PLoS One: Exosomal miRNS-re hashártya mosófolyadék mint potenciális prognosztikai biomarkerek peritoneális metasztázis Gyomor Cancer

absztrakt katalógusa

A peritoneális áttét a leggyakoribb típusú betegek visszatérő gyomorrák (GC) és a kapcsolódó rossz prognózissal. Peritoneális öblítéssel citológia, hogy értékelje a kockázati peritoneális áttét, kis érzékenységű. Itt megvizsgáltuk a diagnosztikai potenciálja exosomal miRNS profilok a peritoneális folyadékban előrejelzésére peritoneális terjesztési GC. Teljes RNS-t extraháltunk exoszómák izolált hat gyomor rosszindulatú hasvízkór (MA) a mintákat, 24 peritoneális mosófolyadékban (PLF) minták, valamint a tenyészetek felülúszóját (CM) két emberi gyomor karcinóma sejtvonalak különböznek a potenciális peritoneális metasztázis. Expression of exosomal miRNS értékeltük Agilent emberi miRNS microarray és kvantitatív reverz transzkripciós polimeráz-láncreakció (QRT-PCR). A microarray analízis azt jelezte, alacsony változékonyság számának és a jel intenzitása miRNS észlelt a minták között. A hat MA folyadékok, miR-21 volt a legnagyobb jel intenzitását. Öt olyan miRNS (miR-1225-5p, miR-320C, miR-1202, miR-1207-5p és miR-4270) nagy expressziós MA minták, a PLF a savóshártyát invazív GC, és a CM egy erősen metasztatizáló GC sejtvonal; ezek jelölt miRNS fajok tűnnek kapcsolatos peritoneális terjesztését. Differenciális expressziója miR-21, miR-320c, és miR-1225-5p érvényesítették a PLF a serosa invazív és non-invazív GC qRT-PCR és miR-21 és miR-1225-5p megerősítette, hogy részt a savós invázió GC. PLF lehet használni, hogy profil expressziójának exosomal miRNS. Eredményeink arra utalnak, hogy a miR-21 és miR-1225-5p szolgálhat biomarkerek peritoneális visszaeső gyógyító GC rezekció, így egy újszerű megközelítését a korai diagnózis a peritonealis terjesztése GC. Katalógusa

Citation: Tokuhisa M, Ichikawa Y, Kosaka N, Ochiya T, Yashiro M, Hirakawa K, et al. (2015) Exosomal miRNS-re hashártya mosófolyadék mint potenciális prognosztikai biomarkerek peritoneális metasztázis gyomorrákban. PLoS ONE 10 (7): e0130472. doi: 10,1371 /journal.pone.0130472 katalógusa

Szerkesztő: Soheil S. Dadras, University of Connecticut Health Center, Egyesült Államok katalógusa

Beérkezett: február 1, 2015; Elfogadva: 20. május 2015; Megjelent: július 24, 2015 katalógusa

Copyright: © 2015 Tokuhisa et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra katalógusa

Az adatok elérhetősége: Minden lényeges adatot belül a papír. katalógusa

Forrás: a szerzők nem támogatja vagy finanszírozási jelenteni. katalógusa

Érdekütközés: a szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. katalógusa

Bevezető

a mikroRNS (miRNS-ek), kicsi (19-23 nukleotid) nem kódoló RNS-ek, hogy működnek poszt-transzkripciós szabályozó a génexpresszió és fontos szerepet játszanak a kontroll a sok biológiai eljárások, beleértve a sejtek differenciálódását, proliferációját, és apoptózist [1]. MiRNS-ek már kimutatták, hogy onkogén vagy tumor-elnyomó aktivitás, és szabályozatlan expressziója számos miRNS faj észlelt számos rák, ami arra utal, lehetséges alkalmazását miRNS mint biomarkerek rák progressziójának és metasztázis [2-5].

