v izravnani normalnega tkiva (ΔHER4) je prikazana na sliki 3. Vrednost pod 0 predstavlja downregulation. Ta podatek jasno kaže, da je HER4 downregulation zelo splošen mehanizem, ki poteka v večini bolnikov in ne glede na tumorske lokalizacije.

mRNA izraz družinskih ligandov ESPG pri bolnikih z rakom želodca

TGF -α, amphiregulina, in ESPG specifično vežejo EGFR. Zanemarljivo raven mRNA izraz je bil odkrit ESPG tako tumorja in normalnega tkiva, zato to ligand ni štelo za nadaljnjo analizo. TGF-α in amphiregulina sta bila molekul v rakasto tkivo v primerjavi z normalnim tkivom (slikah 4a in b). HB-ESPG, betacelulina in epiregulin imajo afiniteto za EGFR in HER4, in vse te ligandov bilo molekul tudi v rakasto tkivo (sliki 4 c, d in e). Skupaj, to kaže, da so vsi-EGFR aktiviranje ligande molekul v tumorjih.

Od neuregulins, NRG1 in NRG2 vežejo tako HER3 in HER4. Ugotovili smo, nobenih sprememb v izražanju bodisi a ali različic beta za NRG1 in NRG2 (Številke 4f, G, H in I). NRG3 in NRG4 vežejo le HER4. NRG3 ni prišlo do nobenih sprememb v izražanju z normalno do rakasto tkivo (Slika 4j). Vendar pa je NRG4 navzdol reguliranih v rakavo tkivo v primerjavi z normalno tkivo (p = 0.0009) (slika 4k). To dokazuje, da sta HER4 in njegova specifična ligand NRG4 navzdol urejeno z rakom želodca.

Za boljšo ponazoritev velikosti NRG4 downregulation v tumorskem tkivu, smo narisane NRG4 navzdol ali uravnavanjem za vsakega posameznega bolnika. NRG4 mRNA v tkivu tumorja minus izraza NRG4 mRNA v izravnani normalnega tkiva (ΔNRG4) je prikazana na sliki 5.

Glede na vse paciente, ki kažejo downregulation celotne HER4 v svoji tumorsko tkivo, v 82% o je to NRG4 tudi downregulation in v 86% enega ali več od-EGFR skupna ligandov je (HB-EGF, epiregulin, betacelulina) molekul. Pri 36% bolnikov s popolno HER4 downregulation, vse tri EGFR delijo ligandov so molekul.

Beljakovine izražanje o njej, ki jih imunohistokemični

Ker po transkripcijskih predpisi, vzorce mRNA izražanja RT-qPCR določena morda ne predstavljajo protein izraz vzorec. Da se zagotovi, da je opaziti zmanjšanje HER4 ekspresijo mRNA v rakavo tkivo bolnikov z rakom želodca odraža tudi na ravni proteina smo izvedli Imunohistokemijsko na formalinom fiksni parafinskega vgrajeni tkiva vse bolnike, vključene v raziskavo.

s količinsko intenzivnosti obarvanja HER4 v reprezentativnih področjih kulturnega tumor- in okoliškega tkiva, smo našli tumor tkivo, da imajo bistveno manj intenzivnost HER4 obarvanje v primerjavi z okoliško normalno sluznico (p = 0,0029) (slika 6) .

Reprezentativni fotomikrografov iz stainings so predstavljeni na sliki 7. v normalnem želodčne sluznice obstaja močna HER4 imunoreakcija (slika 7 a). Zlasti bazalni del citoplazmo in celično membrano bočno od epitelnih celic površinskih bili močno imunoreaktivnega za HER4 (slika 5 b). Tudi parietalnih celic je pokazala zelo močno HER4 radioinkorporacijo (Slika 7 C in D). V submucosa in mišične plasti so bili negativni. V žleznih struktur, zlasti parietalnih celic je pokazala zelo močno HER4 radioinkorporacijo (sliki 7 C in D). Negativne kontrole izvedene brez primarno protitelo povzročila nikakršne barvanjem.

V želodčnega raka je imel le nekaj manjših območij s tumorskimi celicami pozitivno imunoreakcija do HER4 in negativne tumorja tkiva močno v nasprotju z obarvanih normalno sluznico mejijo na tumorja (slika 7). V osrednjem delu tumorskega tkiva so bile skoraj vse celice v celoti negativni, razen manjših skupin celic, ki bi lahko imeli poseben membranski madeže.

