Абстрактный
Цель
<р> В настоящем исследовании изучали клиническую значимость трансмембранной протеазы, серина 4 (TMPRSS4) и внеклеточной регулируемой киназы 1 (ERK1) в области развития, прогрессии и метастазирования рака желудка.
Методы
<р> Immunohistochemistry использовали для анализа экспрессии TMPRSS4 и ERK1 в 436 желудка случаев рака и 92 незлокачественные желудка тканей человека.
Результаты
<р> уровни белка из TMPRSS4 и Erk1 были повышающей регуляции в желудочных поражений рака по сравнению с соседними нераковых тканей. Высокая экспрессия TMPRSS4 коррелирует с возрастом, размер, классификация Лорен, глубина вторжения, лимфатических узлов и отдаленных метастазов, региональный этап лимфатических узлов и TNM стадии, а также с выражением Erk1. В стадии I, II и III, 5-летняя выживаемость больных с высоким уровнем экспрессии TMPRSS4 была значительно ниже, чем у пациентов с низким уровнем экспрессии. Далее многофакторный анализ предполагает, что до регуляции TMPRSS4 и Erk1 были независимыми прогностическими показателями заболевания, наряду с глубиной инвазии, лимфатических узлов и отдаленных метастазов и стадии TNM.
Финансирование:. Это исследование была высказана поддержка за счет гранта от провинции Чжэцзян Департамента науки и научно-исследовательского фонда технологий (2008C33040) и национальных специальных фондов для фонда здравоохранения (200802112). Доноры не играет никакой роли в дизайн исследования, сбора и анализа данных, решение о публикации или подготовки рукописи
<р> Конкурирующие интересы:.. Авторы заявили, что не существует никаких конкурирующих интересов
Введение
II типа трансмембранный сериновых протеаз (TTSPs) были признаны в качестве нового подсемейства сериновых протеаз с доменом протеолитической, трансмембранный домен, короткий цитоплазматический домен и стволовой области переменной длины, содержит модульные структурные домены [ ,,,0],1] - [2]. Большинство TTSPs участвуют в развитии и прогрессии опухоли, главным образом, на основе их дизрегуляции выражении. Трансмембранный протеазы, серина 4 (TMPRSS4) является TTSP, который экспрессируется на высоком уровне в панкреатических, щитовидной железы, легких и колоректального рака [3] - [4]. TMPRSS4 индуцированных инвазивность и эпителиально-мезенхимальных перехода (EMT) путем активации сигнализации FAK и Эрк [5]. Внеклеточной регулируемой киназы 1 (Erk1) является членом МАР-киназ и действует в сигнальный каскад, который регулирует различные клеточные процессы, такие как пролиферации, дифференцировки и клеточного цикла в ответ на различные внеклеточные сигналы [6]. Биологические функции и клиническое значение TMPRSS4 и Erk1 при раке желудка не поняты. Настоящее исследование исследовали экспрессию TMPRSS4 и Erk1 в 436 хирургических образцах рака желудка с помощью иммуногистохимии, чтобы исследовать возможную корреляцию экспрессии TMPRSS4 и ERK1 с клинико-патологическими переменных, а также определить прогностическое значение выражения TMPRSS4 и ERK1.
материалы и методы
Архивные желудочные ткани Образцы и неопухолевой Слизистая
<р> желудочные раковые ткани были собраны из образцов гастрэктомия из 436 пациентов (311 мужчин, 125 женского пола, средний возраст 60,0 лет, диапазон 30-91) из отделения хирургии, провинции Чжэцзян Народной больницы, с января 1998 года по январь 2004 года был тканей фиксированных формалином, парафин, и диагноз клинически и гистологически в отделы желудочно-кишечного тракта хирургии и патологии. Все пациенты имели последующие записи для &К раствору 5 лет. Последующий срок был декабрь 2008 г. продолжительность жизни была рассчитана с момента операции до истечения срока или даты последующего смерти, которая была вызвана в основном рецидива рака или метастазов. Девяносто два незлокачественные желудочные ткани человека были получены из гастрэктомии смежных желудка краев рака > 5 см. Обычная химиотерапия была дана пациентам с болезнью прогрессирующей стадии после операции, но никакого лечения излучение не вводили ни одному из пациентов, включенных в наше исследование.
