PLOS ONE: Découverte de marqueurs tumoraux pour le cancer gastrique par Proteomics

Résumé

Le cancer gastrique (GC) a un taux élevé de morbidité et de mortalité chez les différents cancers à travers le monde. Le développement de méthodes ou technologies de diagnostic non invasifs pour le suivi l'apparition de GC est urgente, et la recherche de biomarqueurs fiables est l'étude considered.This destinée à découvrir directement biomarqueurs différentielles à partir de tissus GC par gel à deux dimensions différentielle électrophorèse (2D-DIGE), et valider davantage l'expression des protéines par western blot (WB) et immunohistochimie (IHC) .Pairs des tissus GC (tissus cancéreux gastrique et les tissus normaux adjacents) obtenues à partir de la chirurgie a été étudiée pour des protéines 2D-DIEG.Five wereconfirmed par WB et IHC, y compris le glucose protéine 78 régulés (GRP78), la glutathione s-transférase pi (GSTpi), l'apolipoprotéine AI (Apo AI), l'alpha-1 antitrypsine (A1AT) et gastrokine-1 (GKN-1). Parmi les résultats, GRP78, GSTpi et A1ATwere significantlyup-réglementés et régulés à la baisse, respectivement chez les patients atteints de cancer gastrique. En outre, GRP78 et ApoAI ont été corrélées avec A1AT pour l'étude de la protéine présume ces protéines pourraient être des candidats de biomarqueurs fiables pour le cancer gastrique

Citation:. Wu JY, Cheng CC, Wang JY, Wu DC, Hsieh JS , Lee SC, et al. (2014) Découverte de marqueurs tumoraux pour le cancer gastrique par Proteomics. PLoS ONE 9 (1): e84158. doi: 10.1371 /journal.pone.0084158

Editeur: Salvatore V. Pizzo, Duke University Medical Center, Etats-Unis d'Amérique

Reçu le 19 Août 2013; Accepté 12 Novembre 2013; Publié 3 Janvier, 2014

Droit d'auteur: © 2014 Wu et al. Ceci est un article en accès libre distribué sous les termes de la licence Creative Commons Attribution, qui permet une utilisation sans restriction, la distribution et la reproduction sur tout support, à condition que l'auteur et la source originelle sont crédités

Financement:. Ce travail a été soutenue par des subventions NSC96-3111-P-042A-004-Y, du Conseil national des sciences de la République de Chine NSC100-2314-B-037-040, et par. Ce travail a été également soutenue par Kaohsiung Medical University Hospital (KMUH97-7R32, KMUH98-8R33). Les bailleurs de fonds ont joué aucun rôle dans la conception de l'étude, la collecte et l'analyse des données, la décision de publier, ou de la préparation du manuscrit

Intérêts concurrents:.. Les auteurs ont déclaré aucun conflit d'intérêts existent

Introduction

Bien que theprevalence du cancer gastrique est en déclin et en faisant varier géographiquement, il reste l'un des cancers les plus fréquents dans les pays asiatiques et est le quatrième cancer le plus fréquent (9% de tous les cancers) dans le monde entier. Les taux d'incidence normalisés selon l'âge (ASR) sont supérieurs à 20 pour 100 000 dans les pays à haut risque tels que la Chine, le Japon et la Corée [1], [2], [3]. Il est également la deuxième cause de décès par cancer chez les deux sexes dans le monde (737.000 décès, 9,7% du total). En Asie orientale, les taux de mortalité ont été estimés comme environ 28,1 pour 100 000 chez les hommes et 13,0 pour 100.000 chez les femmes, whilein Amérique du Nord, ils sont environ 2,8 et 1,5 respectivement [4].

