Абстрактный
Фон
<р> НПМ, TFF3 и TACC1 являются молекулярные маркеры, которые играют важную роль в клетке дифференциация. При этом, мы исследовали их прогностическое влияние у пациентов с первичным раком желудка (GC) и определили, могут ли они быть использованы в качестве маркеров более агрессивных желудочных карцином путем определения степени экспрессии в желудочном образцах карциномы человека.
Финансирование:. Это исследование поддерживается Шаньдун фонд естественных наук (2009HW024); Шаньдун исследовательский проект Фонд премии Отлично молодых ученых (2006BSB14114; BS2010YY013). Шаньдун Снасть ключевых проблем в области науки и техники (2010GSF10245; Y2006C23). Доноры не играет никакой роли в дизайн исследования, сбора и анализа данных, решение о публикации или подготовки рукописи
<р> Конкурирующие интересы:.. Авторы заявили, что не существует никаких конкурирующих интересов
Введение материалы и методы Пациенты и клинические образцы Результаты НПМ TFF3 и TACC1 паттерны экспрессии в опухолевых клетках Пациент Переменные клинико-патологическими НПМ, TFF3 и TACC1 выражения значительно выше у пациентов с плохим дифференцированной гистологического типа GC, чем те, у больных с хорошо дифференцированной гистологического типа GC (NPM, 0,88 против 0,12; TFF3, 0,90 против 0,10; TACC1, 0,90 против 0,10; P &л; 0,05). Только выражение НПМ была значительно выше у пациентов с печеночной метастазирования (0,88 против 0,12; P &л; 0,05) или рецидив (0,73 против 0,27; P &л; 0,05). TFF3 была значительно выше у пациентов с положительным метастаза лимфатических узлов, чем у больных с отрицательной метастаза лимфатических узлов (TFF3, 0,61 против 0,39; р &л; 0,05). Выражение TACC1 достоверно коррелирует с венозной инвазии (0,88 против 0,12; P &лт; 0,05) и у женщин (0,69 против 0,31, P &лт; 0,05). Клинические и гистологические переменные приведены в таблице 2. однофакторный анализ Одномерные анализ показал, что возраст, метастазов в лимфатических узлах, TFF3 сверхэкспрессии и TACC1 избыточная экспрессия достоверно коррелировала с короткой выживаемости время (Таблица 3, Рисунок 2). Для статистического анализа, назначенный "группу высокого риска" имел измененную экспрессию 2-х или 3-х белков. назначенный "группа низкого риска" имел измененную экспрессию 0 или 1, белков. Прогноз был беднее, у пациентов с положительной коэкспрессией НПМ /TFF3, TFF3 /TACC1, НПМ /TACC1 и НПМ /TFF3 /TACC1, чем у больных с положительным выражением НПМ, TFF3 или TACC1 в одиночку, или с отрицательным коэкспрессией из этих маркеров (таблица 3). Многомерный анализ
<р> рак желудка (GC) является 4 й наиболее распространенной формой рака во всем мире (7,8% всех случаев рака) и 2 й ведущей причиной смерти от рака (9,7% всех случаев смерти от рака) по всему миру [1]. Хотя хирургическая резекция является жизнеспособным вариантом для пациентов GC на ранней стадии, контроль прогрессии GC остается сложной [2], [3]. Патогенез GC связано с несколькими факторами. В последнее время различные биологические факторы, вовлеченные в патогенез GC были идентифицированы, но их клиническое значение не было подтверждено. Более глубокое понимание биологической основы GC было бы полезно.
<Р> нуклеофосмин (НМП), также известный как numatrin или NO38, является членом семьи нуклеоплазмина (НПМ). Это ядрышек фосфопротеином постоянно курсируя между ядрышек и цитоплазмы [4]. НПМ оказывает множество функций, включая генерацию рибосом, поддержание геномной целостности и транспортировки белков в ядро [5]. Таким образом, нуклеофосмина /ген В23 (B23), кажется, участвует в регуляции клеточного роста, дифференцировки и запрограммированной гибели клеток [6], [7]. НМП избыточно экспрессируется или мутировали в раковых клетках человека, и, следовательно, является кандидатом прогностический маркер в толстой кишки, яичников и простаты [8], [9]. Однако, поскольку большинство из этих выводов были преимущественно основаны на косвенных данных с моделями в пробирке, точный вклад НПМ к туморогенезу далеко не ясно, во многом из-за отсутствия соответствующих клинических исследований.