Immunohistochemistry
<р> Иммуногистохимическое анализ [11] - [12] было проведено с целью изучения измененную экспрессию белка в 92 незлокачественных образцах желудка человека ткани и 436 человека желудка раковых тканей. Короче говоря, слайды обжигались при температуре 60 ° С в течение 2 ч с последующим депарафинизации с ксилолом, и регидратации. Срезы погружали в ЭДТА антигенной буфере поиска информации и для извлечения микроволновке антигена, после чего их обрабатывают 3% раствором перекиси водорода в метаноле, чтобы подавить эндогенную активность пероксидазы, с последующей инкубацией с 1% бычьего сывороточного альбумина, чтобы блокировать неспецифическое связывание. Срезы инкубировали с кроличьими анти-TMPRSS4 (Proteintech Group, Inc) и кроличьего анти-Erk1 (Cell Signaling Technology), в течение ночи при 4 ° С. Нормальная козья сыворотка была использована в качестве негативного контроля. После промывки срезы ткани обрабатывали вторичными антителами. Тканевые срезы были затем контрастно гематоксилином, обезвоженной и монтирование.
Оценка результатов
<р> TMPRSS4 и Erk1 окрашивали в лейкоцитарной окрашены в цитоплазме и ядре. Степень иммунным окрашиванием был рассмотрен и оцениваются независимо двумя наблюдателями на основе интенсивности окрашивания [11], [13], [14]. Окрашивание интенсивность не оценивали в соответствии со следующими критериями: 0 (нет окрашивания), 1 (слабое окрашивание = светло-желтый), 2 (умеренное окрашивание = желто-коричневый), и 3 (сильное окрашивание = коричневый). Умеренный и сильное окрашивание было использовано для определения опухолей с высокой TMPRSS4 или экспрессии erK1, и нет и слабого окрашивания были использованы для обозначения низкой TMPRSS4 или выражение erK1.
Resuts
Выражение TMPRSS4 заархивированные Желудочные образцов тканей и неопухолевой Слизистая
TMPRSS4 белка был обнаружен в 14 из 92 (15,22%) образцах слизистая неопухолевых человека, и все образцы выражали белок на низком уровне. TMPRSS4 белок был обнаружен в 245 436 (56,19%) случаев рака желудка человека, высокий уровень экспрессии белка TMPRSS4 был обнаружен в 203 (46,56%) опухолей. TMPRSS4 был локализован преимущественно в цитоплазме или ядре первичного рака (рис 1A, B и C).
высокая экспрессия TMPRSS4 коррелируют с возрастом, размер, классификация Лорен, глубина вторжения, лимфатических узлов и отдаленных метастазов, региональный этап лимфатических узлов и TNM стадии ( P Корреляция между Erk1 регуляцию и клинические особенности желудочной Рак Корреляция между TMPRSS4 Expression и прогноз Корреляция между erK1 Expression и прогноз <бр> в стадии I, II и III опухоли, уровень 5-летней выживаемости у больных с высоким уровнем экспрессии Erk1 была значительно ниже, чем у больных с низкой экспрессией ( P Многомерный анализ параметров и клинико-патологическими прогноза факторы с возможными прогностические эффектов при карциноме желудка анализировали с помощью регрессионного анализа Кокса. Исследование показало, что лимфатические узлы и отдаленные метастазы ( P Обсуждение
&л; 0,05) (таблица 1). выражение TMPRSS4 не коррелируют с пола, локализации опухоли, дифференциации или гистологической классификации ( P
> 0,05). (Таблица 1)
<р> Высокая экспрессия Erk1 коррелирует с возрастом, локализация опухоли, размер, глубина инвазии, дифференциация, классификация Лорен, лимфатических узлов и отдаленных метастазов, региональный этап лимфатических узлов и стадии TNM ( P
≪ 0,05) (таблица 2). выражение Erk1 не коррелируют с пола или гистологической классификации ( P
> 0,05). (Таблица 2)
<р> В стадии I, II и III опухоли, уровень 5-летней выживаемости у больных с высоким уровнем экспрессии TMPRSS4 была значительно ниже, чем у больных с низкой экспрессией ( P
&л; 0,05) (рисунок 2). В IV стадии опухоли, экспрессия TMPRSS4 не коррелируют со скоростью 5-летняя выживаемость ( P
> 0,05). (Рисунок 2)
&л; 0,05) (рис 3). В IV стадии опухоли, экспрессия Erk1 не коррелируют со скоростью 5-летняя выживаемость ( P
> 0,05). (Рисунок 3)
= 0,005), TNM стадия ( P
= 0,005), экспрессия TMPRSS4 ( P
= 0,000) и Erk1 ( P
= 0,000) были независимыми прогностическими факторами больных раком желудка. Тем не менее, возраст, пол, местоположение опухоли и размер, гистологической классификации, дифференцировка опухоли, глубина инвазии, классификация Лорен, и этап узел регионарных лимфатических не имел прогностическое значение.