Les taux de survie à cinq ans ont varié de 90% à moins de 5 pour cent, en fonction principalement de la phase de diagnostic [5], [6] .Si le cancer gastrique peut être détecté et traité à un stade précoce, la survie à cinq ans rateis supérieure à 90%; cependant, il isno symptôme apparent ou spécifique à un stade précoce cancer.Thus gastrique, début detectionof cancer gastrique becomesmore difficult.Although sérum pepsinogène (PG) testssuch aussi faible concentration de PGI et /ou un faible rapport PGI /II étaient des tests de dépistage suggestifs en haut les pays à risque tels que le Japon, ils weregood indicateurs de gastrite atrophique plutôt que markersof diagnostic de cancer gastrique [7] - [9] outil prometteur .Essentially, l'endoscopie a beenthe avec 2,7 à 4,6 fois le taux de détection plus élevé que les études de baryum [10]. Cependant, le diagnostic précoce du cancer de l'estomac par endoscopydependson compétence professionnelle.

Certains biomarqueurs non-invasifs pour le diagnostic ou le suivi de gastro-intestinal et hépatique tumorshave été rapporté. Par exemple, l'alpha-foetoprotéine (AFP) est l'un des biomarqueurs cliniquement utiles pour le diagnostic et le suivi du carcinome hépatocellulaire (HCC) .AFP a été élevé au-dessus de 20 ng /mL dans une étude dans plus de 70% des patients atteints de CHC [11]. Selon les conclusions de la Barcelona-2000 Association européenne pour l'étude de la conférence du foie (EASL), HCC pourrait être diagnostiquée sans cas de biopsyin où AFP est supérieure à 400 ng /ml avec un nodule de plus de 2 cm, montrant la preuve de artérielle hypervascularisation chez les patients cirrhotiques [12] .Incolorectal carcinome (CRC), l'antigène carcinoembryonnaire préopératoire (CEA) niveau est une covariable pronostique très important et il est recommandé par l'American Society of Clinical Oncology (ASCO) qu'il devrait être testé en pré-opératoire à fournir des informations pronostiques [13]. élévations série de CEA indiquent plus la possibilité d'une réapparition du CRC. Cependant, il n'y a pas biomarqueur fiable pour le cancer gastrique.

Par conséquent, la recherche de biomarqueurs fiables pour le cancer gastrique est très important pour la pratique clinique. Cette étude visait à découvrir des biomarqueurs protéiques fiables à partir de tissus appariés (tumeur et les tissus normaux adjacents) par deux dimensions différence électrophorèse sur gel (2D-DIGE), et d'identifier les protéines par assistée par matrice désorption /ionisation laser-imagerie par spectrométrie de masse (MALDI -IMS).

Matériaux et

des échantillons de tissus

des échantillons de tissus de méthodes ont été obtenus après informer les consentements ont été signés. Couplé tumeur samplesincluding et les patients normaux adjacents tissuesfrom ont été obtenues à partir de biopsies endoscopiques ou grades surgery.The tumorales ont été déterminées en fonction de la Commission mixte américaine sur le Cancer Staging système (AJCCS) par les pathologistes sous méthylène informations staining.Clinical bleu des patients a été enregistré, y compris l'âge, le sexe, le type de tumeur, l'invasion et la survie. En outre, la concentration du CEA dans le sérum a également été mesurée par dosage immunologique radioactif dans diagnosis.The médical de routine individualsenrolled dans la présente étude ont donné leur consentement éclairé par écrit à les publier l'étude de cas details.This a été approuvé par le Conseil de Kaohsiung University Medical Chung- Institutional Review Memorial Hospital Ho (KMUH-IRB-980382).