miRNS vannak burkolva szekréciós mikroüregek (pl exoszómák, apoptotikus testek, és szórnak mikroüregek), amely pajzs miRNS a lebomlástól RNáz és szolgálnak járművek miRNS sejten kívüli térbe és a testnedvek. Exoszómák kis hártyás hólyagocskák, hogy szerepet játszanak a celluláris immunválaszt; Azonban az utóbbi időben nyilvánvalóvá vált, hogy exoszómák tartalmaznak lényeges mennyiségű RNS-t, és be lehet vonni az immun-független szabályozó mechanizmusokat. Azt állapították meg, hogy exoszómák végezhet sejtközötti átadása miRNS, így részt vesz a miRNS-alapú jelátviteli mechanizmus [6]. A magasabb szintű miRNS-tartalmú exoszómák is kimutatható a plazmában a rákos betegeknél, mint az egészséges egyének [7], ami arra utal, hogy a exozom alapú miRNS szekréció szerepet játszanak a rák fejlődését. Elemzés aberráns miRNS expresszió szérum, nyál, széklet és vizelet már alkalmazott a korai felismerés a B-sejtes limfóma, és szóbeli, a bél, és hólyagrák [8-11]. Katalógusa

A gyomorrák (GC) a második leggyakoribb oka a rák okozta halál világszerte [12]. A hashártya a leggyakoribb hely a metasztázis és megismétlődésének GC, és a malignus ascites (MA) okozta peritonealis terjesztése rákos sejtek, már rossz prognózissal társul. Jelenleg nincsenek megbízható előrejelzője a malignus peritoneális ascites GC betegeknél. MiRNS-tartalmú exoszómák képviselnek egy új mechanizmus az intercelluláris jelátvitel és hozam betekintést a környezetbe, amely lehetővé teszi a rák terjesztése a hashártya [13].

Ebben a vizsgálatban az exoszómák izoláltunk IH és a intraoperatív peritoneális mosófolyadékban (PLF) nyert minták GC páciensek, és a táptalajt (CM) a rendkívül invazív peritoneális sejtvonalak, valamint a miRNS ezután extraháljuk ezekből a mintákból. A minőség a kivont exosomal miRNS és konzisztenciájának miRNS expressziós mintázatának ellenőrizték. A miRNS expressziós profil MA, PLF, és a CM mintákat összehasonlították, és jelölt miRNS kapcsolatos peritoneális terjesztése GC azonosítottak. Katalógusa

Anyagok és módszerek katalógusa

A betegek katalógusa

Minden beteg vagy a gyám írásos beleegyezését adta. A tanulmány által jóváhagyott Etikai Bizottsága Yokohama City University Hospital (Jóváhagyás száma A110127001). Katalógusa

Ma és intraoperatív PLF mintákat gyűjtöttünk GC betegek klinikopatológiai jellemzők 1. táblázat mutatja valamennyi beteg korábban diagnosztizált GC szerint szövettani elemzése nyert minták elsődleges elváltozások, és hat MA betegnél diagnosztizáltak a jelentkező ascites hasi komputertomográfiás (CT). Ascites elemeztük citológiai és minden bebizonyosodott, hogy pozitív malignus a patológusok; A fennmaradó MA mintákat használtuk miRNS izolálás. PLF volt intraoperatív gyűjtöttünk 24 GC beteg (1. táblázat). Miután laparotomia, 100 ml normál sóoldatban öntjük a tasakot a Douglas és peritoneális öblítéssel víz előtt gyűjtött sebészi eltávolítását a daganat. PLF elemeztük citológiai és használt miRNS izolálás. Között 24 PLF mintákat, hatot alkalmazásával vizsgáltuk a miRNS microarray és 18 elemeztük qPCR. Katalógusa