Ассоциация среди экспрессии TMPRSS4 и Erk1
<р> Двести четыре желудка случаев рака имели низкую экспрессию как TMPRSS4 и Erk1, и сто сорок четыре желудка случаев рака имели высокий уровень экспрессии обоих TMPRSS4 и Erk1. Был значимая корреляция между TMPRSS4 и Erk1 (χ 2 = 155,1; p = 0,0001) (таблица 3). Мы также обнаружили результаты пациентов желудка TMPRSS4-положительных /Erk1-отрицательных, TMPRSS4-положительных /Erk1-положительных, TMPRSS4-негативный /Erk1-положительных и TMPRSS4 отрицательных результатов /erK1-отрицательные, и мы обнаружили, что существует значительная разница в общие сравнения (χ 2 = 256,9; P = 0.000, рисунок 4). Среднее время выживаемости составили 42,8 ± 2,23, месяцы для TMPRSS4 (+) /Erk1 (-) группа, 27,9 ± 1,27 месяца для TMPRSS4 (+) /Erk1 (+), 54,7 ± 0,72 месяца для TMPRSS4 (-) /Erk1 (- ), 39,2 ± 3,19 месяца для TMPRSS4 (-.) /Erk1 (+) соответственно
<р> из множества молекул, вовлеченных в канцерогенез и развития человеческих опухолей, протеаз были широко изучали в качестве важных участников канцерогенеза многих опухолей. В последнее время большое внимание было сосредоточено на роли типа II трансмембранный сериновых протеаз (TTSPs) в процессе развития опухоли [15] - [16]. TTSPs являются членами семейства клеточных поверхностных ассоциированных протеаз, которые обеспечивают разнообразие нормальных клеточных функций, а также опухолевой инвазии и метастазированию.
<Р> TMPRSS4 является TTSP, что было известно, что в ряде повышающей регуляции рака, в частности, в поджелудочной и рака щитовидной железы [4], [17], а выражение TMPRSS4 коррелирует с метастатическим потенциалом рака поджелудочной железы [3]. TMPRSS4 является необходимым и достаточным для человеческой линии клеток рака легкого NCI-H322, клеточная линия аденокарциномы толстой кишки Colo205 и ободочной линии раковых клеток HCT15 выполнить миграцию и инвазию [18]. Исследование показало, что экспрессия TMPRSS4 в желудочном поражениях рака были тесно связаны с возрастом, размер опухоли, ее локализации опухоли, глубина инвазии, инвазии судно, лимфатических узлов и отдаленных метастазов и стадии TNM. Было обнаружено, что экспрессия TMPRSS4 существенно коррелирует с прогнозом рака желудка. В стадии I, II и III, показатели 5-летней выживаемости больных с высоким уровнем экспрессии TMPRSS4 была значительно ниже, чем у пациентов с низким уровнем экспрессии. На стадии IV, экспрессия TMPRSS4 не коррелируют со скоростью 5-летняя выживаемость. Далее многофакторный анализ позволил предположить, что глубина вторжения, лимфатических узлов и отдаленных метастазов, стадии TNM, и повышающей регуляции TMPRSS4 были независимыми прогностическими показателями рака желудка. Сверхэкспрессия TMPRSS4 играет решающую роль в долгосрочной распространения радиационно-индуцированных и метастазирования остаточных гепатоцеллюлярной карциномы, облегчая эпителиально-мезенхимальных перехода (EMT) [19]. было обнаружено, экспрессия TMPRSS4 в опухолях с плоскоклеточный рак (SCC) гистологии значительно выше, чем те, с аденокарциномой (AC) гистологии. Кривые Каплана-Мейера показал, что высокие уровни TMPRSS4 были в значительной степени связано со снижением общей выживаемости у пациентов с SCC гистологии, в то время как никакой корреляции не было найдено для гистологии переменного тока [20].