Deux électrophorèse sur gel dimension différence

Un (tableau 1) paire d'échantillons de tissus washomogenized (PRO 200, Bertec, Taiwan) en volume modéré de tampon de lyse (50 mM de Tris-HCl 8 m d'urée, 4% (p /v) de 3 - [(3-cholamidopropyl) diméthylammonio] -1-propanesulfonate, et pH 8,5). 50 pg d'échantillon de protéine individuelle a été marquée avec 400 pmol de Cy3 ou Cy5 séparément pendant 30 minutes (Fig. 1B). En outre, le mélange d'échantillon mis en commun (100 ug) a été marqué avec 800 pmol de CY2 comme étalon interne en même temps. Ensuite, le marquage reactionswere arrêtée par incubation de 1 pi de 10 mM de tampon de lysine pendant 30 minutes, le volume, puis une fois de tampon d'échantillon (8 M d'urée, 20 mM de dithiothréitol, 4% (p /v) de 3 - [(3 -Cholamidopropyl) dimethylammonio] -1-propanesulfonate, 0,5% (v v) tampon /IPG et peu de bleu de bromophénol) était ajoutés.Procédé première séparation, isoélectrofocalisation, a été réalisée en utilisant bouchon chargement sur les bandes de gel (7 cm, pI 4- 7) à 20 ° C sous la tenue 15000voltage heures (système IPGphor, GE Healthcare). Après équilibrage avec du dodécylsulfate de sodium, le second separationwas effectué using4-12% de dodécylsulfate de sodium-polyacrylamide à une électrophorèse sur gel. Les images de gel ont été acquises respectivement (Typhoon TRIO variable mode Imager, GE Healthcare) en utilisant 488, 532 et 633 nm lasers avec un filtre d'émission de 520, 532 et 670 nm. Toutes les images ont été analysées avec DeCyder 6.5 logiciel (GE Healthcare) pour sélectionner les protéines différentielles qui wereselected selon onthe placement en dessous d'une valeur significative de 0,05 selon l'étudiant t
-test

. En-gel tryptique digestion

Les gels colorés avec Sybro Ruby (sigma) ont ensuite été décoloré avec 10% de méthanol et de l'acide acétique à 7% dans de l'eau déminéralisée pendant exactement 30 min.Le visibles-taches gels sous un transilluminateur UV (Spectroline) étaient utilisé pour creuser pour les protéines intéressantes manuellement. Ces particules de gel ont été lavées dans 100 ul de 25 mM de bicarbonate d'ammonium dans 50% d'acétonitrile pendant 15 min, puis lavées dans 200 ul de 25 mM de bicarbonate d'ammonium dans de l'eau déminéralisée pendant 15 mn à deux reprises, et ensuite assez d'acétonitrile ont été ajoutés pour réduire la des particules de gel. Après le séchage, vers le bas, le gel individuel particleswereincubated avec 3 ul de 20 ng /ul de trypsine dans 25 mM de bicarbonate d'ammonium à 4 ° C pendant 1 heure, puis 3 ul d'mM de bicarbonate d'ammonium 25 On a ajouté à digérer les protéines à 56 ° C pendant 1 heure. Après In-gel digestion, 2 ul d'acétonitrile à 100% avec de l'acide trifluoracétique à 1% ont été ajoutés à la solution, puis des échantillons ont été soumis à des ultrasons pendant 10 minutes pour libérer les peptides à partir de particules de gel.

Analyse par spectrométrie de masse pour l'identification des protéines

Chaque solution de protéine digérée avec de la trypsine a été mélangée 1:01 avec 10 mg /mL de α-cyano-4-hydroxycinnamique dissous dans 50% d'acide trifluoracétique acétonitrile /0,1% et repéré sur AnchorChip MALDI cible (Bruker Daltonics GmbH , Bremen, Allemagne) jusqu'à ce que sec. Les peptides ont été analysés par MALDI-TOF /TOF UltraflexIII (Bruker Daltonics) sous 20 kV avec le modèle positif et que les données de pic ont été transférées Flexanalysis ™, version 3.0 (Bruker Daltonics) pour le calcul de pointe et d'étalonnage. MASCOT 2.2 (matrice Science) a été utilisé pour faire correspondre les peptides avec la base de données NCBI ou Swiss-Prot pour l'identification des protéines. Le paramètre a été limité à la taxonomie humaine parameters.Meanwhile, la cystéine carbamidomethyl a été utilisé comme une modification fixe, et oxydé methionine en tant que modification variable. La probabilité (P) est basée sur mowse score calculé à partir de -10 × Log (P). Protein score supérieur à 56 était significative ( p
< 0,05). Par ailleurs, l'un des principaux pics de peptides apparaissant sur le spectre a été utilisé pour confirmer le résultat identique, en identifiant la séquence d'acides aminés, qui est appelée peptide procédé fragment d'empreintes digitales.