<Р> фактор трилистника 3 (TFF3 ) является членом семейства генов TFF, которая кодирует ряд небольших муцин-ассоциированных полипептидов [10]. TFF3 в основном присутствует в желудочно-кишечном тракте и других эпителиальных тканей, и, как известно, играют важную роль в поддержании целостности слизистой оболочке [11]. TFF3 предполагается усилить миграцию клеток через модулирующих функций E-кадгерин /катенин комплексов [12]. В последнее время МЦГСФ было зарегистрировано сверхэкспрессируется на обоих уровнях генов и белков в человеческих новообразований, в том числе кишечника, поджелудочной железы и рака простаты
<р> преобразуя кислая обмотанный -.
Катушки 1 (TACC1) был первоначально идентифицированы в качестве единственной кодирующей последовательности последовательно в пределах найденной ампликону 8p11 рака молочной железы человека [13]. Она выражается в высоких уровнях во время эмбриогенеза, а затем вниз регулируется в дифференцированных тканях [13] - [15]. TACC1 участвует в нескольких видов рака, включая рака груди и яичников и лейкемии. В недавнем исследовании [16], TACC1 было установлено, что до регулируемого и действовать как онкоген в груди и рака яичников. Тем не менее, недавний серийный анализ экспрессии генов (SAGE) предположил, что TACC1 был понижающей регуляции в опухолях яичников и яичников линий раковых клеток [17]. Поэтому, будь то TCAA1 функционирует как онкоген [16] или супрессор опухоли [18] сильно зависящая от типа рака [13].
<Р> В настоящем исследовании мы исследовали уровни экспрессии НПМ, TFF3 и TACC1 у больных ГЦ, а также проанализировали их возможные корреляции с клиническими признаками и общей выживаемости (ОВ) больных GC.
<р> в это исследование было 142 пациентов (93 мужчины и 49 женщин), которые получали хирургической резекции первичной GC на кафедре общей хирургии в нашей больнице в период с июля 2007 года по сентябрь 2009 года протокол исследования был одобрен Комитетом по этике филиал больницы Циндао путем школы медицины университета (Циндао, Китай). Пациенты подписали информированное согласие. Средний возраст составил 59 лет (от 27 до 89 лет). Опухолевые образцы фиксировали в 10% растворе формальдегида и заливали в парафин. Ни один из пациентов не получал химиотерапии или лучевой терапии до операции. Патологические диагнозы и классификации были сделаны в соответствии с японской классификации карциноме желудка. Полные демографические и клинические данные были собраны ретроспективно. "Ранний рак" был определен как вторжение рака ограничивается подслизистой, и "прогрессирующий рак" был определен как вторжение рака в мышечная или серозной. Дата окончания наблюдения было в июле 2012 г., а средний период наблюдения для ОС составляла 47 месяцев (диапазон 3-59 месяцев) с 3-летней послеоперационной выживаемости 64,2%.
Immunohistochemistry
<р> Массив блоки разрезают на 4 мкм секций, депарафинировали и увлажненной в градуированной этаноле. Антиген поиска проводили погружением слайдов в цитратном буфере (рН 6,0) и микроволновую печь в течение 10 мин. Депарафинировали и секции гидратированные ткани обрабатывали 0,3% пероксидазой водорода в метаноле в течение 15 мин, промывали в PBS и инкубировали с первичными антителами против НПМ, TFF3 и TACC1 в течение ночи при 4 ° С (таблица 1). меченых антител был обнаружен с комплексом (PV9005, гиперчувствительность мыши, Пекин пихты Jinqiao, Китай) авидинбиотиновом-пероксидазы. Диаминобензидин был использован для визуализации осаждения с пероксидазой на антигенного сайта, и эти секции были контрастно гематоксилином.
<Р> иммуногистохимическое окрашивание оценивали полуколичественно путем измерения как интенсивности окрашивания (0, 1, 2, или 3, ) и степень окрашивания (0, 0%; 1, 0-10%; 2, 10-50%; 3, 50-100%). Счет для интенсивности и степени окрашивания были умножены, чтобы дать взвешенную оценку для каждого случая (максимально возможный, 9). Для статистического анализа, взвешенные оценки были сгруппированы в две категории, где баллы от 0 до 3 считались отрицательными, и от 4 до 9 положительным.