<р> Erk1 участвует в канцерогенезе за счет регулирования различные клеточные процессы, такие как пролиферации, дифференцировки и клеточного цикла в ответ на различные внеклеточные сигналы. фактор роста гепатомы происхождения участвует в желудочном процессе канцерогенеза и способствует пролиферации и метастазированию через ERK1 /2 активации [21]. ERK1 в качестве важного посредника сигнализации лизофосфатидиловой кислоты, приводящей к усилению активности сфингозинкиназы 1 (SphK1) и указывают на SphK1 и производства сфингазина-1-фосфата в качестве потенциальных терапевтических мишеней при раке желудка [22]. Взаимодействие между FVIIa и TF индуцирует протеазы активированные активации рецептора 2, таким образом, приводит в действие ERK1 /2 и IκB-α трансдукции сигнала /NF-kB путь, чтобы регулировать экспрессию гена IL-8, TF, и каспазы-7, и в конечном счете, способствует пролиферации клеток SW620 и миграции [23]. Выражение Erk1 при раке желудка и его клиническое значение не поняты. Настоящее исследование было изучение экспрессии Erk1 в 436 хирургических образцах рака желудка с помощью иммуногистохимии. Исследование показало, что высокий уровень экспрессии белка ERK1 был обнаружен в 173 (39,68%) опухолей. Высокая экспрессия Erk1 коррелирует с возрастом, локализация опухоли, размер, глубина инвазии, дифференциации, классификации Лорен, лимфатических узлов и отдаленных метастазов, стадия регионарных лимфатических узлов, TNM стадии и плохим прогнозом.
<Р> Кроме того, мы исследовали экспрессию TMPRSS4 в желудочном образцов рака и его корреляции с выражением erK1. Мы обнаружили положительную корреляцию между TMPRSS4 и выражения erK1, предполагая, что TMPRSS4 могут быть вовлечены в канцерогенеза, прогрессии и метастазирования рака желудка путем содействия пролиферации клеток путем активации ERK1.
Недавно обнаруженные крупные фаги стирают границу между жизнью и неживой
Что делать с гепатитом С?
Язвенный колит и отсутствие микробов в кишечнике
Исследователи надеются, что анализ крови, который точно диагностирует фибромиалгию, станет доступен в течение пяти лет.
Грибы и бактерии в кишечнике могут в равной степени влиять на здоровье человека и тяжесть заболевания.
Ученые раскрыли загадочный случай синдрома автомобильной пивоварни
Кормить домашних животных сырой пищей безопасно,
находит новое исследование Крупное международное исследование показывает, что владельцы домашних животных не считают, что кормление сырой пищей увеличивает риск заражения членов семьи. Сырая пища вклю
Микробиом полового члена является резервуаром для бактерий, связанных с бактериальным вагинозом.
Среди инфекций, передающихся половым путем (ИППП), бактериальный вагиноз поражает более 20 процентов женщин во всем мире. Заболевание возникает из-за размножения определенных бактерий во влагалище.
Средиземноморская диета способствует здоровому старению с более здоровым микробиомом кишечника
Новое исследование опубликовано в журнале онлайн Кишечник в феврале 2020 года сообщается о поразительных оздоровительных эффектах перехода на средиземноморскую диету всего на один год. Результаты бы