par Western Blot

Les paires des échantillons de tissus ont été homogénéisés (Pro 200, Bertec) dans le tampon de lyse (10 mM de phosphate de sodium, le chlorure de sodium à 0,9%, 1% de Triton®-X100, pH 7,4) et mises en incubation par agitation à 4 ° C pendant 1 heure. Après s'être débarrassé des granulés précipités par centrifugation à grande vitesse (10000 tours par minute, 5 minutes), les surnageants pipettes ont été ajoutés au tampon (10 mM de phosphate de sodium, le chlorure de sodium à 0,9%, 8 M d'urée, 30% de glycérol, 2 échantillonner % de dodécylsulfate de sodium, 0,1% de β-mercaptoéthanol et 0,1% de bleu de bromophénol) par rapport 1: 1 et on fait bouillir à 100 ° C pendant 5 minutes pour la protéine denature.Approximately 20 pg de chaque protéine de l'échantillon ont été chargés sur la grille individuelle de 4- 12% de sodium par électrophorèse sur gel de polyacrylamide-dodécylsulfate (SDS-PAGE, Invitrogen). Le système de buvard sec iblot (Invitrogen) a été utilisé pour transformer les protéines de fluorure de polyvinylidène (PVDF) à membrane à base d'ions circulant le long d'une électrode de cuivre. Après avoir utilisé 0,5% de lait pour éponger la membrane de PVDF pendant 30 min, l'anticorps primaire LeIndividu (2 pg /ml) a été ajoutée pour l'incubation pendant 2 heures à secouer. Les anticorps secondaires conjugués conformes à la peroxydase de raifort (HRP) (2 pg /ml) ont été incubées pendant 1 heure en agitant de façon consécutive. Entre les processus d'incubation, repeatedlywashings par du tampon PBS (phosphate de sodium 10 mM, pH 7,4 et 0,9% de chlorure de sodium) weredone. Le système de détection ECL (Millipore) a été réalisée, et les images ont été acquises par un système d'imagerie (Gel système XR Doc, Bio-Rad) en fonction du temps à explorer modérée.

immunohistochimie

immunohistochimie était performedusing une méthode de coloration à la peroxydase standard. Les échantillons de tissu ont été coupés par un cryostat (HM525, Microm) des coupes de tissus .Fresh (10 um) sur les lames de lysine revêtues ont été driedon un dispositif de chauffage à 37 ° C et successivement immergées par séquentiel 75%, 95% et 100% d'éthanol pour 1 minute pour la protéine de fixation. En bref, l'activité de peroxydase endogène a été stoppée avec 3% de peroxyde d'hydrogène pendant 10 minutes. L'épisode d'antigène a été exposé en plongeant la lame de tissu dans 10 mM d'acide citrate à l'intérieur de l'eau bouillante pendant 25 minutes. incubations successives avec les différents anticorps HRP-conjugué antibodyandthe primaire secondaire ont été effectuées pour personne 1 heure sur de trembler. Le kit AEC (Sigma) a été utilisé pour colorer les tissus, et l'opération a suivi le manuel joint. En bref, la solution themixed de 2,5 M de tampon acétate, chromogène AEC (3-amino-9ethylcarbazole) et 3% de peroxyde d'hydrogène wasperformed instantanément et consécutivement incubé avec des tissus slides.The diapositives de coloration de l'image ont été observées et acquises sous un microscope (BX51, Olympus) .