Pogovor

Družina ESPG je sestavljena iz Interakcija mreža receptorjev in ligande, ki jih je treba upoštevati v celoti razumeti ureditev signalizacije v družini ESPG. Ugotovili smo, da ureditev vzorec družine ESPG v tumorskem tkivu iz bolnikov z rakom želodca kot tudi izravnano sosednji normalno tkivo iz istih bolnikov.

smo najde signalizacijski potencial EGFR se molekul v tumorskem tkivu z uravnavanjem vseh EGFR aktiviranja ligandov na, in smo našli tudi uravnavanjem HER2 v tumorskem tkivu, ki je bil zelo blizu, da se pomembne (p = 0,0520). To se dobro ujema z obstoječo podatkov, ki kažejo, da sta EGFR in HER2 povezano s slabo prognozo raka želodca [19]. Pomen HER2 pri raku želodca, dokazuje dejstvo, da je HER2 zaviranjem protitelesa Herceptin edini odobreni sredstvo za ciljno zdravljenje raka želodca [24].

Za HER3, nismo upoštevali nobenih izraznih ureditev raven mRNA. Vendar pa je nekaj študij o HER3 pri raku želodca pripisana vloga HER3 pri raku želodca. HER3 je bila povezana s slabim preživetje, in izraz pozitiven HER3 protein bil odkrit z imunohistokemijo v 18,6% vzorcev z rakom želodca v primerjavi s samo 2,0% od nontumorous vzorcev [25] - [27]. Nismo našli večje HER3 izraz na raka želodca v primerjavi z normalnim tkivom v naši raziskavi. Vendar pa je lahko razlika v metodah, ki se uporabljajo v študijah (imunohistokemiji vs RT-qPCR) predstavljajo nekatere razlike v rezultatih. Poleg tega smo lahko opisali ureditev vzorec v vsakega bolnika in ne v bazenu rakavih bolnikov in bazen za nadzor oseb, kar bi lahko predstavljajo tudi razlike v rezultatih, doseženih v dveh študijah.

Našli smo izrazito downregulation obeh HER4 in njeno aktiviranje ligand NRG4 v tumorskem tkivu. Naši rezultati so okrepljeni z dejstvom, da smo našli tudi downregulation, ko smo uporabili dodatne teste količinsko posebnih izo-oblike HER4. Uporaba imunohistokemično, smo potrdili, da je normalno v želodcu tkivo pozitiven HER4, medtem ko je rakasto tkivo zelo nizka ali ne HER4 madeže.

zmanjšala izražanje HER4 mRNA izražanja v tumorskem tkivu je mogoče pripisati zmanjšanja število celic, ki izražajo HER4 ali zmanjšanja HER4 ekspresijo v vseh celicah, ki izražajo HER4. Iz naše Imunohistokemične stainings, opazimo, da je v želodcu raka le manjše gruče z tumorskih celicah pozitiven imunoreakcija na HER4, medtem ko je bila večina tumorskih celic popolnoma negativna. To kaže, da je število celic, ki izraža HER4 da se zmanjša v tumorjih. V nasprotju s tumorsko tkivo, je imela normalno tkivo zelo močne imunske reakcije na HER4. Zanimivo je, da se celice, še posebej za proizvodnjo sluzi in solno proizvodnjo kisline parietalnih celic, ki izražajo HER4 beljakovin.

Vloga HER4 v rakavo bolezen, je sporna. Pri raku sečnega mehurja, RT-qPCR količinsko HER4 in njenih ligande kažejo, da je HER4 povezan z boljšim preživetje. Zlasti je sočasno izraz HER4 skupaj s svojo specifično ligandom, NRG4, močno povezana z boljšim preživetjem [28]. Prav tako je HER4 povezana z boljšim splošnim in brez bolezni preživetje pri raku materničnega vratu [29]. V grla ploščatoceličnim karcinomom, je HER4 izgubil v tumorjih pozno [30], in HER4 je v glavnem najdemo v nizko-fazi in ne metastatskih ksenotransplantskih tumorjev pri raku trebušne slinavke [31].