Статистический анализ
<р> Все статистические анализы проводились с использованием статистический пакет SAS версии 9.2. Тест X2 и точный критерий Фишера были использованы для изучения корреляции между экспрессией молекулярных маркеров и различных клинико-патологическими параметрами. Одномерный анализ проводили с помощью метода Каплана-Мейера, и статистическая значимость между кривыми выживаемости оценивали с помощью теста журнала ранга. ОС была определена с момента операции до момента смерти от рака. Для оценки независимых значений различных переменных на выживаемость, многомерный анализ был проведен в присутствии других переменных с использованием модели пропорциональных рисков Кокса. Только переменные значимого значения из однофакторного анализа были введены в регрессионного анализа Кокса. р &л; 0,05 считалось статистически значимым
<р> Выражение НПМ, TFF3 и TACC1 измеряли с помощью полуколичественного. IHC анализ. NPM был локализован в ядрышка, ядра и цитоплазмы опухолевых эпителиальных клеток (положительный 47% против 53% отрицательных) (рис. 1). Было выражено TFF3 в цитоплазме опухолевых эпителиальных клеток (положительный 44% против 56% отрицательный), а не окрашивание не наблюдалось в ядре (рис. 1). Была выражена TACC1 в цитоплазме опухолевых эпителиальных клеток (положительный 49% против 51% отрицательных) (рис. 1), а не окрашивание не наблюдалось в ядре.
<р> Средний возраст пациентов в данном исследовании было 59 лет (от 27 до 89 лет). Медиана наблюдения общей выживаемости составила 47 месяцев (диапазон 3-59 месяцев), а также 3-летняя послеоперационный выживаемость составила 64,2%. Размер средний опухоли составляла 35 мм (диапазон 15-130 мм). Что касается стадии опухоли, 14% (20/142) пациентов были в ранней стадии рака и 86% (122/142) были в прогрессирующего рака. узел метастазирование Лимфатические наблюдалась у 55% (78/142) пациентов. Отдаленные метастазы, в том числе печеночных метастазов, венозной инвазии и метастазирования брюшины, произошло у 15 пациентов.
корреляциях между данными и клинико-патологическими выражений НПМ, TFF3 и TACC1
<р> Многофакторный анализ показал, что метастазов в лимфатических узлах и экспрессия TFF3 и TACC1 в опухолевых эпителиальных клетках были независимыми прогностическими факторами для общей выживаемости (Таблица 4 ), и что отношение риска (HR) смерти опухолеассоциированному увеличилась на 3,409 раза в группе FF3 (P &ЛТ; 0,001, 95% ДИ 2.387-8.143). Увеличение 3,311 раза в HR смерти опухолеассоциированному в метастазов в лимфатических узлах группы была obviouslyly значимыми (Р &л; 0,001; 95% ДИ 2.148-8.651) (Таблица 4). 2,278-кратное увеличение HR смерти опухолеассоциированному в группе TACC1 также, очевидно, значимым (P &л; 0,001; 95% ДИ 1.803-5.959).
Обсуждение
<р> Таким образом, исследование экспрессии специфических генов в клетках желудка карциномы может помочь вам понять гистопатологические особенности GC.Consequently, необходимо изучить различные молекулярные маркеры, чтобы быть в состоянии понять механизм онкогенеза и метастазов. Поэтому мы искали, чтобы проверить группу из трех молекулярных маркеров, связанных с онкогенеза.
<Р> Выражение нуклеофосмин /B23 является ядрышек фосфопротеином постоянно курсируя между ядрышек и цитоплазмы [4], а также на уровне РНК и белка может способствуют к возникновению рака [19], [20], НПМ ранее был предложен в качестве прогностического фактора для выживания бедных и связан с опухолевой прогрессии и сопротивления [21], [22]. Тем не менее, результаты, полученные в данном исследовании, отличались в нескольких важных аспектах от этих более ранних исследований. Мы обнаружили, худший результат у больных с НМП сверхэкспрессии, но это не является независимым прогноз маркер, возможно, из-за биологических вариаций экспрессии белка в различных областях опухолевой ткани. В нашем исследовании, НПМ избыточная экспрессия наблюдалась у 73% пациентов с рецидивом, что свидетельствует о том, что НПМ избыточная экспрессия была в значительной степени связано с рецидивом. Изучение Tsui и др [23] также показали, что высокий уровень NPM /B23 коррелировало с рецидивом рака мочевого пузыря. Кроме того, она интригует предположить, что, возможно, НПМ коррелировало с способствовать печеночных метастазов этого рака. Результатом данного исследования указывает на то, что НПМ избыточная экспрессия может оказаться предиктором плохого прогноза GC, хотя точный основной механизм остается неясным.