Sejtkultúra katalógusa

A OCUM-2M sejtvonalat hoztunk létre egy primer daganat scirrhous gyomorrák és a OCUM-2MD3 sejtvonal származik OCUM-2M sejtek nagy a valószínűsége a peritoneális terjesztés nude egerekben [14]. A sejteket Dulbecco-féle módosított Eagle-féle tápközegben (DMEM; Life Technologies, Grand Island, NY), kiegészítve 10% hővel inaktivált magzati borjúszérummal (FBS) és antibiotikumot-antimikotikum 37 ° C hőmérsékleten, 5% CO _{2 inkubátor. Ahhoz, hogy sejt-CM, OCUM-2M és OCUM-2MD3 sejteket háromszor mossuk szérummentes DMEM kiegészített antibiotikum-antimikotikum és inkubáljuk ugyanebben a közegben 48 órán át.}

izolálása exoszómák

mintákat exozom izolálás állítottunk elő a korábban leírtak [15]. Eltávolításához nagy sejtes részecskék és a sejttörmeléket, MA, PLF, és a CM centrifugáltuk 2000 x G katalógusa 15 percen át 4 ° C-on, és átszűrjük egy 0,22 jim-es szűrőn (Millipore, Billerica, MA). A felülúszót -80 ° C-on, amíg szükséges miRNS extrakció.

kicsapódni exoszómák mintákat centrifugáltuk 110.000 × G katalógusa 70 percen át 4 ° C-on. A exozom üledéket mossuk 11 ml foszfáttal pufferolt sóoldattal (PBS), és ismét centrifugáltuk a leírtak szerint. A pelletet használtuk RNS kivonása.

Teljes RNS-extrakció és analízis

Teljes RNS-t extraháltunk exoszómák alkalmazásával miRNeasy Mini Kit (Qiagen, Hilden, Németország) alkalmazásával a gyártó utasításai és volt majd -80 ° C-on, amíg szükséges további elemzést.

A minőség, a koncentráció, és a mérete a teljes exosomal RNS értékelték egy Agilent Bioanalyzer 2100 (Agilent Technologies, Foster City, CA). Az elemzést megelőzően, a teljes RNS-t készítettünk egy Agilent RNS 6000 Pico kit (Agilent Technologies) alkalmazásával a gyártó utasításai szerint.

miRNS microarray

miRNS kivont hat MA, hat PLF, és két CM mintákat Agilent emberi miRNS microarray (Agilent Technologies), amelyek 1226 humán miRNS és 146 emberi vírusos miRNS. A miRNS felderítése, 100 ng RNS-t jelzett és hibridizáltuk a humán miRNS Microarray kit (Rel 16,0; Agilent Technologies) alkalmazásával a gyártó protokollja (miRNS Complete Labeling és Hyb készlet miRNS Microarray rendszer). Hibridizációs jelek észlelt DNS Microarray Scanner G2505C (Agilent Technologies) és a beszkennelt képeket elemeztük Agilent Feature Extraction Software (v. 10.7.3.1). Adatelemzés végeztük Agilent GeneSpring GX szoftver v. 11.0.2. (Log _{2 transzformáció). Kiindulási átalakulás nem került sor. Katalógusa}

A minőségi miRNS extrakció szerint elemezték változékonysága száma microarray észlelt miRNS faj, a jel intenzitását, és a korrelációs miRNS expressziós között mintán átlag ± SD, variációs koefficiens (CV), és a korrelációs együttható (CC). katalógusa

Válogatás a hashártya áttét-specifikus miRNS katalógusa

A kifejezés profiljait exosomal miRNS elemeztük, hogy kiválassza a miRNS-ek, amelyek specifikusak GC hashártya terjesztése a következő lépésenkénti megközelítést. 1. lépés: miRNS profilokat a CM a nagyon metasztázisos peritoneális OCUM-2MD3 sejteket összehasonlítottuk a szülői nem áttétes OCUM-2M-sejtek, és eltérően expresszált miRNS (átlagos szeres-változás, hogy a 2) választottuk ki.