Po drugi strani pa, HER4 protein izraz, ki ga imunohistokemijo določena je bila povezana z distalnim metastaz in zmanjšano stopnjo preživetja v ustnih ploščatocelični karcinom celic [32]. V študiji kolorektalnega raka, v katerem je bil protein izraz vzorec določi tudi imunohistokemijo, so imeli bolniki v zgodnji fazi nižji odstotek HER4 prekomerno kot pozno-stopenjskimi bolnikov [33]. V malignih obolenj centralnega živčnega sistema, HER4 ima tudi tumorjem spodbujanje vloge [34], [35].

Ni veliko znanega o vlogi HER4 raka želodca. No HER4 mRNA izraz bila zaznana v dveh želodčnih raka celičnih linij [36]. HER4 protein izraz kot jih imunohistokemično zazna bilo ugotovljeno, da sovpada z zgodnjo fazo, nižji razred, in odsotnost bezgavkah v raka želodca [25]. To je zelo dobro ujema z drugo raziskavo, ki v preiskavi izražanje genov profilov dolgoročnih preživelih iz metastatskega raka želodca, zdravljenih s kemoterapijo, v katerih avtorji so pokazali morebitno vlogo HER4 pozitivni vpliv pri teh bolnikih [37]. Skupaj z našimi sedanjih rezultati so ti podatki nadalje kažejo, da ima HER4 signalizacijo zaščitno funkcijo proti karcinogenezo v želodčni regiji. Ena od študij je pokazala, gen HER4 se pogosto dopolnjena z rakom želodca [38]. Vendar pa so rezultati naše študije kažejo, da to ne prevesti na raven HER4 izražanja, saj smo našli downregulation za HER4 mRNA in izražanja proteinov namesto z uravnavanjem.

Čeprav nismo našli ekspresije EGFR treba urediti, je potencial signalizacija skozi ta receptor poveča z uravnavanjem vseh njegovih ligandov. To vključuje ligande delili z HER4: HB-ESPG, betacelulina in epiregulin. Poleg avtokrinskega aktivacije EGFR, Povecanje teh ligandov lahko vodi do povečane aktivnosti HER4. Aktivacija EGFR poti je res način za celice, da postane bolj rakotvorne. Vendar pa, glede HER4 da so anti-rakotvornih funkcije, bi sočasno aktiviranje tega receptorja zaustavitev proliferativni prednost aktivacijo EGFR. Lahko bi domnevajo, da je ta potencial aktivacija HER4 izogniti sočasna downregulation receptorja in njegove specifične liganda NRG4.

Pri bolnikih z rakom na mehurju, lahko v kombinaciji HER4 /NRG4 signalne naprave se rast zaviralni in co-izraz HER4 skupaj z NRG4 je zelo povezana z boljšim preživetjem, če se proteini delujejo skupaj in ne posamično [28].

prav tako smo izvedli analizo za primerjavo HER4 izraz na preživetje bolnikov. Smo naredili opazujemo težnja visoko ekspresijo HER4 so povezana z boljšim preživetjem (rezultati niso prikazani), pa je zaradi omejitev števila bolnikov, vključenih v študijo, ta rezultat ni bilo ugotovljeno, da znatna in nadaljnje študije bodo imele pojasniti, ali je povezava med HER4 izražanja in preživetje mogoče najti v rakom želodca. Korelacijska ravni ekspresije receptorjev ESPG v prisotnosti bezgavkah in invazivnosti tumorjev pokazala le HER2 na obratno povezati s temi parametri ker ni bilo korelacije ugotovljenih za preostale družine ESPG (rezultati niso prikazani).

Skratka, naši rezultati kažejo na novo vlogo za HER4 pri raku želodca. Zanimivo je, da smo našli tako HER4 in njen specifičen ligand NRG4 se navzdol reguliranih v rakasto tkivo. To je skupaj z večjim potencialom signalizacijo EGFR z uravnavanjem vseh njegovih ligandov in uravnavanjem HER2.

• Plos ONE: MicroRNA-338 zavira rast, invazijo in metastaz želodčnega raka z usmerjanjem NRP1 izražanja
• Plos ONE: Co-Dostava doksorubicinom in SATB1 shRNA s toplotno magnetno kationskih liposomov za želodca raka terapije