Statistiques d'analyse

le logiciel statistique SPSS a été effectuée pour calculer la signification selon l'étudiant t
-test et la corrélation entre les GRP78, GSTpi, A1AT, ApoAI et GKN- 1. Le significantdifference ( p
valeur) était acceptable que moins de 0,5.

Résultats

Biomarkers découverte basée sur 2D-DIGE

tissus de cancer gastrique ont été analysés en 2D-DIGE et par rapport aux tissus normaux appariés pour rechercher les biomarqueurs putatifs du cancer gastrique. Différences de proteinexpressions supérieur à 1,2 fois étaient des candidats putatifs. L'image de gel a été la présentation de protéines emplacement marqué par cy-colorants (Fig. 1). Quinze protéines pourraient être identifiées, y compris le glucose-protéine régulée 78 (GRP78), le choc thermique apparenté 71 kDa (HSC70), la protéine disulfure isomérase A3 (PDIA3), mitochondrial sous-unité de l'ATP synthase bêta (ATPB), protéine apparentée isomérase-protéine disulfure 5 (PDIRP5), gastricsine, transférase de la pi glutathion (GSTpi), apolipoprotéine AI (Apo AI), l'alpha-1 antitrypsine (A1AT) et gastrokine-1 (GKN-1) .Dans 3 répétitions doubles, certaines protéines identiques ont été trouvés à différents endroits de gel et exclus sous le soupçon de modification post-traductionnelle. Enfin, cinq protéines dont GRP78, GSTpi, ApoAI, A1AT et GKN-1 ont été confirmés et validés en outre en tant que marqueurs putatifs de cancer gastrique. Les comparaisons détaillées par stereopicture et agrandie imageswere de gel de la figure 2.

Western blot et l'analyse statistique

Twelvepairs des tissus provenant de patients atteints de cancer gastrique ont été utilisés comme groupe de validation. Quatre patients étaient de stade I, 3 patients étaient de stade II, 2 patients étaient de stade III, et 3 patients étaient au stade IV. L'information clinique a été répertorié dans le tableau 1.five des protéines (GRP78, GSTpi, ApoAI, A1AT et GKN-1) ont été confirmés par les résultats blotting.Amongthe Western, GRP78 et GSTpiwere significantlyup réglementés tandis A1AT était significativement régulée à la baisse dans l'estomac tissus cancéreux par rapport aux tissus normaux (Fig 3.) .Pour GSTpi, nineout de 12 patients (75%) avaient jusqu'à réglementés expressions de protéines dans tumortissues; d'autre part, 10 des 12 patients (83%) ont régulé à la baisse protéine A1AT expression.Regarding la relation entre les expressions de protéines et stades cliniques, GRP78 a une tendance à augmenter de stade I au stade IValthough aucune signification statistique n'a pu être trouvée. L'expression de l'A1AT GSTpi et ne sont pas corrélés avec le stade clinique (figure 4)

Fait intéressant, les expressions protéiques de GRP78 dans ces paires de tissus ont correspondu avec celui de l'ApoAI (r ^{2. -0,61, p
< 0,01) et A1AT (r 2: -0.49, p
< 0,05) (figure 5).. Pendant ce temps, l'expression des protéines de l'ApoAI est corrélée à celle de l'A1AT (r 2: 0,62 p
< 0,01, fig. 4). Les résultats ont indiqué que ces trois marqueurs putatifs, GRP78, et ApoAI A1AT, ont été associés les uns avec les autres dans l'expression des protéines. Sur le contraste, GSTpi et GKN-1 semblait être indépendant pour l'expression des protéines.}

immunohistochimie

DespiteGRP78, GSTpi et A1AT étant statisticallydifferent de manière significative, la tendance expressional d'autres protéines était le même que le observation dans l'expérience 2D-DIGE. Immunohistochimie a été utilisée pour valider les résultats acquis de l'expérience western blot. GRP78, GSTpi, ApoAI, GKN-1, et ont été validés A1AT dans des tissus de cancer de l'estomac et des tissus non cancéreux comme représenté sur la figure 6. Les expressions de protéines dans des paires de tissus étaient en accord avec l'observation faite dans un transfert de Western. En particulier, les protéines régulés à la hausse, GRP78 et GSTpi, ont été spécifiquement situés sur les cellules d'adénocarcinome gastrique. D'autre part, les protéines régulées vers le bas, dont l'ApoAI et A1AT étaient présents dans les glandes gastriques normales. Une autre protéine régulée vers le bas, GKN-1, a été montré que celui qui est apparu sur la muqueuse du tissu gastrique.