2. lépés: hat PLF mintákat két csoportba sorolják: T4 (n = 4) és T1-T3 (n = 2) szerint a rák szakaszban a tumor mérete és kiterjesztése (UICC-AJCC, 7 ^{th kiadás). Stage T4 GC jellemzi a legmagasabb frekvencia a peritoneális áttétek, mint más szakaszaiban [16]. A miRNS expressziós profilját T4 csoport hasonlították össze a T1-T3-csoport és differenciáltan expresszálódó miRNS (átlagos kinyitható változás, > 2) választottak. Katalógusa}

3. lépés: a kiválasztott miRNS számára közös mindkét lépés, és fejeztük MA tovább szűrhetők jel intenzitását. Azok a intenzitása az érték több mint log _{2 10 MA és PLF választottunk jelölt miRNS kapcsolatos peritoneális áttétek; miR-21 volt a legmagasabb az átlagos jel intenzitása között MA mintákat. Az eltérés kifejezése miRNS kiválasztott faj 3. lépés érvényesítették a fennmaradó 18 PLF mintákat qRT-PCR. Katalógusa}

mennyiségi elemzése peritonealis metasztázis-specifikus miRNS expresszió qRT-PCR katalógusa

TaqMan mikroRNS vizsgálatokkal (Life Technologies) alkalmaztunk számszerűsíteni relatív expressziós szintjének a miR-21 (vizsgálati ID. 000397), miR-320c (vizsgálati ID. 241053_mat), miR-1225-5p (vizsgálati ID. 002764), és a miR-16 (vizsgálati ID. 000.391). A reverz transzkripciót végeztünk TaqMan miRNS RT készlet (Life Technologies), a következő feltételek mellett: 30 perc 16 ° C hőmérsékleten, 30 percig 42 ° C-on, és 5 percig 85 ° C-on. PCR-t végeztünk 96 lyukú lemezeken a 7500 Real Time PCR System (Life Technologies); Minden reakciót végeztünk három példányban. Az expressziós szintek cél miRNS normalizáltuk, hogy a miR-16, amelynek felhasználásával, mint egy stabilan kifejezett szabályozás [17]. Elemzésekor a microarray adatok exosomal miRNS malignus ascites mintákban, miR-16 bemutatta a legkisebb a variációs koefficiens (CV = 4%) között a jelölt belső előírásoknak, beleértve a miR-638 (CV = 8%), let-7a (CV = 8%), és 142-3p (CV = 23%). katalógusa

a statisztikai elemzés katalógusa

a folytonos változók, mint a Student féle t katalógusa próba. Ha szükséges, a t katalógusa -teszt módosították összehasonlítani egyenlőtlen ingadozásokat. A különbség a kategorikus változók alkalmazásával értékeltük Fisher-féle egzakt teszt. Korreláció két változó közötti értékeltük a Pearson korrelációs együttható. A különbségeket akkor tekintettük statisztikailag szignifikáns P < 0.05. A statisztikai elemzéseket végeztünk SPSS 21.0 szoftver Windows (IBM, Armonk, NY). Katalógusa

Eredmények katalógusa

mennyiségi elemzése kivont exosomal RNS katalógusa

A teljes RNS-t vontunk ki exoszómák izolált re MA, intraoperatív PLF, és a sejtek CM. A medián koncentrációja a kivont exosomal RNS 4,4 ng /ul (kezdve 1,2-6,1 ng /pl) az MA és 6,4 ng /ul (1,7-16,4 ng /pl) PLF. Elektroferogramokat kiderült, egy nagy részét a kis RNS-fajok jelen van az összes CM és klinikai mintákban, míg a nem vagy csak nagyon kevés szennyeződés 18S és 28S riboszomális RNS-t (nincs külön csúcsokat a megfelelő molekulasúly) volt megfigyelhető (1. ábra).

Performance miRNS microarray katalógusa

a teszt a kifejeződése exosomal miRNS microarray az egyes csoportokban a mintákat megvizsgáltuk a fellelt miRNS, százalékos jel intenzitását, a számos általánosan elfogott miRNS és a korreláció miRNS expressziós a csoportok között. A számok a miRNS fajok kimutatott mindegyik csoport által microarray ábrán látható 2. A hat MA és hat PLF minták, ezek jelent számok 490,1 (SD = 42,3; CV = 8,6%), és 367,5 (SD = 13,4; CV = 3,6%), ill. Minden egyes csoportban, a variabilitás számának észlelt miRNS minták közötti alacsony volt.