<Р> Предыдущие исследования [24], [25] показал, что TFF3 часто сверхвыражен при раке молочной железы и других первичных опухолей. Наши результаты показали, что 44% желудочных карцином выразил TFF3, и что еще более важно, что TFF3 избыточная экспрессия в GC был независимым отрицательным прогностическим индикатором для ОС. Риск смерти была значительно увеличена у пациентов с TFF3 сверхэкспрессии. Кроме того, TFF3 избыточная экспрессия был второй самый высокий риск рядом с узлом метастаза лимфатический для послеоперационной выживаемости. Значительные корреляции между TFF3 Сверхэкспрессия и плохим прогнозом были ранее сообщалось в холангиокарциномой [26] и эндометриоидной карциномы эндометрия [27], что согласуется с нашим результатом. Наши данные также свидетельствуют о том, что TFF3 избыточная экспрессия коррелирует с более агрессивными параметрами клинико-патологическими. Например, TFF3 избыточная экспрессия была обнаружена в приблизительно 50% пациентов с положительным метастазов в лимфатических узлах VS.
Одну треть пациентов с отрицательным метастазировании в лимфатические узлы, указывая, что TFF3 избыточная экспрессия играет важную роль в узле метастаза лимфатический у больных ГЦ. Дальнейшие исследования молекулярного механизма необходимы, чтобы более точно определить роль экспрессии трилистника пептида в опухолевой прогрессии и метастазирования.
<Р> Предыдущие исследования [28], [29] было высказано предположение о возможном влиянии TACC1 на пролиферацию клеток и ее carcinogenetic свойства. Однако, насколько нам известно, нет никаких других исследований, сообщающие о корреляции между TACC1 Сверхэкспрессия и клиническое значение у больных ГЦ. Одним из важных результатов данного исследования является большое влияние гендерного фактора на TACC1 сверхэкспрессии, который показывает, что 69% женщин больных GC выставлены положительное выражение TACC1. Кроме того, число больных женщин с TACC1 сверхэкспрессии было вдвое больше, чем у мужчин с отрицательным выражением TACC1. Тем не менее, TACC1 избыточная экспрессия не оказывает существенного влияния на выживание в отношении пола, в отличие от значительного влияния на выживаемость различных возрастных групп, предполагая, что могут существовать и другие механизмы, влияющие на выживаемость пациентов GC. Результатом нашего многомерного анализа показали, что TACC1 избыточная экспрессия была независимым прогностическим фактором GC, что согласуется с более ранним выводом о прогностической значимости TACC1 наблюдается в опухолях яичников [30]. Кроме того, наши данные предоставляют доказательства того, что TACC1 избыточная экспрессия ассоциируется с венозным вторжением, подразумевая его возможную роль в метастазирование опухоли.
<Р> Примерно половина образцов рака были обнаружены коэкспрессией этих двух маркеров. Одномерный анализ показывает, что группа высокого риска была в значительной степени связано с более короткой общей выживаемости пациентов, и эта группа высокого риска показывает худший прогноз, чем группа с низким уровнем риска. Является ли комбинированное выражение НПМ, TFF3 и TACC1 вносит преимущество роста опухоли должны быть дополнительно определены в пробирке и клинических исследований.
<Р> В заключение TFF3 и TACC1 избыточная экспрессия в опухоли эпителиальные клетки хирургическим путем резекцию желудочной аденокарциномы может самостоятельно предсказать более короткое выживание. НПМ избыточная экспрессия достоверно коррелирует с клиническими признаками патологии ГК. Эти наблюдения указывают на то, что избыточная экспрессия имеет решающее значение для патогенеза и развития GC. Дополнительные исследования необходимы, чтобы обеспечить более прочную основу для разработки более эффективных терапевтических стратегий для GC и других злокачественных опухолей человека.
Мужчины, которые едят йогурт два раза в неделю, реже заболевают раком кишечника.
Длительное использование антибиотиков недоношенными способствует развитию лекарственно-устойчивых кишечных бактерий.
Женщины, рожденные с помощью кесарева сечения, имеют больший риск ожирения и диабета.
Глицирризиновая кислота как кандидат в лекарство от COVID-19
Будут ли диеты на основе ДНК и персонализированные лечебные продукты - будущее для похудения?
Качество сна может быть индикатором для более позднего исследования болезни Альцгеймера
Микробиом кишечника может сыграть роль в тяжелой форме COVID-19
Текущая глобальная пандемия COVID-19 вызвана бета-коронавирусом, тяжелым острым респираторным синдромом, коронавирусом-2 (SARS-CoV-2), который заразил более 22,1 миллиона человек и стал причиной 780 т
Растительная пища может передавать человеку устойчивые к антибиотикам супербактерии
Исследователи из Университета Южной Калифорнии (USC) на ежегодном собрании Американского общества микробиологов обнаружили, что растительная пища может передавать микробиому кишечника устойчивость к а
Сырой корм для домашних животных представляет опасность для людей и животных
В новом исследовании исследователи обнаружили, что домашние собаки и кошки, потребляющие сырое мясо, могут передавать людям штаммы устойчивых к антибиотикам бактерий. Их исследование под названием «Ди