Discussion

Il est important d'avoir des biomarqueurs pour le diagnostic et le suivi des cancer.However gastrique, antigène carcinoembryonnaire (CEA), hydrate de carbone antigène (CA19-9) et CA72-4 ne sont pas couramment utilisés dans practices.The étude clinique actuelle visant à divulguer des biomarqueurs putatifs en comparant les protéines différentielles entre le cancer et les tissus normaux appariés. par la suite, ces biomarqueurs putatifs ont été examinés dans la validation group.Five protéines putatives, y compris GRP78, GSTpi, ApoAI, A1AT et GKN-1, ont été identifiés par électrophorèse sur gel à deux dimensiondifference électrophorèse (2D-DIGE) andmatrix-désorption laser assistée /ionization- imagerie par spectrométrie de masse (MALDI-IMS) et fatherlyvalidated dans 12 patients.Among cinq protéines putatives cliniques, GRP78 et GSTpi étaient significativement régulée à la hausse et plus particulièrement améliorée dans les cellules cancéreuses par western blot et le contraste immunohistochemistry.In, A1AT wassignificantlydown-réglementée et avait positif et une corrélation négative avec l'expression de l'ApoAI et GRP78
.

de nombreux marqueurs putatifs du cancer de l'estomac ont été proposées dans les niveaux de studies.High précédentes de GSTpi dans les cancers de l'estomac a été démontrée [14] .Les expressions de GSTpi ont également été corrélées avec stagewhere de cancer gastrique élevé GSTpi werefound dans 50% à des stades I ou II, et 80% au stade III ou IV patients atteints de cancer gastrique [15] .Une étude antérieure a montré que les patients GSTpi-positifs avaient moins de taux de survie à cinq ans sans maladie (49,0%) par rapport à GSTpi négatif patients (75,0%), a indiqué GSTpi était un marqueur de signification pronostique [16] .Dans la présente étude, la surexpression de GSTpi dans 75% des patients atteints de cancer gastrique était également demonstrated.However, le degré de surexpression de GSTpi n'a pas été corrélée avec des stades cliniques (Fig. 4).

Over-expressionde protéine GRP78 a également été signalé comme un biomarqueur putatif de cancers.GRP78 gastro-over-expressions peuvent être détectés et liés à la scène et le pronostic de l'adénocarcinome oesophagien [17], et le cancer colorectal [ ,,,0],18]. Elle est l'une des protéines de réponse au stress cellulaires qui jouent un rôle important dans la biologie des tumeurs telles que la régulation de l'apoptose et le maintien de l'équilibre du calcium intracellulaire [19], [20]. Il a également été rapporté que plus-expressions de GRP78 par immunohistochimie dans des échantillons de cancer gastrique et ganglions métastatiques ont été inversement corrélée à la survie des patients [21]. Cependant, les méthodes utilisées dans la présente étude étaient différents du rapport de Zhang. Nous avons exploré protéines candidates par 2D-DIGE pour séparer les protéines différentielles et MALDI-TOF /TOF pour identifier des peptides dans le cancer appariés et normal tissues.In notre étude, la surexpression de GRP78 a augmenté et a eu une tendance à la corrélation avec les stades cliniques, mais pas signification statistique en raison de la limitation du nombre de cas
.