Signal intenzitás eloszlás az egyes csoportok esetében mutatjuk be a 3. ábrán; ez azt mutatja, a feldolgozott jeleket átszámítható a 25, 50, 75, és 90 ^{percentilisbe minden csoportban. A 50 percentilis, a log _{2 relatív jelintenzitásai MA (ábra 3-1) és PLF (ábra 3 és 2) a mintákat és azok között három csoportban (MA, PLF, és a CM, ábrák a 3. és 4) voltak 5,53 ± 0,19 (CV = 3,49%), 6,14 ± 0,24 (CV = 3,87%), és 4,97 ± SD (CV = 5,24%), ill. A változékonyság jelintenzitás a minták között az egyes csoportokban, valamint a csoportok között alacsony volt.}}

A számok miRNS közös a minták között az MA, PLF, és a CM csoport volt 327, 263, és 354 -kal, mivel ez volt a 194. a három csoportban (lásd 4. ábra).

a 2. táblázat mutatja az összefüggést a miRNS expressziós között minden két minta. A legmagasabb és a legalacsonyabb CC értékek 0,94 és 0,68, illetve, az átlagos CC valamennyi minta volt 0,79 (CV = 8,86%). MA, PLF, és a CM csoportok, az átlagos CC értékek 0,85, 0,88, 0,90, illetve és a változékonyság a kifejezés profilok minden csoportban alacsony volt. Katalógusa

Válogatás a jelölt miRNS kapcsolatos peritoneális terjesztés

Eddig nincs adat rendelkezésre állt volna a kifejezése profilok exosomal miRNS kapcsolódó peritoneális terjesztését, mert az nem áll a normális aszcitesz folyadékot, amely ellen összehasonlítani az IH expressziós profilok. Azért választottuk a miRNS kapcsolatos peritoneális terjesztését egy lépésenkénti megközelítést. Száma miRNS-ek közösen készített a hat MA mintákban volt 327. 1. és 2. lépés, 140 és 118 metasztázis-specifikus miRNS választottak ki a CM és PLF csoportban. Ezekből 327, 140 és 118 miRNS öt miRNS választottak a jelöltek kapcsolatos peritoneális terjesztés (5. ábra). Ketten (miR-1225-5p és miR-320c) és miR-21, a legmagasabb jel intenzitása között MA-specifikus miRNS hagyta jóvá, mint amelyek eltérő módon fejeződnek ki 18 PLF minták segítségével qPCR (3. táblázat). Katalógusa

validálása jelölt miRNS expresszió qPCR katalógusa

Tizennyolc PLF mintákat két csoportra osztottuk szerint áttétes, T4 (perforált savóshártyát, n = 9) és T1-T3 (subserosa vagy kevesebb, n = 9), és a kifejezés a miR-21, miR-320c, és miR-1225-5p elemeztük qRT-PCR-rel. Az 5. ábra azt mutatja, hogy a szint a miR-21 és miR-1225-5p T4 stádiumú GC betegek szignifikánsan magasabb volt, mint azok a T1-T3 beteg (miR-21, P = 0,027, és a miR-1225-5p, P = 0,008; 5. ábra). A különbség a miR-320c kifejezés két betegcsoport nem volt szignifikáns (P = 0,928, a 6. ábra). Katalógusa

Ezt követően a korreláció miRNS szintek és klinikai háttér GC betegek vizsgáltuk (4. táblázat). MiR-21 és miR-1225-5p expresszió szignifikánsan magasabb volt azoknál a betegeknél, T4 stádiumú rák, mint hogy a T1-T3 stádiumú betegeknél (p = 0,015). Nincs szignifikáns korrelációt találtak a miRNS expresszió és egyéb klinikai paramétereket. Katalógusa

