U studiji dokazivanja koncepta objavljenoj u časopisu mBio , istraživači su mogli pokazati smanjenje patogena u pokusima provedenim i na laboratorijskoj klupi i na miševima.
Mikrobiolozi s dva različita koledža NC State udružili su se s pokretačkom tvrtkom NC State Locus Biosciences kako bi testirali učinkovitost korištenja virusa zvanog bakteriofag za prijenos programabilnog CRISPR -a za specifično ciljanje i uklanjanje bakterije C. difficile, misija traženja i uništavanja koja obećava zdravlje ljudi.
Željeli smo projektirati fage sa samociljanim korisnim teretom CRISPR i isporučiti ih u crijeva organizma po izboru - u ovom slučaju miša - kako bi imali blagotvoran utjecaj na zdravlje domaćina i spriječili bolesti. "
Rodolphe Barrangou, ugledni profesor hrane Todd R. Klaenhammer, Bioprocessing and Nutrition Sciences u NC State i suodgovarajući autor rada
Su-dopisni autor Casey M. Theriot, docent za zarazne bolesti u državi NC, rekao da upotreba - i pretjerana upotreba - antibiotika povećava osjetljivost na infekciju C. difficile, dok antibiotici brišu i dobre i loše bakterije u crijevima. Relapsi se javljaju u oko 30% humanih pacijenata liječenih standardnim antibiotikom radi uklanjanja C. difficile.
"Moramo ciljati na precizni patogen bez ometanja ostatka mikrobioma, i to je ono što ovaj pristup čini, " rekla je.
CRISPR tehnologije korištene su za precizno uklanjanje ili rezanje i zamjenu specifičnih sekvenci genetskog koda u bakterijama. CRISPR metoda korištena u ovoj studiji uključivala je proteine Cas3 koji su djelovali poput arkadne igre Pac-Man, Barrangou je rekao, usitnjavajući bakteriju C. difficile i uzrokujući opsežno oštećenje DNA.
U laboratoriju, sustavi CRISPR-Cas učinkovito su ubili bakterije C. difficile. Nakon toga, istraživači su testirali ovaj pristup na miševima zaraženim C. difficile. Dva dana nakon tretmana CRISPR -om, miševi su pokazali smanjenu razinu C. difficile, no te su razine dva dana kasnije porasle.
"S C. difficile je zaista teško raditi, otuda i naziv, "Rekao je Theriot.
"Ovo je bio pozitivan prvi korak u dugom procesu, "Barrangou je rekao." Rezultati korištenja faga za isporuku tereta CRISPR -a otvaraju nove putove za druge zarazne bolesti i šire. "
Sljedeći koraci uključuju ponovno opremanje faga kako bi se spriječilo vraćanje C. difficile nakon početnog učinkovitog ubijanja. Istraživači su rekli da će budući rad također uključivati razvoj biblioteke različitih faga za različite sojeve C. difficile.