la régulation des protéines peuvent jouer un rôle important dans la carcinogenèse. Dans la présente étude, trois protéines, ApoAI, A1AT et GKN-1, ont été régulés à la baisse dans les tissus gastriques normales par rapport à un cancer gastrique tissus.Utilisation relation de ApoAI et le cancer gastrique n'a pas été signalée. ApoAI est l'un des principaux constituants des protéines de cholestérol des lipoprotéines de haute densité (HDL-C) et joue un rôle primordial dans le maintien de transport du cholestérol et l'effet athéroprotecteurs de HDL-C [22] .Apolipoproteins tels que ApoAI peut moduler la réponse de lipopolysaccharide-inducedinflammatory dans septicémie [23]. Dans la présente étude, il est possible que la diminution de l'ApoAI est le reflet d'une inflammation chronique, qui est une cause de la cancérogenèse. Une étude plus poussée est nécessaire de démontrer le lien entre la diminution de ApoAI et dys-régulation de l'inflammation
.

Bien que l'augmentation A1AT dans les étapes initiales et corrélation avec l'état d'avancement des stades de cancer gastrique a été observé par Bernacka K. et al. [ ,,,0],24], des données limitées pourrait permettre d'élucider l'augmentation A1AT comme un marqueur tumoral du cancer gastrique. Au lieu de cela, une diminution de A1AT dans le cancer gastrique a été trouvé dans notre étude. A1AT possède une activité anti-inflammatoire in vitro et contribue à la suppression de la synthèse de cytokines pro-inflammatoires telles que l'interleukine-8, le TNF-alpha, l'interleukine-1 bêta [25]. Il a été rapporté que les facteurs génétiques de l'hôte qui affectent l'interleukine-1-bêta peut déterminer le phénotype de la maladie de l'infection par H. [26] pylori. Il est possible que la diminution de l'A1AT inhibe proinflammatoire effet de suppression des cytokines. [25]. Dans notre étude, la corrélation entre la diminution A1AT et ApoA1 était présumé un indicateur de l'inflammation chronique.

Gastrokine-1 (GKN-1), possédant des effets mitogéniques sur les cellules épithéliales intestinales (IEC-6), est en baisse régulés dans les tissus du cancer gastrique par rapport à la muqueuse gastrique normale appariés dans notre étude. Gastrique muqueuse restauration après une blessure peut être entravée si GKN-1 est régulée à la baisse [27], [28] .Il a été rapporté que GKN1 est lié à des signaux apoptotiques qui sont importants pour la réparation des tissus lors de la transformation néoplasique [29]. Les données de la présente étude suggère également une diminution de GKN-1 peut être trouvé dans les tissus de cancer gastrique.

méthode basée sur la protéomique pour identifier les protéines liées à l'apoptose dans le cancer gastrique a été précédemment rapporté par Bai Z. et al [ ,,,0],30] .Nevertheless, protéines d'expression différentielle de la présente étude était pas identique au rapport de Bai suggérant ENO1, GRP78, GRP94, PPIA, Prdx1 et PTEN comme le cancer gastrique potentiel biomarkers.Regarding le développement du cancer gastrique, il est un processus complexe, et interactions entre l'hôte des expositions, de l'environnement, et des bactéries telles que Helicobacter pylori
.Un facteur ou une seule protéine ne pouvait pas être en mesure de prédire l'apparition et la progression du cancer gastrique. Dans la présente étude, cinq protéines putatives se sont révélés être exprimés de manière différentielle dans les tissus appariés (tumeur et tissu normal adjacent). Deux d'entre eux (GRP78 et GSTpi) étaient régulés à la hausse et les autres (ApoAI, A1AT et GKN-1) ont été régulés à la baisse. D'autres études seront nécessaires pour élucider theseproteins asbiomarkers pour la détection du cancer gastrique.

• PLOS ONE: Diminué Core-fucosylation Contribue à malignité dans le cancer gastrique
• PLOS ONE: MYC Déréglementation dans le cancer gastrique et ses implications clinicopathologiques