Vita katalógusa

Ebben a tanulmányban azt vizsgáltuk, az első alkalommal, a miRNS tartalmát exoszómák izolált MA és PLF GC betegek. A tanulmány azt mutatja, hogy exosomal miRNS lehet következetesen kivont MA és PLF és miRNS expressziós profilok állapotát jelzi hashártya GC betegeknél. Katalógusa

A prognózis a GC savós invázió továbbra is rossz után is R0 reszekció, mert a magas a kiújulás aránya, különösen peritoneális áttétek (PM) [18]. PM GC a legbonyolultabb típusú kiújulás, mert nehéz megjósolni, valamint diagnosztizálni. Bár ascites a leggyakoribb PM tünet, sok GC betegek PM nem fejlődnek ascites. Között a képalkotó-alapú diagnosztikai módszerek, a nagy sebességű spirál CT széles körben használják az értékelést preoperatív staging GC és a poszt-terápiás nyomon követése; Azonban abban az esetben, PM a diagnosztikai pontosság nem megfelelő, leginkább azért, mert az alacsony érzékenység [19]. A PET-CT PM diagnózis GC is ellentmondásos, mivel leírták, hogy az FDG-PET gyenge érzékenység kimutatására PM GC [20]. PLF vált a következő célpont diagnosztizálására és előrejelzésére PM GC. Citológiai vizsgálata intraoperatív összegyűjtött PLF használják predikciós peritoneális kiújulás [21], és használják a GC stádium Japánban [22]. Azonban néhány kutató arról számolt be, hogy a PLF citológia nem mutat a szükséges érzékenységet, a predikciós és felderítése PM [21], és javasolták a molekuláris diagnosztikai módszerek, például az RT-PCR, kimutatására a mikro-metasztázisok PLF. Egy multicentrikus, prospektív vizsgálat, mRNS expresszióját kódoló gének karcinoembrionális antigén (CEA) és citokeratin 20 (CK-20), értékeltük RT-PCR-rel, bebizonyította, hogy hasznos a predikciós teljes túlélés és a PM GC [23] . Hátránya azonban, az mRNS-alapú diagnosztikai módszerek a magas lebonthatóság mRNS során sebészeti eljárásokat.

Ezzel szemben miRNS zárt exoszómák stabil marad, és tud keringeni a testfolyadékokban, például szérum, plazma , nyál, vizelet, anyatej, és a könnyek, a hosszú ideig [24, 25]; exoszómák is izoláltak MA petefészekrák [26].

A legjobb tudomásunk szerint nem volt jelentést exosomal miRNS izolált PLF GC betegeknél. Levänen et al. összegyűjtött exoszómák származó bronchusmosó folyadék és elemezni exosomal miRNS expressziós kimutatására allergiával kapcsolatos miRNS fajok [27]. Liu et al. számolt be, hogy exoszómák izolált cervicovaginal mosófolyadékban tartalmazott nagy mennyiségű miR-21, amelyet fel lehetne használni, mint egy biomarker méhnyakrák [28]. Itt, elemeztük a kifejezés profilok exosomal miRNS a PLF GC betegek miRNS microarray technológia meghatározása érdekében jelölt diagnosztikai miRNS biomarkerek előrejelzésére áttét GC. Katalógusa

A vizsgálatban, az első kihívás laikus a mennyiségi izolálása exosomal miRNS származó PLF. Weber et al. értékelték miRNS expresszió 12 testnedvek és jelentette, hogy a teljes RNS-koncentráció a peritoneális folyadékban volt 775 ug /L [25], amely kevesebb volt, mint amit kapott MA és PLF-4400 és 6400 ug /L, illetve az az oka, a különbség lehet a használt módszer izolálására teljes RNS, mert Weber et al. közvetlenül kivont RNS peritoneális folyadékban, mivel először izolált exoszómák majd használni ezeket az RNS kivonása. Minőségének elemzése izolált RNS PLF bizonyította rengeteg kicsi (< 200 nt) RNS fajok CM és MA. Nem volt külön 18S és 28S riboszóma RNS csúcs előkészítése, hiányáról szennyeződés intracelluláris RNS. Katalógusa

A másik probléma felmerült a jelen vizsgálatban a következetesség a minőség a exosomal miRNS elszigetelt. Tanulmányunkban azt tapasztaltuk alacsony változékonyság a fellelt miRNS fajok és miRNS jel intenzitását, és a magas korreláció miRNS expressziós a minták között az egyes csoportokban. Az átlagos számát kimutatható miRNS MA és PLF volt 490 és 367, amely összhangban volt a száma miRNS (397) korábban kimutatott peritoneális folyadékban [25]. Katalógusa

PLF és MA mintákat mutatott alacsony variabilitás jel intenzitása (CV = 3,87%, az 50 ^{percentilis). Továbbá miRNS expressziós mintázat nagymértékben korreláltak a minták között az egyes csoportokon belül (CC > 0.850), valamint a csoportok között (0,8 > CC > 0,7). Ezek az eredmények azt mutatták, hogy PLF lehet egy magas hozamú forrása a jó minőségű miRNS, amelyek azt mutatják, következetes kifejezés mintákat a microarray vizsgálatban.}

A miRNS expressziós profilok elemeztük kiválasztásához miRNS specifikus peritoneális metasztázis. MiR-21 mutatta, magasabb expressziós betegeknél T4 stádiumú karcinóma, mint azokban a T1-T3-csoport. Fabbri et al. számolt be, hogy a miR-21 és miR-29a rákos megjelent exoszómák befolyásolja a tumor növekedését és terjed kötődik és azt aktiválja TLR-ek a környező immunsejtek és indukáló egy prometastatic gyulladásos válasz [29]; Ez alátámasztotta azt az elképzelést, hogy a tumor-eredetű exoszómák hozzájárulnak a premetastatic mikrokörnyezet [30, 31]. Ez azt jelezheti, hogy a T4-karcinóma eredetű exoszómák létre a premetastatic niche a hashártya, amely azután támogatja peritoneális invázió után kuratív rezekció GC. Katalógusa

A lépcsőzetes megközelítést választottunk öt exosomal miRNS (miR-320c miR-1202, miR-1225-5p, miR-1207-5p és miR-7270) és validált miR-320 és miR1225-5p kifejezést a PLF 18 CG betegek qRT-PCR-rel. Mir-1225-5p magasabb volt expressziót T4 mint T1-T3 stádiumban CG betegek, megerősítve a kapott eredmények microarray, mivel nem volt különbség a miR-320 szintje között betegcsoportok. Mir-1225 célokat a policisztás vesebetegség gén, PKD1 katalógusa, amely gyakran mutációnak autoszomális domináns polycystás vesebetegség; Így miR1225 befolyásolhatja a progresszió a betegség [31]. Azonban a kapcsolat a miR-1225 és a rák továbbra is tisztázatlan. MiR-21 és miR-1225-5p készíthetünk premetastatic rést a hashártya terjesztésének és elszámolási áttéteit képző rákos sejteket, és így jelezheti a hajlam a peritoneális visszaeső kuratív GC ellátjuk. Katalógusa

PLF hozamok információ körülbelül az állapotát a hashártya, mint például a változások a populációban az immunsejtek és szekréciója növekedési faktorok és citokinek [32, 33]. Citológiai és molekuláris diagnosztikai vizsgálatok alapulnak kimutatására a rákos sejtek, mivel a profilozása miRNS-ek in PLF lehet használni előrejelzésére egy peritoneális premetastatic fenotípust GC, biztosítva a hatékonyabb megelőző és gyógyító intézkedésekre.

• PLoS One: Zic1 Promoter hipermetilációja Plasma DNS potenciális biomarker gyomorrák és intraepithelialis neoplasia
• PLoS One: a mikro-RNS-206: Hatékony gátlása Gyomorrák Progression keresztül c-Met útvonal